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铜绿假单胞菌PAO1株基因组中2个SOS盒序列的初步鉴定
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作者 张克斌 周世文 +4 位作者 光丽霞 何晓梅 盛哈雷 张国斌 钱桂生 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期1032-1036,共5页
目的鉴定铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)PAO1株基因组中的SOS盒序列。方法挑选铜绿假单胞菌PAO1株基因组中16个可能含有SOS盒序列的DNA片段,经PCR扩增后,用纯化的LexA表达蛋白做凝胶滞后实验;将获得的2个阳性DNA片段进一步用D... 目的鉴定铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)PAO1株基因组中的SOS盒序列。方法挑选铜绿假单胞菌PAO1株基因组中16个可能含有SOS盒序列的DNA片段,经PCR扩增后,用纯化的LexA表达蛋白做凝胶滞后实验;将获得的2个阳性DNA片段进一步用DNaseⅠ足纹法进行LexA蛋白结合序列即SOS盒的鉴定;分析所获得的2个SOS盒中的回文序列,以此回文序列在PAO1基因组中进行检索,初步分析出可能的SOS盒序列和可能的调控基因。结果通过DNaseⅠ足纹法初步鉴定了PAO1基因组中2个SOS盒序列,即位于基因组4 052 647~4 052 662 bp位置的CTGTCTACTTATACAG序列和5 349 888~5 349 903 bp位置的CTGTATAAATAACCAG序列,分析其回文结构为"CTG…CAG",以此回文序列在基因组中进行检索,共获得了10个候选的SOS盒序列。结论初步证实了PAO1基因组中的2个SOS盒,并获得了10条SOS盒候选序列。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌pao1株 SOS盒 LexA蛋白 回文序列 凝胶滞后实验 DNASE Ⅰ足纹法
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铜绿假单胞菌HZ15全基因组和比较基因组学分析 被引量:1
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作者 杨德伟 施春兰 +7 位作者 曾舒泉 解紫薇 秦小萍 秦得强 高熹 顾小飞 谢永辉 吴国星 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期2653-2664,共12页
【目的】挖掘铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)菌株HZ15抑菌物质合成相关基因及其抑菌机理,探究不同来源铜绿假单胞菌的遗传多样性及特异性,为菌株HZ15的实际应用提供理论依据。【方法】采用Nanopore第三代测序技术对分离自鳞翅目... 【目的】挖掘铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)菌株HZ15抑菌物质合成相关基因及其抑菌机理,探究不同来源铜绿假单胞菌的遗传多样性及特异性,为菌株HZ15的实际应用提供理论依据。【方法】采用Nanopore第三代测序技术对分离自鳞翅目幼虫的铜绿假单胞菌菌株HZ15进行全基因组测序,并结合多种数据库对其基因组进行注释,同时与来自不同环境(人体、土壤、植物、废水)的另外9株铜绿假单胞菌进行比较基因组学和泛基因组分析。【结果】菌株HZ15含有1条6722482 bp的染色体,平均GC含量66.14%,共注释到6173个编码基因,总长度6018345 bp,编码区占基因组全长的89.53%。比较基因组学分析结果显示,10株铜绿假单胞菌在基因组大小、基因数量等方面均存在差异。菌株HZ15含有61个抗生素耐受基因、8个前噬菌体、53个水平基因转移及225个毒力因子。CAZy数据库注释发现,菌株HZ15含有多种可能与其抑菌活性相关的糖苷水解酶(GH18、GH19、GH23、GH73和GH103)。此外,菌株HZ15拥有编码3种金属螯合剂[Pf-5 pyoverdine、伪帕林(pseudopaline)和绿脓杆菌螯铁蛋白(pyochelin)]以及lankacidin C、氰化氢(hydrogen cyanide)、双环霉素(bicyclomycin)等抑菌活性成分的基因簇,还特有套索肽(lassopeptide)的次级代谢合成相关基因。泛基因组分析发现10株铜绿假单胞菌有10517个泛基因组基因,5278个核心基因组基因。泛基因组中,菌株HZ15拥有231个独特基因,其中aphA_(2)和bla基因与抗生素耐受性相关。【结论】菌株HZ15可能通过破坏病原菌细胞壁、释放毒素和抑菌活性成分等抑制病原菌生长,并因其具有较强环境适应能力,在生物防治领域具有良好的应用潜力。 展开更多
关键词 铜绿假单 HZ15 全基因组测序 活性 次级代谢产物
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铜绿假单胞菌PA16株粘附性、菌毛与质粒关系的研究 被引量:3
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作者 史红艳 刘克 +1 位作者 李菁华 关显智 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2001年第4期35-36,45,共3页
为探讨PA的质粒与粘附性及质粒与菌毛的关系 ,围绕PA16株的耐药性与质粒的关系、质粒与菌毛及粘附性的关系作了一系列的研究 ,结果表明PA16对所测的 7种抗生素全部耐药 ,其MIC >40 0mg/L ;PA16仅含有一种 2 7.3kb(18Mu)的质粒。转化... 为探讨PA的质粒与粘附性及质粒与菌毛的关系 ,围绕PA16株的耐药性与质粒的关系、质粒与菌毛及粘附性的关系作了一系列的研究 ,结果表明PA16对所测的 7种抗生素全部耐药 ,其MIC >40 0mg/L ;PA16仅含有一种 2 7.3kb(18Mu)的质粒。转化后此质粒也使JM10 9获得了对四环素的耐药性。消除此质粒后 ,PA16对四环素的耐药性消失。粘附试验证明PA16质粒消除株对尿道上皮细胞的粘附能力较野生株显著性减小 (P <0 .0 5 ) ,同时 ,透射电镜照片显示PA16野生株表面有致密、纤细刚直的菌毛 。 展开更多
关键词 铜绿假单 粘附性 质粒 PA16 耐药性
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在铜绿假单胞菌临床分离株1类整合子中发现携带新型耐药基因盒 被引量:3
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作者 武渊 李慧 +3 位作者 梅亚宁 李军 文怡 黄祖瑚 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期37-41,共5页
目的:研究铜绿假单胞菌中1类整合子的分布和结构特征及与多重耐药的关系。方法:应用聚合酶链反应(PCR)检测铜绿假单胞菌1类整合酶基因(intⅠ)并扩增其可变区;DNA测序技术分析1类整合子可变区的耐药基因;对1类整合子阳性菌采用琼脂平皿... 目的:研究铜绿假单胞菌中1类整合子的分布和结构特征及与多重耐药的关系。方法:应用聚合酶链反应(PCR)检测铜绿假单胞菌1类整合酶基因(intⅠ)并扩增其可变区;DNA测序技术分析1类整合子可变区的耐药基因;对1类整合子阳性菌采用琼脂平皿稀释法测定其MIC并进行转移接合明确其耐药基因转移情况;脉冲场凝胶电泳法(PFGE)了解这些阳性菌的遗传相关性。结果:47株铜绿假单胞菌临床分离株中,29株携带1类整合子,未检测到3类整合子。这29株包含的整合子均扩增出长度约4.3kb的可变区,核酸序列分析发现存在新型耐药基因盒组合形式aac(6’)-Ⅱ-aadA13-cmlA8-oxa-10,Genbank基因号为EU182575。其中基因盒aadA13以往未在铜绿假单胞菌中发现。同时第3个开放阅读框与已知基因cmlA5有95%的同源性,为编码氯霉素外排泵的基因盒,将其命名为cmlA8。PFGE结果分析显示29株阳性菌株具有高度的同源性。结论:本院流行的铜绿假单胞菌携带包含新型基因盒及组合形式的Ⅰ类整合子,再次证实1类整合子参与了铜绿假单胞菌的耐药和多重耐药。 展开更多
关键词 假单 铜绿 1类整合子 基因盒 耐药
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铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素的耐药机制——耐药株外膜蛋白OprD_2缺失 被引量:52
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作者 陈 瑞 唐英春 +2 位作者 朱家馨 吴本权 谈淑卿 《中国抗感染化疗杂志》 2001年第4期229-230,共2页
目的;研究铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素的耐药机制。方法:以亚胺培南为代表,应用十二烷酸磺酸钠-聚丙烯酞胺凝胶电泳(SDS-PAGE)外膜蛋白图谱、凝胶分光光度扫描分析方法,分别研究临床分离的铜绿假单胞菌亚胺培南耐药株和亚胺培南敏... 目的;研究铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素的耐药机制。方法:以亚胺培南为代表,应用十二烷酸磺酸钠-聚丙烯酞胺凝胶电泳(SDS-PAGE)外膜蛋白图谱、凝胶分光光度扫描分析方法,分别研究临床分离的铜绿假单胞菌亚胺培南耐药株和亚胺培南敏感株。结果:耐药组OprD2相对含量显著低于敏感组。结论:OprD2的缺失是铜绿假单胞菌对以亚胺培南为代表碳青霉烯类抗生素耐药的主要原因。 展开更多
关键词 铜绿假单 碳青霉烯类抗生素 耐药机制 耐药 外膜蛋白 OprD2 基因缺失
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同时产PER-1型和TEM-1型β内酰胺酶铜绿假单胞菌的检出 被引量:10
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作者 侯天文 尹晓琳 +4 位作者 王永祥 陈兴 李烛 张林 李玮 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2004年第4期295-298,共4页
目的 分析多重耐药铜绿假单胞菌临床株 (编号 0 10 7)对 β内酰胺类抗生素耐药情况及其原因。 方法 用改良三维试验分析 0 10 7株产生的 β内酰胺酶表型 ,以碱裂解法提取质粒 ,用聚合酶链反应 (PCR)方法扩增质粒的酶基因型别 ,并对阳... 目的 分析多重耐药铜绿假单胞菌临床株 (编号 0 10 7)对 β内酰胺类抗生素耐药情况及其原因。 方法 用改良三维试验分析 0 10 7株产生的 β内酰胺酶表型 ,以碱裂解法提取质粒 ,用聚合酶链反应 (PCR)方法扩增质粒的酶基因型别 ,并对阳性产物测序。结果  0 10 7号铜绿假单胞菌临床株产生超广谱 β内酰胺酶 (ESBLs) ,携有blaPER - 1基因 ,同时还有blaTEM - 1型基因。结论  0 10 7号菌株耐 β内酰胺类抗生素耐药的可能原因是产生PER - 1型的ESBLs和TEM - 1型的广谱酶。 展开更多
关键词 PER-1 TEM-1 Β内酰胺酶 铜绿假单 质粒 基因型
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铜绿假单胞菌DHA-1型AmpC酶的检测及耐药性分析 被引量:9
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作者 金保富 林平 陈佳玉 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期510-513,共4页
目的调查临床分离铜绿假单胞菌ESBLs、AmpC酶的产生、AmpC酶的基因型及对常用抗菌药物的耐药特征。方法采用VITEK-60型全自动细菌鉴定仪鉴定细菌;ESBLs检测及药敏试验按CLSI推荐的双纸片确证法和K-B纸片扩散法;AmpC酶检测采用头孢西丁... 目的调查临床分离铜绿假单胞菌ESBLs、AmpC酶的产生、AmpC酶的基因型及对常用抗菌药物的耐药特征。方法采用VITEK-60型全自动细菌鉴定仪鉴定细菌;ESBLs检测及药敏试验按CLSI推荐的双纸片确证法和K-B纸片扩散法;AmpC酶检测采用头孢西丁纸片扩散法筛选疑产阳性菌株,再经三维试验确诊;PCR扩增DHA结构基因。结果铜绿假单胞菌产ESBLs和AmpC酶总检出率分别为40.8%和38.2%,其中,单产AmpC酶、单产ESBLs和同产AmpC酶+ESBLs检出率分别为19.7%、26.3%和14.5%;26株三维试验阳性菌株PCR扩增出23株DHA-1型酶基因;药敏试验显示:产酶株的耐药性明显高于非产酶株,耐药现象在同产AmpC酶和ESBLs菌株中更为严重,产酶株和非产酶株对亚胺培南均有较高的敏感性。结论临床分离的铜绿假单胞菌产ESBLs和AmpC酶菌株检出率较高;AmpC酶基因型以DHA-1型为主要流行株;产AmpC酶和ESBLs的菌株呈高度耐药。 展开更多
关键词 铜绿假单 AMPC酶 DHA-1 ESBLS 耐药性
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海洋假单胞菌GY-1菌株的抗菌作用及其胞外抗菌蛋白的分离纯化 被引量:5
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作者 王淑芳 暴增海 +3 位作者 马桂珍 葛平华 吴少杰 付泓润 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第21期221-225,共5页
采用对峙培养法和牛津杯法测定海洋假单胞杆菌(Pseudomonas)GY-1菌株和发酵液的抑菌作用。结果表明:GY-1菌株和发酵液对小麦根腐病菌(Bipolaris sorokiniana)、禾谷镰刀病菌(Fusarium graminearum)、菠菜早疫病菌(Alternaria solania)... 采用对峙培养法和牛津杯法测定海洋假单胞杆菌(Pseudomonas)GY-1菌株和发酵液的抑菌作用。结果表明:GY-1菌株和发酵液对小麦根腐病菌(Bipolaris sorokiniana)、禾谷镰刀病菌(Fusarium graminearum)、菠菜早疫病菌(Alternaria solania)、斑点落叶病菌(Alternaria alternata)、油菜菌核病菌(Sclerotinia sclerotiorum)和小麦叶枯病菌(Alternaria tenuis Nees)等植物病原真菌有较强的抑制作用。发酵液采用硫酸铵分级沉淀、DEAE Sepharose Fast Flow柱层析、Sephadex G-75凝胶层析,以小麦根腐病菌为指示菌进行活性追踪和SDS-PAGE电泳纯度跟踪检测,纯化出一种对小麦根腐病菌具有明显抗菌作用的抗菌蛋白,其分子质量约为70.9kD。 展开更多
关键词 海洋假单GY-1 作用 蛋白 分离纯化
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铜绿假单胞菌对支气管扩张患者气道中基质金属蛋白酶-9和金属蛋白酶组织抑制因子-1表达的影响 被引量:8
9
作者 金前 黄飞华 +2 位作者 周颖 张影清 柴秀娟 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期384-389,共6页
目的对不同细菌感染的支气管扩张(BE)患者气道中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)的表达进行研究,分析铜绿假单胞菌(PAE)对MMP-9、TIMP-1表达的影响。方法采用病例对照研究的方法,分设BE组及对照组,BE组又根... 目的对不同细菌感染的支气管扩张(BE)患者气道中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)的表达进行研究,分析铜绿假单胞菌(PAE)对MMP-9、TIMP-1表达的影响。方法采用病例对照研究的方法,分设BE组及对照组,BE组又根据支气管肺泡灌洗液(BALF)培养结果分为PAE组及其他菌株组两个亚组。收集患者的BALF,ELISA法检测其中MMP-9和TIMP-1的浓度,并计算TIMP-1/MMP-9比值。同时取气管内膜活检组织,免疫组织化学法检测其中MMP-9及TIMP-1的表达。结果 MMP-9在PAE组及其他菌株组的BALF中均明显升高(P均=0.0000);MMP-9在PAE组(P=0.0421)及其他菌株组(P=0.0003)支气管内膜活检组织中的表达亦明显升高。TIMP-1在PAE组BALF中的浓度明显低于其他菌株组(P=0.0324);BALF中TIMP-1/MMP-9比值在BE组明显低于对照组(P=0.0000),PAE组明显低于其他菌株组(P=0.0026)及对照组(P=0.0000),而其他菌株组又明显低于对照组(P=0.0000)。结论 PAE感染可能是通过促使MMP-9分泌并抑制TIMP-1同步分泌而使BE病情恶化。 展开更多
关键词 铜绿假单 支气管扩张 基质金属蛋白酶-9 金属蛋白酶组织抑制因子-1
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临床分离铜绿假单胞菌喹诺酮耐药株gyrA基因突变及其对β-内酰胺类药物敏感性研究 被引量:2
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作者 李学如 朱雯 +3 位作者 贾文祥 刘莉 张再容 马巨辉 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第12期726-729,762,共5页
利用 PCR、限制性片段多态性分析 (RFL P)、DNA单链构像多态性分析 (SSCP)和 DNA测序等方法 ,对 10株成都地区临床分离耐喹诺酮类药物铜绿假单胞菌 gyr A基因进行研究。结果表明 ,成都地区耐喹诺酮类药物铜绿假单胞菌 gyr A的喹诺酮耐... 利用 PCR、限制性片段多态性分析 (RFL P)、DNA单链构像多态性分析 (SSCP)和 DNA测序等方法 ,对 10株成都地区临床分离耐喹诺酮类药物铜绿假单胞菌 gyr A基因进行研究。结果表明 ,成都地区耐喹诺酮类药物铜绿假单胞菌 gyr A的喹诺酮耐药决定区编码第 83位氨基酸密码子表现出高频单点突变 (10株中有 8株 ) ,其突变方式为 ACC→ATC。gyr A的 PCR扩增产物 Sac II酶切片段与测序结果一致。SSCP的带谱与测序结果比较 ,除 1株 (PSA2 )的 SSCP带谱与标准株相同 ,但测序结果有点突变外 ,其余菌株与测序结果一致。因此 ,利用 PCR- SSCP- RFL P系统 ,可快速、准确的检测耐喹诺酮类药物的铜绿假单胞菌 gyr A中至少一个碱基的差异。用二倍稀释法测定喹诺酮和 β-内酰胺类药物对耐药突变株体外抗菌活性 ,结果表明 ,铜绿假单胞菌 gyr A基因突变株对诺氟沙星、环丙沙星、左氧氟沙星、头孢他啶、亚胺培南和哌拉西林表现出不同的敏感性。试验所用 8株突变株对诺氟沙星和环丙沙星表现出高水平抗性 ;3株对左氧氟沙星敏感 ;3株对头孢他啶和哌拉西林表现出耐药 ,2株对亚胺培南耐药。 展开更多
关键词 铜绿假单 喹诺酮 耐药 gyrA 基因突变 Β-内酰胺类药物 敏感性
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BPIFB1在铜绿假单胞菌引起的炎症反应中的调节作用 被引量:2
11
作者 周伟强 冯秀艳 +2 位作者 肖纯凌 李舒音 王春胜 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期602-605,共4页
目的研究杀菌性/通透性增强蛋白折叠结构1(BPIFB1)在铜绿假单胞菌引起的炎症反应中的作用机制和调节途径。方法应用RNA干涉、特异性蛋白激酶抑制剂阻断法,通过ELISA、Western blot法测定BPIFB1与脂多糖(LPS)共同作用于RAW264.7细胞后膜... 目的研究杀菌性/通透性增强蛋白折叠结构1(BPIFB1)在铜绿假单胞菌引起的炎症反应中的作用机制和调节途径。方法应用RNA干涉、特异性蛋白激酶抑制剂阻断法,通过ELISA、Western blot法测定BPIFB1与脂多糖(LPS)共同作用于RAW264.7细胞后膜表面CD14、TLR受体以及胞内相关信号转导通路分子表达水平的变化情况。结果 BPIFB1与LPS作用后RAW264.7细胞表面CD14、TLR4和MyD88的表达水平明显下降;当细胞中MyD88、TRAF6、NF-κB等蛋白分子的表达被各自特异性siRNA所阻断后,BPIFB1与LPS抑制细胞因子TNF-α过表达的能力也被显著抑制;当用BPIFB1与LPS处理过的细胞用相应蛋白激酶抑制剂作用后,细胞内相关通路蛋白p38、pERK1/2、Akt1磷酸化水平被明显抑制。结论 BPIFB1与LPS结合通过阻抑相关胞内细胞因子的表达,降低了铜绿假单胞菌所产生的细胞炎性反应程度。 展开更多
关键词 BPIFB1 脂多糖 铜绿假单
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莫西沙星经ERK1/2通路抑制铜绿假单胞菌诱导气道上皮细胞产生MUC5AC 被引量:1
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作者 谢莉 谭小武 +3 位作者 曾赛丽 何振华 周洲 游晓星 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2013年第7期1041-1044,共4页
目的:研究喹诺酮类抗生素莫西沙星(moxifloxacin,MXF)对铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)诱导气道上皮细胞表达产黏蛋白MUC5AC的影响,并探讨其可能的分子机制。方法:体外培养NCI-H292细胞,用不同浓度的PA、产藻酸盐型PA脂多糖(... 目的:研究喹诺酮类抗生素莫西沙星(moxifloxacin,MXF)对铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)诱导气道上皮细胞表达产黏蛋白MUC5AC的影响,并探讨其可能的分子机制。方法:体外培养NCI-H292细胞,用不同浓度的PA、产藻酸盐型PA脂多糖(光滑型,sPA-LPS)、非藻酸盐型PA脂多糖(粗糙型,rPA-LPS)刺激,然后加入不同浓度MXF孵育24h,分别采用ELISA和实时定量PCR检测MUC5AC蛋白和mRNA的表达情况,Westernblot检测NCI-H292细胞内ERK1/2的激活情况。结果:PA、sPA-LPS和rPA-LPS能明显诱导NCI-H292细胞产生和表达MUC5AC,并能促进ERK1/2磷酸化。而MXF处理后,能以剂量依赖性方式抑制PA、sPA-LPS或rPA-LPS诱导的MUC5AC蛋白表达,并有效抑制ERK1/2的磷酸化。结论:MXF能抑制PA诱导的黏蛋白表达,因此有望用于PA诱导的黏蛋白过度分泌的治疗。 展开更多
关键词 假单 铜绿 莫西沙星 ERK1 2 MUC5AC
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78株铜绿假单胞菌的耐药性分析 被引量:2
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作者 包东武 杨增茹 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期570-570,共1页
关键词 铜绿假单 耐药性分析 2004年6月 临床检验中心 2002年 住院患者 分离 质控 分泌物 卫生部
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髓样细胞触发受体-1与铜绿假单胞菌感染和定植的相关性 被引量:1
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作者 高晓岚 艾中平 +1 位作者 湛晓勤 雷贤英 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2013年第4期559-561,共3页
目的:通过研究髓样细胞触发受体-1(triggering receptor expressed on myeloid cells-1,TREM-1)在铜绿假单胞菌呼吸系统感染和定植不同状态下表达水平的变化,探讨TREM-1与铜绿假单胞菌肺炎及呼吸道定植的相关性。方法:将90只SD大鼠随机... 目的:通过研究髓样细胞触发受体-1(triggering receptor expressed on myeloid cells-1,TREM-1)在铜绿假单胞菌呼吸系统感染和定植不同状态下表达水平的变化,探讨TREM-1与铜绿假单胞菌肺炎及呼吸道定植的相关性。方法:将90只SD大鼠随机分为肺部感染组、口咽部定植组及生理盐水对照组,并分别在3、9、24h运用ELISA法检测血清sTREM-1、C反应蛋白(CRP)和降钙素原(PCT)浓度;病理组织切片观察各组肺部炎症改变。结果:感染组3、9、24h血清sTREM-1、CRP及PCT的水平较定植组和对照组均明显增高(均P<0.05),定植组与对照组各指标比较差异没有统计学意义;感染组血清sTREM-1浓度与CRP、PCT含量呈正相关(相关系数分别为0.86和0.75,均P<0.01);肺组织病理改变在感染组9h最为严重。结论:TREM-1的检测有助于铜绿假单胞菌感染与定植的鉴别;TREM-1对感染性疾病预后判断有指导意义;在感染性疾病的诊断中血清sTREM-1与炎症指标CRP,PCT具有同样重要的意义。 展开更多
关键词 铜绿假单 髓样细触发受体-1 感染 定植
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老年肺部感染铜绿假单胞菌分离株耐药性调查分析 被引量:2
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作者 辜金莲 熊剑辉 《实用医学杂志》 CAS 1999年第8期656-657,共2页
铜绿假单胞菌是老年肺部感染最常见的病原菌,该菌多在院内环境寄居,当病人免疫力低下,使用抗生素后,或介入性诊疗时常导致本菌的院内感染,尤以肺部感染或在呼吸道寄生多见[1]。且该菌肺部感染的治疗由于其复杂的耐药机制,生物... 铜绿假单胞菌是老年肺部感染最常见的病原菌,该菌多在院内环境寄居,当病人免疫力低下,使用抗生素后,或介入性诊疗时常导致本菌的院内感染,尤以肺部感染或在呼吸道寄生多见[1]。且该菌肺部感染的治疗由于其复杂的耐药机制,生物膜的包裹和多重耐药而变得越来越困难... 展开更多
关键词 肺部感染 铜绿假单 分离 耐药性
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铜绿假单胞菌lasI,rhlI基因功能缺陷株的构建和生物学功能验证
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作者 陈双红 陈锐勇 +2 位作者 徐雄利 陈海庭 肖卫兵 《生物学杂志》 CAS CSCD 2012年第4期22-25,共4页
构建铜绿假单胞菌lasI,rhlI基因功能缺陷株,为进一步阐明氦氧饱和高气压暴露条件诱导lasI,rhlI基因介导铜绿假单胞菌毒力调节的分子机制研究奠定基础。用双亲株接合转移法删除lasI,rhlI基因ORF编码区,通过RT-PCR方法验证目标基因编码序... 构建铜绿假单胞菌lasI,rhlI基因功能缺陷株,为进一步阐明氦氧饱和高气压暴露条件诱导lasI,rhlI基因介导铜绿假单胞菌毒力调节的分子机制研究奠定基础。用双亲株接合转移法删除lasI,rhlI基因ORF编码区,通过RT-PCR方法验证目标基因编码序列mRNA的缺失;通过对细菌生长增殖能力、弹性蛋白酶代谢活性和细菌绿脓菌素分泌能力等表型的测定,验证目标基因编码序列缺失后的基因调节功能的缺陷。结果表明成功构建铜绿假单胞菌lasI,rhlI基因功能缺陷株,可作为进一步研究的基因工程菌。 展开更多
关键词 铜绿假单 LASI rhlI 双亲杂交
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密度感应系统基因lasR/rhlR对大鼠铜绿假单胞菌生物膜感染气管插管模型肺组织Foxp3、TGF-β_1和IL-10表达的影响 被引量:6
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作者 向青青 芦起 +4 位作者 余加林 王政力 冯蕾 艾青 张云辉 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期103-107,共5页
目的研究铜绿假单胞菌野生株(PAO1)及其密度感应(QS)系统基因las R/rhl R缺失株(Δlas RΔrhl R)生物膜感染对气管插管模型鼠肺组织Foxp3、转化生长因子β_1(TGF-β_1)、白细胞介素10(IL-10)表达的影响。方法 21只SD大鼠随机均分为3组(n... 目的研究铜绿假单胞菌野生株(PAO1)及其密度感应(QS)系统基因las R/rhl R缺失株(Δlas RΔrhl R)生物膜感染对气管插管模型鼠肺组织Foxp3、转化生长因子β_1(TGF-β_1)、白细胞介素10(IL-10)表达的影响。方法 21只SD大鼠随机均分为3组(n=7):PAO1组、Δlas RΔrhl R组及无菌对照组。体外培养生物膜(BF)并经导管置入气管,7d后行肺组织HE染色及肺部组织匀浆菌落计数(cfu),并检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-10、肺组织TGF-β_1、肺组织细胞Foxp3 m RNA表达情况。结果 PAO1组、Δlas RΔrhl R组肺组织均培养出细菌(cfu分别为10 400.00±6313.70、975.00±559.97/g肺组织),显著高于无菌对照组(未培养出细菌,P<0.05),且PAO1组肺部细菌量明显高于Δlas RΔrhl R组(P<0.05);肺组织HE染色结果显示:无菌对照组局部轻微充血,无明显炎症改变;PAO1组血管及支气管周围大量炎症细胞浸润,肺泡间隔增宽,局部脓肿、坏死;Δlas RΔrhl R组肺组织病理改变较PAO1组减轻。PAO1组、Δlas RΔrhl R组IL-10含量(分别为188.07±57.01ng/ml、93.31±17.26ng/ml)明显高于无菌对照组(57.43±22.13ng/ml),且PAO1组明显高于Δlas RΔrhl R组(P<0.05)。PAO1组、Δlas RΔrhl R组TGF-β_1累积光密度值明显高于无菌对照组,且PAO1组明显高于Δlas RΔrhl R组(P<0.05)。PAO1组、Δlas RΔrhl R组Foxp3 m RNA表达量(分别为4.62±1.07、2.15±1.43)明显高于无菌对照组(0.65±0.32),且PAO1组明显高于Δlas RΔrhl R组(P<0.05)。结论铜绿假单胞菌QS系统las R/rhl R基因可促进铜绿假单胞菌生物膜引起的气管插管模型大鼠的炎症反应,促进肺组织Foxp3表达上调,伴随TGF-β_1、IL-10分泌增多,促使感染迁延化和慢性化。 展开更多
关键词 铜绿假单 密度感应 生物膜 叉头转录因子类 转化生长因子β1 白细介素10
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铜绿假单胞菌分泌蛋白Pec1抑制肺巨噬细胞吞噬功能的初步研究 被引量:1
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作者 林少清 舒磊 +1 位作者 杜兴冉 冯旰珠 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期1304-1309,共6页
目的:探讨铜绿假单胞菌分泌蛋白Pec1对小鼠肺泡巨噬细胞株MH-S吞噬功能的影响。方法:通过PCR扩增、质粒构建、原核表达及蛋白纯化等过程制备重组蛋白Pec1;CCK-8法检测Pec1蛋白对MH-S细胞增殖的影响;中性红染色检测MH-S细胞的吞噬功能;... 目的:探讨铜绿假单胞菌分泌蛋白Pec1对小鼠肺泡巨噬细胞株MH-S吞噬功能的影响。方法:通过PCR扩增、质粒构建、原核表达及蛋白纯化等过程制备重组蛋白Pec1;CCK-8法检测Pec1蛋白对MH-S细胞增殖的影响;中性红染色检测MH-S细胞的吞噬功能;荧光显微镜观察MH-S细胞对铜绿假单胞菌标准菌株PAO1灭活菌的吞噬能力。结果:成功构建重组质粒pET-30a-pec1,原核表达并纯化后得到重组蛋白Pec1,其分子量为30.5 kDa。Pec1对MH-S细胞的增殖有抑制作用,Pec1浓度越高,对细胞增殖的抑制作用越明显;Pec1能减少MH-S细胞对中性红的内吞,抑制MH-S细胞对铜绿假单胞菌灭活菌的吞噬作用。结论:铜绿假单胞菌分泌蛋白Pec1对MH-S细胞的吞噬功能有抑制作用。 展开更多
关键词 Pec1 铜绿假单 吞噬作用
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铜绿假单胞菌中黄曲霉毒素B_(1)降解酶的纯化及其降解产物解析 被引量:1
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作者 许艳华 董慧燕 +2 位作者 娄海伟 王香玉 赵仁勇 《中国粮油学报》 CSCD 北大核心 2023年第8期33-40,共8页
黄曲霉毒素B_(1)(Aflatoxin B_(1),AFB_(1))是二氢呋喃氧杂萘邻酮的衍生物,是目前已知最强的化学致癌物之一,对人类和动物健康造成严重威胁。研究以铜绿假单胞菌M4的发酵上清液为对象,利用超滤、凝胶过滤色谱和离子交换色谱对AFB_(1)降... 黄曲霉毒素B_(1)(Aflatoxin B_(1),AFB_(1))是二氢呋喃氧杂萘邻酮的衍生物,是目前已知最强的化学致癌物之一,对人类和动物健康造成严重威胁。研究以铜绿假单胞菌M4的发酵上清液为对象,利用超滤、凝胶过滤色谱和离子交换色谱对AFB_(1)降解酶进行分离纯化,通过超高效液相色谱-电喷雾-离子肼串联质谱仪对纯化的活性酶进行鉴定,得到比活性为2298.49 U/mg的小分子多肽。利用薄层色谱法和超高效液相色谱-飞行时间质谱仪对AFB_(1)降解产物进行解析,结果显示硅胶板上出现了不同于AFB_(1)的新荧光斑点,质谱检测到一个主要降解产物,利用Massynlynx V4.1软件推测降解产物的分子式为C 11 H 10 O 4,并对AFB_(1)降解产物的降解途径进行推导。研究纯化的耐高温小分子多肽可有效将降解AFB_(1),从降解破坏位点推测降解产物可能是低毒或无毒物质,这为进一步开发AFB_(1)脱毒剂提供参考。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素B_(1) 铜绿假单 小分子多肽 降解产物
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一例雏鸡铜绿假单胞菌的分离鉴定及其16SrRNA基因序列分析 被引量:3
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作者 卢受昇 孔令辰 +1 位作者 罗晶璐 孙彦伟 《广东畜牧兽医科技》 2011年第6期32-35,共4页
为对死亡雏鸡进行病因诊断,通过大体剖检、细菌分离、生化鉴定,证实为铜绿假单胞菌感染。测定了该分离株的16S rRNA基因序列,并与GenBank中收录的序列比较,结果发现所分离的铜绿假单胞菌及参考株的16S rDNA基因序列极其保守,相似性达99%... 为对死亡雏鸡进行病因诊断,通过大体剖检、细菌分离、生化鉴定,证实为铜绿假单胞菌感染。测定了该分离株的16S rRNA基因序列,并与GenBank中收录的序列比较,结果发现所分离的铜绿假单胞菌及参考株的16S rDNA基因序列极其保守,相似性达99%~100%;与大肠杆菌、沙门氏菌、巴氏杆菌的相似性差异约为9%;与鸭疫里默氏杆菌的相似性差异则更大,超过18%,提示16S rRNA序列测定可作为该菌鉴定的一种可靠方法。 展开更多
关键词 铜绿假单 分离鉴定 1 6S RRNA 序列分析
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