长期继代培养过程中楸树愈伤组织的分化能力 被引量：4

1

作者 董静 段秋笛 +2 位作者 徐艳红 周美琪 梁宏伟 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期373-379,共7页

以长期继代培养的楸树愈伤组织和新诱导的楸树愈伤组织为试验材料,利用石蜡切片比较分析它们的组织形态特征,并测定过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)和淀粉酶的活性,以及可溶性蛋白与可溶性糖的含量,以探究楸树愈伤组织长期继代培... 以长期继代培养的楸树愈伤组织和新诱导的楸树愈伤组织为试验材料,利用石蜡切片比较分析它们的组织形态特征,并测定过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)和淀粉酶的活性,以及可溶性蛋白与可溶性糖的含量,以探究楸树愈伤组织长期继代培养后分化再生困难的形成原因。组织形态学观察分析发现,继代培养7 a的白色颗粒状愈伤组织细胞中淀粉粒含量丰富,分布均匀,仍为胚性愈伤组织;新诱导的浅绿色愈伤组织存在明显的细胞分化中心,有均匀分布的淀粉粒,为早期胚性愈伤组织;新诱导的黄白色致密愈伤组织为非胚性向胚性转化的愈伤组织,新诱导黄白色疏松愈伤组织为非胚性愈伤组织。生理生化指标测定分析发现,继代培养7 a的楸树胚性愈伤组织中可溶性糖和可溶性蛋白的含量均显著高于新诱导出的3种愈伤组织,但其同工酶活性却较低,表明在长期继代培养的过程中,楸树愈伤组织的生理生化代谢活性降低。由此推测生理生化代谢活性的下降可能是造成楸树胚性愈伤组织长期继代培养后分化再生困难的重要因素。 展开更多

关键词 楸树 愈伤组织 长期继代 组织形态学 生理生化指标

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龙眼胚性愈伤组织长期继代培养及其染色体数目变异 被引量：40

2

作者 赖钟雄 陈春玲 +3 位作者 黄素华 桑庆亮 潘东明 陈振光 《福建农业大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第1期29-32,共4页

从龙眼幼胚培养诱导并筛选出的松散型胚性愈伤组织 ,在继代培养基上已培养 6 a以上 ,所保持的若干愈伤组织仍具有强烈的体细胞胚胎发生能力 .经细胞学检查 ,其中个别愈伤组织系的部分愈伤组织团发现有2 n=3x=4 5,或 2 n=4 x=6 0等染色... 从龙眼幼胚培养诱导并筛选出的松散型胚性愈伤组织 ,在继代培养基上已培养 6 a以上 ,所保持的若干愈伤组织仍具有强烈的体细胞胚胎发生能力 .经细胞学检查 ,其中个别愈伤组织系的部分愈伤组织团发现有2 n=3x=4 5,或 2 n=4 x=6 0等染色体数目的变异细胞 。 展开更多

关键词 龙眼 胚性愈伤组织 染色体数目变异 继代培养 长期继代保持

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长期继代对棉花胚性愈伤组织体胚发生能力及再生植株变异的影响 被引量：25

3

作者 薛美凤 郭余龙 +1 位作者 李名扬 裴炎 《西南农业学报》 CSCD 2002年第4期19-21,共3页

植物细胞在离体培养时,再生频率和再生植株的质量与培养时间密切相关。为探讨棉花胚性愈伤组织长期继代的可行性和适宜的继代策略,以川棉239胚性愈伤组织为材料,观察其在继代过程中颜色、质地、生长速度和体胚发生能力的变化,体胚及再... 植物细胞在离体培养时,再生频率和再生植株的质量与培养时间密切相关。为探讨棉花胚性愈伤组织长期继代的可行性和适宜的继代策略,以川棉239胚性愈伤组织为材料,观察其在继代过程中颜色、质地、生长速度和体胚发生能力的变化,体胚及再生植株畸形变异的发生频率。结果表明,通过在MSB+KT0 1mg/L+KNO31 9g/L和MSB+KT0 1mg/L+IAA0 1mg/L两种培养基上交替培养并结合选择性继代,川棉239体细胞胚胎发生能力虽然可保持较长时间,但随着继代时间的延长,再生能力却逐渐下降,畸形胚发生频率和再生植株不育率逐渐升高。棉花胚性愈伤组织的继代时间不宜超过1 5年。 展开更多

关键词 长期继代 棉花 胚性愈伤组织 体胚 发生能力 再生植株变异

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试管苗长期继代培养中的形态发生能力与遗传稳定性 被引量：15

4

作者 刘玲梅 汤浩茹 刘娟 《生物技术通报》 CAS CSCD 2008年第5期22-27,共6页

在植物组织培养过程中,继代培养是其中的重要环节,而长期继代则是种质资源离体保存的必要手段。综述了长期继代培养对植物试管苗形态发生能力和遗传稳定性的影响,探讨了继代培养过程中影响培养物形态发生能力和遗传稳定性的主要因素。

关键词 试管苗 长期继代 形态发生能力 体细胞无性系变异

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濒危植物香果树愈伤组织经长期继代后的6种同工酶研究 被引量：6

5

作者 杜景川 景丹龙 +1 位作者 陈发菊 李凤兰 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第19期10010-10014,共5页

[目的]研究濒危植物香果树愈伤组织经长期继代后的6种同工酶酶谱的变化。[方法]采用用非变性聚丙烯凝胶电泳技术对长期继代后的香果树愈伤组织的酯酶(EST)、酸性磷酸酯酶(ACP)、ATP酶(ATPase)、淀粉酶(AMY)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧... [目的]研究濒危植物香果树愈伤组织经长期继代后的6种同工酶酶谱的变化。[方法]采用用非变性聚丙烯凝胶电泳技术对长期继代后的香果树愈伤组织的酯酶(EST)、酸性磷酸酯酶(ACP)、ATP酶(ATPase)、淀粉酶(AMY)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)6种同工酶进行分析。[结果]香果树的胚性愈伤组织和非胚性愈伤组织在6种同工酶水平上均有差异,均可作为鉴别2者的依据。非胚性愈伤组织中的EST、ACP和POD的表达量明显高于胚性愈伤组织。褐化的非胚性愈伤组织与正常非胚性愈伤组织相比,在AMY、SOD和POD同工酶水平上无差别,而EST、ACP和ATPase同工酶含量减少;褐化的胚性愈伤组织与正常胚性愈伤组织相比,EST同工酶含量升高,其他5种同工酶含量降低。[结论]为研究香果树的长期组织培养过程中愈伤组织形态差异及褐化现象提供理论基础。 展开更多

关键词 香果树 愈伤组织 长期继代 同工酶 褐化

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培养基中附加6-BA长期继代培养对蝴蝶兰类原球茎活力及生理生化指标的影响 被引量：3

6

作者 刘福平 陈淳 +1 位作者 程小兵 郑明琼 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2021年第2期428-435,共8页

为了解培养基中附加6-BA长期继代培养对蝴蝶兰类原球茎(PLB)状态的影响,以只添加3 mg/L的6-BA和不添加植物生长调节剂(对照)培养基分别继代培养PLB 24个月,培养过程中观测PLB活力指标,分析相关氧化、抗氧化和DNA生化指标。结果表明,第8... 为了解培养基中附加6-BA长期继代培养对蝴蝶兰类原球茎(PLB)状态的影响,以只添加3 mg/L的6-BA和不添加植物生长调节剂(对照)培养基分别继代培养PLB 24个月,培养过程中观测PLB活力指标,分析相关氧化、抗氧化和DNA生化指标。结果表明,第8个月2组PLB活力指标没有显著差异,第16个月6-BA组PLB分化率显著升高,第24个月增值倍数和分化率分别显著降低和极显著降低,且PLB的玻璃化率较高;6-BA组PLB氧化胁迫水平在第8、第16个月都较对照低,第24个月较高,培养期间·OH相对含量和POD活性与氧化胁迫水平分别相向和反向消长;6-BA组PLB的DNA甲基化程度始终较对照低,增色效应到第24个月才降低。较强的氧化胁迫,·OH相对含量、H_(2)O_(2)和MDA含量提高,POD和CAT活性降低,以及DNA甲基化程度降低,与6-BA诱导PLB玻璃化有关。综上分析,含6-BA培养基长期继代培养蝴蝶兰类原球茎,在培养中期可减缓类原球茎衰老,培养后期则加剧了衰老退化,所以在蝴蝶兰类原球茎的继代培养中,应适时调整细胞分裂素用量和控制继代次数。 展开更多

关键词 蝴蝶兰类原球茎 长期继代 6-BA 活力 生理生化

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抗氧化剂减缓长期继代蝴蝶兰类原球茎衰老及生理指标变化 被引量：2

7

作者 刘福平 张小杭 崔寿福 《上海农业学报》 CSCD 2015年第5期42-46,共5页

为减缓长期继代蝴蝶兰类原球茎增殖、萌发能力降低,在培养基中添加抗氧化剂继代类原球茎24个月,观测类原球茎增殖能力、成活率及萌发率,并分析其生理学指标。结果表明:100 mg/L半胱氨酸与8.0 g/L甘露醇组合为适宜抗氧化剂浓度;在培养第2... 为减缓长期继代蝴蝶兰类原球茎增殖、萌发能力降低,在培养基中添加抗氧化剂继代类原球茎24个月,观测类原球茎增殖能力、成活率及萌发率,并分析其生理学指标。结果表明:100 mg/L半胱氨酸与8.0 g/L甘露醇组合为适宜抗氧化剂浓度;在培养第24个月,处理组每瓶鲜重较对照组显著提高,萌发率极显著提高;培养期间对照组和处理组类原球茎的总抗氧化能力、超氧化物歧化酶、过氧化物酶活性均有不同程度的下降,处理组总抗氧化能力、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶活性较对照极显著提高(主要在第16个月),对照组与处理组叶绿素水平均变化不明显。 展开更多

关键词 蝴蝶兰 类原球茎 长期继代培养 衰老 抗氧化剂 生理指标

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长期继代蝴蝶兰类原球茎对抗氧化剂的生理响应及DNA稳定性分析 被引量：1

8

作者 刘福平 陈淳 林志楷 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2016年第1期80-85,共6页

为了解抗氧化剂减缓长期继代蝴蝶兰类原球茎衰老的机理,本实验在培养基添加抗氧化剂100 mg/L半胱氨酸和8 g/L甘露醇继代类原球茎24个月,分析其相关氧化指标及DNA稳定性。结果表明,类原球茎培养期间处理组总活性氧水平变化趋势与对照组不... 为了解抗氧化剂减缓长期继代蝴蝶兰类原球茎衰老的机理,本实验在培养基添加抗氧化剂100 mg/L半胱氨酸和8 g/L甘露醇继代类原球茎24个月,分析其相关氧化指标及DNA稳定性。结果表明,类原球茎培养期间处理组总活性氧水平变化趋势与对照组不同,处理组比对照组低,对照组总活性氧水平消长趋势与超氧阴离子(O_2^-)生成速率较为一致,处理组则与羟自由基(·OH)相对含量的消长趋势较一致。继代期间丙二醛含量变化趋势与总活性氧水平变化趋势相似,处理组比对照组低。类原球茎DNA的SRAP分析结果表明,继代培养期间处理组与对照组间均未发生明显的DNA差异。类原球茎DNA甲基化程度变化趋势与总活性氧水平变化大体相同,中后期处理组比对照组低。 展开更多

关键词 蝴蝶兰 类原球茎 长期继代 抗氧化剂 氧化指标 DNA稳定性

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模拟干旱胁迫下褪黑素和表油菜素内酯对沟叶结缕草长期继代培养愈伤组织再生的影响 被引量：6

9

作者 周认 蔡宇 +1 位作者 林恬逸 柴明良 《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期36-44,共9页

本试验探究了外源褪黑素(melatonin, MEL)和表油菜素内酯(epibrassinolide, EBL)对继代培养17年的沟叶结缕草[Zoysia matrella (L.) Merr.]愈伤组织在干旱胁迫下再生的影响,旨在筛选干旱胁迫下提高长期继代培养的愈伤组织再生率的最优浓... 本试验探究了外源褪黑素(melatonin, MEL)和表油菜素内酯(epibrassinolide, EBL)对继代培养17年的沟叶结缕草[Zoysia matrella (L.) Merr.]愈伤组织在干旱胁迫下再生的影响,旨在筛选干旱胁迫下提高长期继代培养的愈伤组织再生率的最优浓度,并获得耐旱性强的再生植株。结果表明:0.20 mmol/L MEL能显著促进沟叶结缕草愈伤组织再生,再生率为61.1%。干旱胁迫显著抑制了愈伤组织的再生,随着聚乙二醇(polyethylene glycol, PEG)浓度的增加再生率降低,5%、10%PEG-6000胁迫下可获得耐旱性强的再生植株。在5%~15%PEG-6000胁迫下,添加0.05~0.20 mmol/L MEL或0.05~0.50μmol/L EBL对愈伤组织再生具有恢复作用;在10%PEG-6000胁迫下,0.20 mmol/L MEL是促进干旱胁迫下愈伤组织再生的最佳浓度,再生率为55.6%;MEL和EBL浓度过高则抑制再生。此外,在5%、10%PEG-6000胁迫下添加0.05~0.20 mmol/L MEL时,愈伤组织过氧化氢酶(catalase,CAT)活性显著升高;添加0.05~0.10μmol/L EBL时,愈伤组织过氧化物酶(peroxidase, POD)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)活性显著升高,2种外源激素诱发沟叶结缕草再生过程中不同抗氧化酶的响应。由此可见,0.05~0.20 mmol/L MEL或0.05~0.10μmol/L EBL对其再生能力具有显著的提升作用。本研究为提高沟叶结缕草长期继代的愈伤组织再生能力以及耐旱植株的筛选提供了新思路。 展开更多

关键词 沟叶结缕草 干旱胁迫 褪黑素 表油菜素内酯 长期继代的愈伤组织 抗氧化酶活性

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红松EC非胚性化及体胚分化启动过程的形态与生理特征

10

作者 钟玥 范震宇 +3 位作者 贯春雨 曹业萍 李青晨 梁艳 《中南林业科技大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期49-57,共9页

【目的】研究长期继代的红松胚性愈伤组织(embryogenic callus,EC)非胚性化及体胚(somatic embryogenesis,SE)分化启动的生理特性,探讨不同胚性的愈伤组织形态特征与生理特性对应关系,为突破红松体胚发生中的EC胚性难以保持的技术瓶颈... 【目的】研究长期继代的红松胚性愈伤组织(embryogenic callus,EC)非胚性化及体胚(somatic embryogenesis,SE)分化启动的生理特性,探讨不同胚性的愈伤组织形态特征与生理特性对应关系,为突破红松体胚发生中的EC胚性难以保持的技术瓶颈提供参考。【方法】本研究以红松长期继代获得的不同类型愈伤组织(分别为继代2个月和继代6个月的白色、黄色、水渍型、纤维化、褐化、含早期球形胚的愈伤组织)为材料,比较分析不同类型愈伤组织的形态特征、生理指标、体胚分化能力的差异。【结果】继代保持2~6个月获得的6种类型红松愈伤组织在颜色、质地等外部形态与组织细胞学特征,以及增殖速度与体胚分化能力方面差异明显,在继代2个月的白色高胚性愈伤组织(C1)中观察到明显的原胚团(PEMs)结构,并且这种类型愈伤组织能分化出球形胚,在其他5种类型的愈伤组织(C2-C6)中观察到PEMs结构的解体,以及大量形状不规则的细胞和降解的细胞,未见有球形胚的分化。高胚性的愈伤组织中可溶性糖及淀粉含量最高;高活性POD出现在高胚性的愈伤组织和褐化的愈伤组织中;SOD活性在高胚性的愈伤组织和有球形胚分化的愈伤组织中较低,而在增殖速度快的黄色愈伤中SOD活性较高;有球形胚分化的愈伤组织和低胚性的白色愈伤组织CAT活性最高;水渍型和纤维化的愈伤组织SOD、POD、CAT活性均较低。【结论】长期继代的红松EC保持胚性或失去胚性以及体胚分化启动过程受细胞内保护酶和贮藏类物质协同调控,高含量的可溶性糖和淀粉利于红松EC维持胚性,SOD、POD、CAT这3种关键酶在不同颜色质地的红松愈伤组织形成中的作用存在差异。 展开更多

关键词 红松 长期继代 胚性愈伤组织 形态特征 生理指标

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柑橘愈伤组织内源激素代谢与体细胞胚胎发生能力关系的研究 Ⅰ.柑橘不同愈伤组织体细胞胚胎发生能力的比较 被引量：10

11

作者 萧浪涛 胡家金 邓秀新 《湖南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期197-199,共3页

为了探明柑橘愈伤组织内源激素代谢与体细胞胚胎发生能力的关系 ,研究了长期继代保存的纽荷尔脐橙和伏令夏橙不同愈伤组织的体细胞胚胎发生 .结果表明 ,无论是在加有 3%蔗糖的 MT增殖培养基上 ,还是在加有30 m L/ L 甘油的 MT分化培养基... 为了探明柑橘愈伤组织内源激素代谢与体细胞胚胎发生能力的关系 ,研究了长期继代保存的纽荷尔脐橙和伏令夏橙不同愈伤组织的体细胞胚胎发生 .结果表明 ,无论是在加有 3%蔗糖的 MT增殖培养基上 ,还是在加有30 m L/ L 甘油的 MT分化培养基上 ,纽荷尔脐橙的胚性愈伤组织和二倍体伏令夏橙愈伤组织的体细胞胚胎发生能力均较强 ,而纽荷尔脐橙的非胚性愈伤组织 。 展开更多

关键词 柑橘 长期继代培养 愈伤组织 体细胞胚胎发生 内源激素代谢

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橡胶树热研88-13品种珠心易碎愈伤组织诱导及其胚状体发生 被引量：4

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作者 李哲 戴雪梅 +7 位作者 孙爱花 黄天带 周权男 黄华孙 林位夫 Ludovic Lardet Pascal Montoro Marc-Philippe Carron 《热带生物学报》 2010年第4期307-313,共7页

以橡胶树热研88-13品种的幼嫩种子的珠心组织为材料,诱导出胚性愈伤组织。对胚性愈伤组织诱导培养基、继代培养基中不同的影响因素如植物生长调节剂的种类和浓度、钙离子浓度等进行了研究,筛选到了合适的影响因素。经过连续5个月的继代... 以橡胶树热研88-13品种的幼嫩种子的珠心组织为材料,诱导出胚性愈伤组织。对胚性愈伤组织诱导培养基、继代培养基中不同的影响因素如植物生长调节剂的种类和浓度、钙离子浓度等进行了研究,筛选到了合适的影响因素。经过连续5个月的继代选择培养,逐渐诱导出易碎的胚性愈伤组织。对易碎胚性愈伤组织进行了长期继代培养。组织学切片证明长期继代培养的愈伤组织维持了胚性的状态。取继代培养了2年多的橡胶树热研88-13品种的珠心易碎胚性愈伤组织诱导胚状体,得到了186个胚状体,正在诱导植株再生。 展开更多

关键词 橡胶树 珠心 易碎胚性愈伤组织 长期继代培养 胚状体

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