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题名固定化吡哆醇激酶催化合成磷酸吡哆醇的研究
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作者
侯学雯
李梦磊
叶蕾
邱敏
张坤晓
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机构
江苏海洋大学药学院
江苏海洋大学江苏省海洋药物活性分子筛选重点实验室
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出处
《食品与生物技术学报》
CSCD
北大核心
2024年第12期119-126,共8页
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基金
国家自然科学基金青年基金项目(31601191)。
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文摘
【目的】利用镍螯合琼脂糖亲和层析介质(Ni-NTA)与组氨酸(His)标记的蛋白质特异性结合的原理,将Ni-NTA与His标记的大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)来源的吡哆醇激酶(EcpdxK)固定化,形成一种固定化式反应器,并研究吡哆醇(PN)转化为磷酸吡哆醇(PNP)的最适反应条件。【方法】采用单因素分析方法探讨温度、pH、金属离子浓度和回收次数等对该催化反应的影响。【结果】固定化EcpdxK的最适反应温度为55℃,最适反应pH为5.0,最适M g2+浓度为30 mmol/L。该固定化酶在最适反应条件下,10 min内可将99%的PN转化为PNP。在采用固定化酶填充床反应器时,EcpdxK反应液柱留时间为10 min,持续反应12 h后其转化效率仍高达93%。【结论】固定化EcpdxK具有良好的温度耐受性、pH耐受性及操作稳定性,该固定化EcpdxK催化合成PNP的工艺操作简单、成本较低,具有工业化应用潜力。
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关键词
吡哆醇激酶
固定化
镍螯合琼脂糖亲和层析介质
磷酸吡哆醇
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Keywords
pyridoxine kinase
immobilization
nickel-chelated agarose affinity chromatography medium
pyridoxine phosphate
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分类号
TQ466.2
[化学工程—制药化工]
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