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补肾化痰方改善长链非编码RNA类固醇受体RNA激活剂对人类卵巢颗粒样肿瘤细胞系细胞炎症反应作用机制研究
1
作者 潘紫萌 梁锦玲 +5 位作者 赵德敏 高玖妹 张新 马明 那冠男 徐芳 《环球中医药》 2025年第5期922-933,共12页
目的探究高表达的长链非编码RNA(long noncoding RNA,LncRNA)类固醇受体RNA激活剂(steroid receptor RNA activator,SRA)对人类卵巢颗粒样肿瘤细胞系(human ovarian granulosa-like tumor cell line,KGN)细胞增殖、凋亡及炎症反应的影... 目的探究高表达的长链非编码RNA(long noncoding RNA,LncRNA)类固醇受体RNA激活剂(steroid receptor RNA activator,SRA)对人类卵巢颗粒样肿瘤细胞系(human ovarian granulosa-like tumor cell line,KGN)细胞增殖、凋亡及炎症反应的影响及补肾化痰方含药血清的作用机制。方法构建人源LncRNA SRA过表达慢病毒载体并转染KGN细胞;制备补肾化痰方药液,将大鼠连续灌胃补肾化痰方7天,收集各组大鼠血清以备后续实验。将KGN细胞设置分组为:对照组、空载体组、SRA过表达组、补肾化痰方组。在倒置显微镜下观察各组细胞的生长形态;MTT实验检测细胞的增殖活力;免疫荧光观察细胞中增殖蛋白Ki67和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达;流式细胞检测细胞凋亡情况;ELISA法检测炎症因子白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和鞘磷脂(sphingomyelin,SM)表达水平;Western blot检测细胞中半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、活化半胱氨酸蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)、B细胞淋巴瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、鞘磷脂合酶(sphingomyelin synthase2,SGMS2)、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)和核因子-κB p65(nuclear factor-κB p65,NF-κB p65)蛋白的表达水平。结果(1)SRA过表达组的生存率高于对照组(P<0.05),补肾化痰方组的生存率低于SRA过表达组(P<0.05)。(2)SRA过表达组的Ki67和PCNA阳性蛋白的表达率均显著高于对照组(均P<0.001),补肾化痰方组的Ki67和PCNA阳性蛋白的表达率均显著低于SRA过表达组(均P<0.001)。(3)SRA过表达组的凋亡率显著低于对照组(P<0.001),补肾化痰方组的凋亡率显著高于SRA过表达组(P<0.001)。(4)SRA过表达组的TNF-α、IL-6、IL-1β和SM的浓度值均显著高于对照组(均P<0.001),补肾化痰方组的TNF-α和IL-6的浓度值低于SRA过表达组(均P<0.05),补肾化痰方组的IL-1β和SM的浓度值显著低于SRA过表达组(均P<0.01)。(5)SRA过表达组的cleaved Caspase-3蛋白相对表达量低于对照组(P<0.001),而Bcl-2、SGMS2、TGF-β1和NF-κB p65蛋白相对表达量高于对照组(均P<0.001).补肾化痰方组的cleaved Caspase-3蛋白相对表达量高于SRA过表达组(P<0.001),而Bcl-2蛋白相对表达量显著低于SRA过表达组(P<0.001),SGMS2、和NF-κB p65蛋白相对表达量低于SRA过表达组(均P<0.05),TGF-β1蛋白相对表达量显著低于SRA过表达组(P<0.01)。结论LncRNA SRA能够诱导KGN细胞炎症反应的发生,提高其增殖活力并抑制凋亡率,而补肾化痰方含药血清能够改善LncRNA SRA对KGN细胞的病理影响。 展开更多
关键词 补肾化痰方 长链非编码rna类固醇受体rna激活剂 多囊卵巢综合征 人类卵巢颗粒样肿瘤细胞系细胞 炎症反应
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长链非编码RNA与雌激素受体阳性乳腺癌患者他莫昔芬耐药关系的研究进展 被引量：1
2
作者 辛钰 姜慧慧 +1 位作者 武洪远 孙成铭 《当代医药论丛》 2022年第4期8-12,共5页
现阶段,乳腺癌已成为全球范围内常见的癌症之一。约有75%的乳腺癌患者雌激素受体(ER)呈阳性表达。目前临床上多采用雌激素受体拮抗剂(如他莫昔芬)对ER阳性乳腺癌患者进行治疗。他莫昔芬耐药(TAMR)现象的出现是临床上对此类乳腺癌患者进... 现阶段,乳腺癌已成为全球范围内常见的癌症之一。约有75%的乳腺癌患者雌激素受体(ER)呈阳性表达。目前临床上多采用雌激素受体拮抗剂(如他莫昔芬)对ER阳性乳腺癌患者进行治疗。他莫昔芬耐药(TAMR)现象的出现是临床上对此类乳腺癌患者进行治疗的主要障碍。大量的研究表明,长链非编码RNA(lncRNA)与ER阳性乳腺癌患者TAMR之间存在显著的相关性。因此,可将lncRNA作为乳腺癌的生物标志物或治疗的潜在靶点加以研究。本文对近5年来关于lncRNA与ER阳性乳腺癌患者TAMR关系的研究进展进行综述。 展开更多
关键词 长链非编码rna 雌激素受体 乳腺癌 他莫昔芬 耐药 雌激素受体拮抗剂
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长链非编码RNA lucat1对胃癌细胞侵袭和迁移能力的影响及其机制 被引量：4
3
作者 于贵林 林杰 +2 位作者 赵国华 艾福禄 王越 《山东医药》 CAS 2018年第20期17-20,共4页
目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)lucat1对胃癌细胞侵袭和迁移能力的影响及其机制。方法 (1)采用实时荧光定量PCR法检测正常胃黏膜细胞GSE-1和胃癌细胞SGC-7901、BGC-823中lncRNA lucat1和对甲酰肽受体2(FPR2)mRNA。(2)将体外培养的胃癌细... 目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)lucat1对胃癌细胞侵袭和迁移能力的影响及其机制。方法 (1)采用实时荧光定量PCR法检测正常胃黏膜细胞GSE-1和胃癌细胞SGC-7901、BGC-823中lncRNA lucat1和对甲酰肽受体2(FPR2)mRNA。(2)将体外培养的胃癌细胞SGC-7901、BGC-823分为观察组和对照组。观察组用Lipofectamine2000转染lucat1 shRNA,对照组不转染。转染48 h,采用实时荧光定量PCR法检测两组FPR2 mRNA相对表达量。(3)将体外培养的胃癌细胞BGC-823分为A、B、C组。A组转染lucat1 shRNA,B组转染lucat1 shRNA和FPR2过表达质粒,C组不转染。转染48 h,用Transwell小室实验和划痕实验观察各组细胞侵袭和迁移能力,结果分别用穿膜细胞数和细胞迁移距离表示。结果 (1)SGC-7901、BGC-823、GES-1细胞lncRNA lucat1相对表达量分别为3.651±0.332、3.023±0.331、1.000±0.098,FPR2 mRNA相对表达量分别为3.354±0.433、3.425±0.354、1.000±0.277。SGC-7901、BGC-823细胞lucat1、FPR2 mRNA相对表达量均明显高于GES-1细胞(P均<0.05)。(2)观察组、对照组SGC-7901细胞FPR2 mRNA相对表达量分别为1.00±0.05、0.48±0.04,BGC-823细胞FPR2mRNA相对表达量分别为1.00±0.04、0.48±0.04,两组比较P<0.05。(3)Transwell小室实验A、B、C组穿膜细胞数分别为(143±7)、(194±9)、(233±8)个,三组穿膜细胞数两两比较P均<0.05。划痕实验A、B、C组细胞迁移距离分别为(0.342±0.027)、(0.534±0.021)、(0.652±0.029)mm,三组细胞迁移距离两两比较P均<0.05。结论 lncRNA lucat1可促进胃癌细胞侵袭和迁移能力,其机制可能与上调FPR2表达有关。 展开更多
关键词 胃癌 长链非编码rna lucat1 甲酰肽受体2 细胞侵袭 细胞迁移
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长链非编码RNA——病毒与宿主相互作用中的新型调控因子 被引量：1
4
作者 赵学亮 刘海金 +2 位作者 萧飒 王兴龙 杨增岐 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期2059-2067,共9页
长链非编码RNA(long non-coding RNAs,lncRNAs)是一类长度>200 nt的非编码RNA,在多种生物学过程中发挥重要调控作用。近年来研究表明,lncRNAs可被病毒诱导表达,其作为一类新型的调控因子介导宿主与病毒相互作用,通过病原识别受体,以... 长链非编码RNA(long non-coding RNAs,lncRNAs)是一类长度>200 nt的非编码RNA,在多种生物学过程中发挥重要调控作用。近年来研究表明,lncRNAs可被病毒诱导表达,其作为一类新型的调控因子介导宿主与病毒相互作用,通过病原识别受体,以不同机制激活或抑制天然免疫应答反馈病毒感染。本文阐述了lncRNAs介导病毒与宿主相互作用中的调控机制,归纳了它们在宿主抗病毒天然免疫应答过程中的调控网络,以期为研究lncRNAs在抗病毒中的作用提供参考,为揭示病毒的致病机制和发现新的抗病毒靶标奠定基础。 展开更多
关键词 长链非编码rna 病毒 天然免疫 病原识别受体
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lncRNA DSCAM-AS1通过miR-144-5p/IRS2轴对甲状腺乳头状癌细胞的影响
5
作者 吴天思 陈珊珊 +4 位作者 高博 石佳宝 管佳琪 张小宝 张立广 《中国现代普通外科进展》 CAS 2024年第3期173-176,共4页
目的:探究长链非编码RNA(lncRNA)唐氏综合征细胞黏附分子反义1(DSCAM-AS1)通过微小RNA(miR)-144-5p/胰岛素受体底物2(IRS2)轴促进甲状腺乳头状癌(PTC)细胞生长和侵袭的作用。方法:将PTC细胞株TPC-1随机分为对照组(Control组,完全培养基... 目的:探究长链非编码RNA(lncRNA)唐氏综合征细胞黏附分子反义1(DSCAM-AS1)通过微小RNA(miR)-144-5p/胰岛素受体底物2(IRS2)轴促进甲状腺乳头状癌(PTC)细胞生长和侵袭的作用。方法:将PTC细胞株TPC-1随机分为对照组(Control组,完全培养基正常培养)、si-NC组(转染si-NC)、si-DSCAM-AS1组(转染si-DSCAM-AS1)、si-DSCAM-AS1+inhibitor NC组(si-DSCAM-AS1与inhibitor NC共转染)、si-DSCAM-AS1+miR-144-5p inhibitor组(si-DSCAM-AS1与miR-144-5p inhibitor共转染)。RT-qPCR法检测DSCAM-AS1、miR-144-5p和IRS2 mRNA的表达;CCK-8法检测细胞增殖能力;Transwell实验检测细胞的侵袭能力;Western blot检测IRS2蛋白的表达。双荧光素酶报告基因实验验证靶向关系。结果:与Control组相比,si-DSCAM-AS1组TPC-1细胞DSCAM-AS1表达、吸光度(A450)值、细胞侵袭数目、IRS2表达显著降低(P<0.05),miR-144-5p表达显著升高(P<0.05)。与si-DSCAM-AS1组相比,si-DSCAM-AS1+miR-144-5p inhibitor组A450值、细胞侵袭数目、IRS2表达显著升高(P<0.05),miR-144-5p表达显著降低(P<0.05)。DSCAM-AS1靶向负调控miR-144-5p表达,miR-144-5p靶向负调控IRS2表达。结论:沉默DSCAM-AS1可能通过上调miR-144-5p来抑制IRS2蛋白的表达,从而抑制PTC细胞生长和侵袭。 展开更多
关键词 长链非编码rna 唐氏综合征细胞黏附分子反义1 miR-144-5p 胰岛素受体底物2 甲状腺乳头状癌 侵袭
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LncRNA NR2F2-AS1靶向抑制miR-129-5p调控子宫内膜癌细胞增殖和凋亡研究 被引量：1
6
作者 华金仁 程慧明 +2 位作者 严菁 曾丹 潘玫 《临床医药实践》 2022年第10期726-730,共5页
目的:探讨长链非编码RNA(LncRNA)核受体亚家族2组F成员2反义RNA1(NR2F2-AS1)靶向抑制微小RNA-129-5p(miR-129-5p)调控子宫内膜癌细胞增殖和凋亡的情况。方法:选取2020年4月—2020年12月经病理检查确诊为子宫内膜癌的50例患者。采用荧光... 目的:探讨长链非编码RNA(LncRNA)核受体亚家族2组F成员2反义RNA1(NR2F2-AS1)靶向抑制微小RNA-129-5p(miR-129-5p)调控子宫内膜癌细胞增殖和凋亡的情况。方法:选取2020年4月—2020年12月经病理检查确诊为子宫内膜癌的50例患者。采用荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)对子宫内膜癌组织与细胞中miR-129-5p和LncRNA NR2F2-AS1的表达水平进行检测;用流式细胞术与MTT比色法(MTT法)对子宫内膜癌细胞(Ishikawa)凋亡与增殖水平进行检测;用蛋白质印迹法(Western blot)对细胞中B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、兔抗人单克隆抗体(Bax)、p21基因(p21)、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)的蛋白表达水平进行检测;采用双荧光素酶报告系统对miR-129-5p与LncNR2F2-AS1的调控关系进行验证。结果:子宫内膜癌组织中LncRNA NR2F2-AS1的含量明显高于正常子宫内膜组织(P<0.05)。干扰LncNR2F2-AS1表达、过表达miR-129-5p可抑制子宫内膜癌细胞增殖,加速细胞凋亡,细胞中的Bcl-2和CyclinD1含量大幅降低(P<0.05),而p21含量明显升高(P<0.05)。结论:干扰LncRNA NR2F2-AS1可以靶向促进miR-129-5p的表达,从而抑制子宫内膜癌细胞增殖,诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 微小rna 长链非编码rna核受体亚家族2组F成员2反义rna1 子宫内膜癌 增殖 凋亡
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食管鳞状细胞癌组织中IRAIN的表达变化及启动子甲基化状态观察
7
作者 邓镇生 林青 +2 位作者 田作春 李才 许静红 《山东医药》 CAS 2021年第3期14-17,共4页
目的观察胰岛素样生长因子1受体长链非编码RNA(IRAIN)在食管鳞状细胞癌(ESCC)组织中的表达变化,并探讨其启动子甲基化状态与患者临床病理参数的关系。方法行手术治疗的ESCC患者63例,术中取肿瘤组织和癌旁正常组织,分别采用QPCR法和MSP... 目的观察胰岛素样生长因子1受体长链非编码RNA(IRAIN)在食管鳞状细胞癌(ESCC)组织中的表达变化,并探讨其启动子甲基化状态与患者临床病理参数的关系。方法行手术治疗的ESCC患者63例,术中取肿瘤组织和癌旁正常组织,分别采用QPCR法和MSP法检测组织中IRAIN和启动子甲基化状态,并分析IRAIN启动子甲基化状态与IRAIN相对表达量和患者临床病理参数的关系。结果ESCC组织中IRAIN相对表达量低于癌旁正常组织(0.816±0.286比1.000±0.185,P<0.05)。IRAIN启动子甲基化的ESCC组织中IRAIN相对表达量、IRAIN高表达率均低于非甲基化的ESCC组织(P均<0.05)。ESCC组织中IRAIN启动子甲基化状态与患者肿瘤最大直径、TNM分期、淋巴结转移有关(P均<0.05)。结论ESCC组织中IRAIN表达降低、启动子甲基化率升高,IRAIN表达降低可能与其启动子甲基化状态有关;IRAIN启动子甲基化率与肿瘤转移有关。 展开更多
关键词 胰岛素样生长因子1受体 胰岛素样生长因子1受体长链非编码rna 甲基化 启动子甲基化 食管鳞状细胞癌
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