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铜绿假单胞菌噬菌体PaP3的溶原化条件及稳定性研究 被引量:2
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作者 王琳 饶贤才 +5 位作者 胡福泉 李明 朱军民 陈志瑾 但云婕 谭银玲 《医学研究生学报》 CAS 2009年第11期1131-1135,共5页
目的:溶原性噬菌体在宿主菌基因组中的整合和切割作用介导基因在宿主菌间的水平转移。文中研究铜绿假单胞菌噬菌体PaP3的溶原化机制及生物学特性,为阐明噬菌体介导的基因转移和由此而产生的生物多样性提供实验依据。方法:在不同的条件... 目的:溶原性噬菌体在宿主菌基因组中的整合和切割作用介导基因在宿主菌间的水平转移。文中研究铜绿假单胞菌噬菌体PaP3的溶原化机制及生物学特性,为阐明噬菌体介导的基因转移和由此而产生的生物多样性提供实验依据。方法:在不同的条件下利用该噬菌体感染其宿主菌-铜绿假单胞菌PA3,制备溶原菌基因组DNA,用在噬菌体基因组中没有酶切位点的PstⅠ进行酶切,通过脉冲场电泳图谱确定最佳的溶原化条件。并通过噬菌体效价测定噬菌体PaP3对温度、pH值、离子强度及柠檬酸钠浓度等理化因素的敏感性。结果:噬菌体PaP3的最佳溶原化培养条件为37℃,在NZYM培养基培养铜绿假单胞菌PA3 10 h后,以20∶1(宿主菌数目∶噬菌体数目)的比例加入噬菌体PaP3感染24 h。噬菌体PaP3对温度有一定的耐受性,对pH的适应范围较广,Ca2+与Mg2+可使PaP3的效价增加,而柠檬酸钠可抑制噬菌体生长。结论:通过溶原菌基因组DNA的酶切确定了噬菌体PaP3的最佳的溶原化条件,并在基因水平上证明PaP3为溶原性噬菌体,在不同的理化因素下具有不同的稳定性。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌噬菌体pap3 溶原化条件 噬菌体稳定性
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铜绿假单胞菌噬菌体PaP3基因组电转化宿主菌的条件初探 被引量:2
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作者 周莹冰 申晓冬 +4 位作者 丛延广 李明 黄建军 胡晓梅 胡福泉 《医学研究生学报》 CAS 2007年第11期1134-1138,共5页
目的:研究将铜绿假单胞菌噬菌体PaP3基因组DNA电转入其宿主菌并获得噬斑的基本条件。方法:以铜绿假单胞菌PA3作受体菌,将噬菌体PaP3基因组DNA通过电转化导入受体菌中,研究细胞生长状态、感受态细胞的制备方式、电场强度、DNA浓度和... 目的:研究将铜绿假单胞菌噬菌体PaP3基因组DNA电转入其宿主菌并获得噬斑的基本条件。方法:以铜绿假单胞菌PA3作受体菌,将噬菌体PaP3基因组DNA通过电转化导入受体菌中,研究细胞生长状态、感受态细胞的制备方式、电场强度、DNA浓度和细胞密度等条件对转化效率的影响。结果:在含50μg/ml红霉素的LB培养液中培养宿主菌14—16h,以100mmol/L蔗糖溶液为介质,在25℃条件下制备感受态并使其浓度达到10μ/ml,电转参数为12kV/cm,300Ω,25μF,在此组条件下能获得较高的转化效率,最高可达2.1×10^3pfu/μg的DNA。结论:确定了一组电转条件,成功地将铜绿假单胞菌噬菌体完整基因组导入PA3中,并形成噬斑,为铜绿假单胞菌噬菌体的深入研究奠定了基础。 展开更多
关键词 铜绿假单 噬菌体 基因组 电转化
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铜绿假单胞菌噬菌体PaP3整合位点的鉴定 被引量:1
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作者 王琳 饶贤才 +2 位作者 胡福泉 陈志瑾 谭银玲 《医学研究生学报》 CAS 2006年第5期394-398,共5页
目的:确定铜绿假单胞菌噬菌体PaP3在宿主菌基因组中的整合位点。方法:利用在噬菌体PaP3基因组中无酶切位点的Pst Ⅰ对溶原性细菌全基因组进行酶切,获得含有噬菌体PaP3全基因组及部分宿主菌DNA序列的大片段;然后进行第二次酶切,获得噬菌... 目的:确定铜绿假单胞菌噬菌体PaP3在宿主菌基因组中的整合位点。方法:利用在噬菌体PaP3基因组中无酶切位点的Pst Ⅰ对溶原性细菌全基因组进行酶切,获得含有噬菌体PaP3全基因组及部分宿主菌DNA序列的大片段;然后进行第二次酶切,获得噬菌体基因组与宿主菌基因组的交界点序列,并进行克隆、测序,鉴定出杂合位点attR。根据λ噬菌体的整合机制,利用PCR反应扩增出另一杂合位点attL,根据测序结果及Blast检索确定attP 与attB的位置和DNA序列。结果:经序列比对发现,attP及attB的核心位点分别位于噬菌体PaP3基因组中的 t-RNAPro基因及铜绿假单胞菌PA3基因组中的t-RNALys基因中,其核心位点的DNA序列为21 bp(5'-GGTCGTAGGT- TCGAATCCTAC-3')。在核心位点的两侧存在正向重复序列及反向重复序列。结论:该研究为铜绿假单胞菌噬菌体的整合酶及整合机制的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 整合位点 整合作用 铜绿假单噬菌体
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基于TGF-β/RORγt/FoxP3通路探讨扶正透邪方对铜绿假单胞菌肺炎大鼠肺损伤的影响
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作者 李奕璇 刘清泉 +2 位作者 孔令博 张迪 晏军 《中国中医药信息杂志》 2025年第3期98-104,共7页
目的观察扶正透邪方对铜绿假单胞菌肺炎(PAP)大鼠肺损伤的影响并探讨其可能的作用机制。方法将36只SD大鼠按随机数字表法分为空白组、模型组、哌拉西林组和扶正透邪方低、中、高剂量组,每组6只,除空白组外,各组气管滴注3×10~9 CFU... 目的观察扶正透邪方对铜绿假单胞菌肺炎(PAP)大鼠肺损伤的影响并探讨其可能的作用机制。方法将36只SD大鼠按随机数字表法分为空白组、模型组、哌拉西林组和扶正透邪方低、中、高剂量组,每组6只,除空白组外,各组气管滴注3×10~9 CFU/mL铜绿假单胞菌悬液0.1 mL,空白组滴注等量无菌生理盐水。造模后24 h,扶正透邪方低、中、高剂量组分别予0.43、0.86、1.73 g/mL扶正透邪方药液1.6 mL灌胃,空白组、模型组予等体积蒸馏水灌胃,哌拉西林组予0.11 g/mL哌拉西林钠他唑巴坦钠溶液0.53 mL腹腔注射,均每日1次,连续3 d。HE染色观察肺组织形态,进行肺损伤评分并测量支气管壁厚度,流式细胞术检测外周血Th17/Treg比例,ELISA检测血清维甲酸相关核孤儿受体γt(RORγt)、叉头框蛋白P3(FoxP3)、转化生长因子-β(TGF-β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-10含量,RT-qPCR检测肺组织RORγt、FoxP3及炎症因子mRNA表达,Western blot检测肺组织RORγt、FoxP3及炎症因子蛋白表达。结果与空白组比较,模型组大鼠肺组织可见大量炎性细胞浸润,伴支气管管壁增生肥厚、肺泡扩张、肺间质水肿,肺损伤评分和支气管壁厚度明显增加(P<0.01),外周血Th17比例升高(P<0.01),Treg比例降低(P<0.01),Th17/Treg比值升高(P<0.05),血清RORγt、TNF-α、TGF-β、IL-6含量显著升高(P<0.01),FoxP3、IL-10含量显著下降(P<0.01),肺组织RORγt、TNF-α、TGF-β、IL-6 mRNA和蛋白表达显著升高(P<0.01),FoxP3、IL-10 mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.01);与模型组比较,各给药组大鼠肺泡相对完整、结构较清晰,炎性细胞浸润、肺间质水肿充血减轻,肺损伤评分和支气管壁厚度减少(P<0.05,P<0.01),扶正透邪方高剂量组和哌拉西林组外周血Th17比例降低(P<0.05),Treg细胞比例升高(P<0.05),Th17/Treg比值降低(P<0.05),扶正透邪方中、高剂量组和哌拉西林组大鼠血清RORγt、TNF-α、TGF-β、IL-6含量显著降低(P<0.05,P<0.01),FoxP3、IL-10含量显著升高(P<0.05,P<0.01),肺组织RORγt、TNF-α、TGF-β、IL-6mRNA和蛋白表达显著下降(P<0.05,P<0.01),FoxP3、IL-10基因和蛋白表达显著升高(P<0.05,P<0.01)。结论扶正透邪方可减轻PAP大鼠肺部炎症,降低促炎因子水平、升高抑炎因子水平,其机制可能是通过TGF-β/RORγt/FoxP3通路调节免疫平衡。 展开更多
关键词 扶正透邪方 铜绿假单肺炎 TGF-β/RORγt/FoxP3 大鼠
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一株铜绿假单胞菌噬菌体全基因组分析及与抗生素体外联合应用效果
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作者 王晋宇 张凯川 +3 位作者 王芮杰 高铎 蒋祺丰 贾坤 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期727-738,共12页
旨在为解决耐药铜绿假单胞菌感染提供不同方法。以鸡源铜绿假单胞菌为宿主菌,从医院污水中分离纯化出铜绿假单胞菌噬菌体,并进行生物学特性研究与基因组学分析,同时采用棋盘法与三种抗生素联合应用测试其效果。结果显示:从医院污水中分... 旨在为解决耐药铜绿假单胞菌感染提供不同方法。以鸡源铜绿假单胞菌为宿主菌,从医院污水中分离纯化出铜绿假单胞菌噬菌体,并进行生物学特性研究与基因组学分析,同时采用棋盘法与三种抗生素联合应用测试其效果。结果显示:从医院污水中分离到一株铜绿假单胞菌噬菌体PaVOB,TEM显示病毒颗粒具有一个平均直径为73.02 nm的二十面体头部和一个平均长度为155.57 nm的长尾部,属于有尾噬菌体目,长尾噬菌体科,具有双链DNA基因组,宿主谱较窄,耐低温(-20℃)并且在37℃达到最适温度,有良好的酸碱耐受性,在pH为3~12时保持活性,最佳MOI为0.001,一步生长曲线显示潜伏期为10 min,爆发量为50 PFU·cell^(-1),吸附性试验表明PaVOB在10 min的吸附率为99.1%。PaVOB基因组全长为72179 bp,(G+C)%含量为54.81%,与VB PaeP FBPa1亲缘关系小于0.1,ORF预测显示,PaVOB包括74个ORF,软件预测均未发现毒力基因、耐药基因和tRNA存在。此外,抗生素联合应用结果显示,PaVOB与头孢曲松联合应用有协同作用,在效价为107 PFU·mL^(-1)时与恩诺沙星产生协同作用,与庆大霉素产生无关作用。铜绿假单胞菌噬菌体PaVOB对环境适应能力强,且基因组信息清晰,能够选择性地与不同抗生素联合应用发挥协同作用,具有治疗临床耐药铜绿假单胞菌感染的可能性。 展开更多
关键词 铜绿假单 噬菌体 生物学特性 基因组学 抗生素联合应用
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铜绿假单胞菌噬菌体PaP2的结构蛋白及其编码基因的研究 被引量:2
6
作者 黄建军 胡晓梅 +4 位作者 朱军民 申晓冬 李明 饶贤才 胡福泉 《医学研究生学报》 CAS 2004年第4期292-295,共4页
目的 :确定铜绿假单胞菌噬菌体PaP2结构蛋白的构成及其编码基因。 方法 :CsCl梯度离心纯化噬菌体PaP2颗粒 ,SDS PAGE电泳 ,确定结构蛋白条带及其相对分子质量 ;然后电转印于PVDF膜上 ,用Edman降解法进行N端测序。根据所测的N端氨基酸... 目的 :确定铜绿假单胞菌噬菌体PaP2结构蛋白的构成及其编码基因。 方法 :CsCl梯度离心纯化噬菌体PaP2颗粒 ,SDS PAGE电泳 ,确定结构蛋白条带及其相对分子质量 ;然后电转印于PVDF膜上 ,用Edman降解法进行N端测序。根据所测的N端氨基酸残基序列在PaP2预测基因编码的蛋白质中检索 ,从而逆推其编码基因。 结果 :SDS PAGE显示PaP2含有 10条带 ,其中 1、3、4、5、8、9等 6条带的含量足以回收进行N端测序 ,测得N端氨基酸残基分别依次为 :Met Ile Glu Leu Gly、Ala Ile Ser Pro、Ala Arg Phe Ile Asp、Ser Val Tyr Ala Gly、Ala Ile Ser Arg Asn 和Ser Phe Ser Leu Gly。据此推论出它们的编码基因分别是ORF18340 2 3889、ORF4 4 19 6 4 19、ORF16 5 89 1832 2、ORF82 74 95 30、OrF15 70 8 16 6 2 5、ORF75 6 3 830 9。 结论 :噬菌体PaP2含有 10个结构蛋白 ,其中 6个主要结构蛋白的编码基因分别是orf 2 4、orf 8、orf 2 3、orf 12、orf 2 2、orf 11。 展开更多
关键词 铜绿假单 噬菌体 蛋白质N端测序 编码基因
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铜绿假单胞菌噬菌体PaP1主要结构蛋白编码基因的确定
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作者 李明 黄建军 +3 位作者 申晓冬 胡晓梅 饶贤才 胡福泉 《医学研究生学报》 CAS 2006年第5期387-390,共4页
目的:确定铜绿假单胞菌噬菌体PaP1主要结构蛋白的编码基因。方法:CsCl梯度离心纯化噬菌体PaP1 颗粒,通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离该噬菌体的结构蛋白,转印PVDF膜后,对主要结构蛋白进行N-端测序,根据测序结果和... 目的:确定铜绿假单胞菌噬菌体PaP1主要结构蛋白的编码基因。方法:CsCl梯度离心纯化噬菌体PaP1 颗粒,通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离该噬菌体的结构蛋白,转印PVDF膜后,对主要结构蛋白进行N-端测序,根据测序结果和实测分子量,在PaP1基因组序列中检索推定基因表达产物分子量相近、 N-端氨基酸残基序列相同的蛋白质所对应的编码基因。结果:SDS-PAGE显示PaP1至少含有7种结构蛋白,其中相对分子质量为38400的蛋白是主要的结构蛋白,其N-端5个氨基酸残基顺序为:Ala-Asn-Thr-Arg-Ser。结论:噬菌体PaP1至少含有7个结构蛋白,其中相对分子质量为38 400的蛋白系主要结构蛋白,其编码基因为 ORF6841-7875。 展开更多
关键词 铜绿假单 噬菌体 结构蛋白 编码基因
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铜绿假单胞菌耐药机制及治疗技术研究新进展 被引量:2
8
作者 张昊亭 高福泉 张斌 《中国医药科学》 2024年第8期53-57,共5页
铜绿假单胞菌(PA)是最常见的条件致病菌之一,严重危害人类的健康。随着广谱抗生素的大量应用,导致多重耐药菌株的出现,从而使治疗更加棘手。研究发现,免疫力低下的人群容易诱发PA的感染,随着临床耐药PA检出率的增加及抗生素的治疗效果减... 铜绿假单胞菌(PA)是最常见的条件致病菌之一,严重危害人类的健康。随着广谱抗生素的大量应用,导致多重耐药菌株的出现,从而使治疗更加棘手。研究发现,免疫力低下的人群容易诱发PA的感染,随着临床耐药PA检出率的增加及抗生素的治疗效果减弱,部分患者的生活质量及预后受到很大影响。PA的感染难以控制的原因是复杂的耐药机制,其中包括生物膜的形成、孔蛋白的介导作用、外排泵以及抗菌灭活酶的产生等。由于抗生素的应用不能有效控制PA的感染,所以针对耐药机制在药物治疗方面进行研究,其中包括外排泵抑制剂、抗生素佐剂、相关灭活酶抑制剂、外膜透化剂。此外,噬菌体疗法、中药疗法、一氧化氮疗法及纳米技术等特殊治疗也展现出良好的治疗效果,疫苗领域及增强自身免疫力也是未来预防PA感染的重要研究方向。因此,研究PA的耐药机制及治疗技术对PA感染的预防和治疗具有深远的意义。 展开更多
关键词 铜绿假单 耐药机制 治疗技术 噬菌体疗法 中药疗法 纳米技术
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S.Ⅲ arizonae 3b型和铜绿假单胞菌4型同时致下呼吸道感染1例
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作者 李平 张健 张淼 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期240-240,共1页
关键词 亚利桑那沙门 铜绿假单4型 下呼吸道感染 S.Ⅲ arizonae 3b型 感染
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铜绿假单胞菌中T3SS毒力基因分布、表达及与抗菌药物耐药相关性研究 被引量:11
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作者 张秀彩 张肖肖 +3 位作者 王忠永 陈栎江 董郭枫 周铁丽 《临床检验杂志》 CAS 2019年第1期14-18,共5页
目的探究临床分离铜绿假单胞菌中T3SS毒力基因分布、表达及与耐药的相关性。方法收集2015年温州医科大学附属第一医院分离的铜绿假单胞菌共68株。琼脂稀释法检测抗菌药物的敏感性; PCR法检测不同来源菌株exo U、exo S、exo T、exo Y 4... 目的探究临床分离铜绿假单胞菌中T3SS毒力基因分布、表达及与耐药的相关性。方法收集2015年温州医科大学附属第一医院分离的铜绿假单胞菌共68株。琼脂稀释法检测抗菌药物的敏感性; PCR法检测不同来源菌株exo U、exo S、exo T、exo Y 4种毒力基因的分布,并对结果进行统计学分析;实时荧光定量PCR检测部分菌株中转录调控相关基因ptrA、exs A以及效应蛋白基因exo T、exo S的表达情况,并对4种基因的相对表达量进行Pearson相关性分析。结果 68株铜绿假单胞菌中,exo T和exo Y检出率较高,分别为79.4%和75.0%,其中exo T在创面来源菌株中的检出率高于痰液(97.0%vs 61.8%,P<0.01),且以exo U-/exo S+基因型最常见,占51.5%(35/68)。痰液来源的菌株对亚胺培南、美罗培南的耐药率显著高于创面来源菌株(47.1%vs 8.8%,47.1%vs 14.7%,P<0.01);携带exo U基因的菌株对碳青霉烯类、氨基糖苷类和氟喹诺酮类药物耐药率均高于其他3种基因型菌株。Pearson相关性分析显示ptrA基因表达量与exo T、exo S、exs A基因表达水平均呈负相关(P<0.05)。结论本院临床分离的铜绿假单胞菌T3SS毒力基因exo T和exo Y的携带率较高,毒力基因与铜绿假单胞菌耐药性相关,ptrA可能是T3SS毒力基因表达的潜在负调控基因。 展开更多
关键词 铜绿假单 T3SS 耐药 PTRA
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马鞍山市铜绿假单胞菌血清学和噬菌体分型比较
11
作者 张向民 黄青青 《淮海医药》 2004年第1期43-44,共2页
目的 了解马鞍山市铜绿假单胞菌流行状况。方法 采集腹泻患者与健康人群粪便、外环境地面水、医院科室环境与住院人标本增菌后用十六烷基三甲溴化铵营养琼脂培养按常规方法分离鉴定 ,并将分离出的 36 0株铜绿假单胞菌进行血清学和噬... 目的 了解马鞍山市铜绿假单胞菌流行状况。方法 采集腹泻患者与健康人群粪便、外环境地面水、医院科室环境与住院人标本增菌后用十六烷基三甲溴化铵营养琼脂培养按常规方法分离鉴定 ,并将分离出的 36 0株铜绿假单胞菌进行血清学和噬菌体分型。结果 血清学分型率 98.33% (35 1 / 36 0 ) ,噬菌体分型率 96 .1 9% (346 / 36 0 ) ,且主要血清型的噬菌体裂解符合率均在 82 %以上。结论 外环境地面水。 展开更多
关键词 马鞍山市 铜绿假单 血清学 噬菌体 PA 卫生防疫
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噬菌体降低铜绿假单胞菌所致腐蛋的效果 被引量:2
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作者 刘晓文 张庆 +7 位作者 宋新慧 骆延波 胡明 李璐璐 齐静 张印 赵效南 刘玉庆 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期1756-1763,共8页
铜绿假单胞菌是孵化过程中造成腐蛋的主要病原菌,拟尝试用裂解性噬菌体防治。选用腐蛋中筛选的铜绿假单胞菌PA-MH12,以此为宿主从河水中筛选到1株裂解性噬菌体MH12-Q,对其进行了生物学特性研究,体外进行了对铜绿假单胞菌所致腐蛋的防控... 铜绿假单胞菌是孵化过程中造成腐蛋的主要病原菌,拟尝试用裂解性噬菌体防治。选用腐蛋中筛选的铜绿假单胞菌PA-MH12,以此为宿主从河水中筛选到1株裂解性噬菌体MH12-Q,对其进行了生物学特性研究,体外进行了对铜绿假单胞菌所致腐蛋的防控效果试验。结果显示:噬菌体MH12-Q属于肌尾噬菌体科(Myoviridae),效价可达到1013pfu·mL-1,完全裂解效价(CLC)为1010pfu·mL-1,最适生长温度为37℃,pH稳定性好,最适pH为6~8,且其在pH4~10的效价都能维持在较高的水平。最佳感染复数(OMOI)为0.001,感染宿主的潜伏期为30 min,爆发期为70 min。噬菌体MH12-Q可使高浓度铜绿假单胞菌的感染率从70%降低到40%。铜绿假单胞菌噬菌体MH12-Q的生物学性质适合生产应用,对孵化场腐蛋具有较好的防控作用,能够提高感染铜绿假单胞菌的鸡胚成活率。 展开更多
关键词 铜绿假单 腐蛋 裂解性噬菌体 生物学性质 防治
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铜绿假单胞菌噬菌体K4的性质及其在食品防腐方面的应用 被引量:3
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作者 庞文静 韩庆竹 +4 位作者 尤甲甲 李东航 李佩泽 李玥莹 杨洪江 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2022年第16期130-139,共10页
目的:为研究噬菌体在控制细菌污染方面的应用,本文对铜绿假单胞菌噬菌体K4的生物学性质及抑菌活性进行了探究。方法:包括一步生长曲线、稳定性研究、基因组测序、比较基因组学分析以及抑菌曲线等方法。结果:K4潜伏期约为15 min,释放量约... 目的:为研究噬菌体在控制细菌污染方面的应用,本文对铜绿假单胞菌噬菌体K4的生物学性质及抑菌活性进行了探究。方法:包括一步生长曲线、稳定性研究、基因组测序、比较基因组学分析以及抑菌曲线等方法。结果:K4潜伏期约为15 min,释放量约为85 PFU/infection center,具有较强的感染性;在不同感染复数(MOI)下,噬菌体K4对宿主菌均有明显的抑制效果;基因组分析显示,K4基因组长度为50358 bp,编码77个蛋白和1个tRNA-Arg;比较基因组学分析发现,噬菌体K4与Paundecimvirus属的Pseudomonas virus PA11基因组序列的一致性达95.08%,证实噬菌体K4是该属的新成员。在应用实验中,噬菌体K4能够显著抑制牛奶和午餐肉等样品中宿主菌的生长,同时噬菌体的数量也有显著增加。本研究结果显示,噬菌体K4生长速度快,具有较强的杀菌活性,基因组不携带整合酶、抗性以及毒力因子等编码基因。结论:噬菌体K4可以用于控制食品中铜绿假单胞菌的污染。 展开更多
关键词 铜绿假单 噬菌体 活性 基因组注释 应用
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微观水分和养分条件对铜绿假单胞菌噬菌体裂解宿主过程的影响 被引量:2
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作者 王燕 阮楚晋 +4 位作者 谢文琳 朱堃 陈国炜 刘莹 王钢 《土壤学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期835-845,共11页
为研究不同水分和养分条件下细菌和噬菌体的生长和运移规律、细菌和噬菌体种群互作过程以及其对群落结构的影响和调控机制,通过控制微生物运动平板表面相对水膜厚度研究铜绿假单胞菌PAO1(Pseudomonas aeruginosa PAO1)和铜绿假单胞菌噬... 为研究不同水分和养分条件下细菌和噬菌体的生长和运移规律、细菌和噬菌体种群互作过程以及其对群落结构的影响和调控机制,通过控制微生物运动平板表面相对水膜厚度研究铜绿假单胞菌PAO1(Pseudomonas aeruginosa PAO1)和铜绿假单胞菌噬菌体PA-27-1(Pseudomonas aeruginosa phage PA-27-1)的互作过程。结果表明,细菌和噬菌体的互作主要受噬菌体裂解细菌、细菌的运动和噬菌体扩散三个因素控制。水分通过调控多孔表面水膜的厚度和连通性来改变细菌在微孔尺度的运动,进而影响微生物在粗糙界面的增殖和生物膜的形成过程以及菌落的形态特征,同时通过影响噬菌体的扩散传播来调节细菌和噬菌体之间的互作机制。细菌与噬菌体自身运动性及个体大小上的不同也导致二者在微观孔隙中增殖(扩散)特征的差异。相对低水膜网络促进了细菌和噬菌体之间的空间隔离,降低了噬菌体有效侵染细菌的概率,从而有利于细菌的增殖。丰富的养分条件有利于细菌生物量的快速繁殖,进而促进噬菌体的增殖。本研究揭示了环境生物膜等微生境中噬菌体和宿主细菌的生长和运移规律,有助于为深入理解土壤噬菌体的时空分布特征与演变规律以及其与土壤细菌之间的互作模式提供理论基础和数据支撑。 展开更多
关键词 相对水膜厚度 铜绿假单 噬菌体 空间自组织
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泛耐药铜绿假单胞菌菌株广谱噬菌体裂解酶的获取及抗菌活性观察 被引量:1
15
作者 王猛 蔡大敏 +3 位作者 王景雨 王策 邵煜涵 穆红 《山东医药》 CAS 2023年第6期33-37,共5页
目的获取泛耐药铜绿假单胞菌(PA)广谱噬菌体裂解酶,并观察其抗菌活性。方法(1)取237株PA菌株,采用药敏实验筛选得到84株泛耐药PA菌株。采用噬菌斑测定法,将污水与10株泛耐药PA菌株混合培养,筛选得到9株泛耐药PA菌株噬菌体,并用84株泛耐... 目的获取泛耐药铜绿假单胞菌(PA)广谱噬菌体裂解酶,并观察其抗菌活性。方法(1)取237株PA菌株,采用药敏实验筛选得到84株泛耐药PA菌株。采用噬菌斑测定法,将污水与10株泛耐药PA菌株混合培养,筛选得到9株泛耐药PA菌株噬菌体,并用84株泛耐药PA菌株,筛选出90%以上泛耐药PA菌株的广谱噬菌体。(2)采用Proteinase K裂解法及测序获取泛耐药PA菌株广谱噬菌体裂解酶基因、运用生物信息学工具(ORF finder和BLAST)进行序列确认,获得泛耐药PA菌株广谱噬菌体裂解酶的基因序列(目标序列),将目标序列克隆、转化、诱导纯化后得到泛耐药PA广谱噬菌体裂解酶。取泛耐药PA菌株,将其均匀涂抹至2个培养基,分别滴加5、10μL泛耐药PA菌株广谱噬菌体裂解酶,培养24 h时观察培养基噬菌斑生长情况。结果得到泛耐药PA菌株广谱噬菌体EPA19及EPA19裂解酶lysEPA19。5、10μL的lysEPA19与泛耐药PA菌株混合培养后,培养基上均可见噬菌斑(5μL LysEPA19噬菌斑为11~13mm,10μL LysEPA19噬菌斑为23~27 mm)。结论成功筛选得到泛耐药PA广谱噬菌体裂解酶lysEPA19,可有效抑制泛耐药PA菌株生长。 展开更多
关键词 噬菌体裂解酶 噬菌体 铜绿假单 泛耐药铜绿假单
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细菌性尿路感染213株细菌分析及其药物敏感趋势监测 被引量:7
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作者 陶庆春 陈颖 +2 位作者 马子坤 李文静 陈晓丹 《抗感染药学》 2005年第1期12-14,共3页
目的:了解临床细菌性尿道感染患者细菌感染的流行趋势和对其药物敏感趋势进行监测,为临床合理用药提供依据。方法通过对东方医院2002年3月至2003年3月临床细菌性尿道感染患者的标本中分离出213株病原菌,进行调查分析和对其药物敏感趋势... 目的:了解临床细菌性尿道感染患者细菌感染的流行趋势和对其药物敏感趋势进行监测,为临床合理用药提供依据。方法通过对东方医院2002年3月至2003年3月临床细菌性尿道感染患者的标本中分离出213株病原菌,进行调查分析和对其药物敏感趋势进行临测。结果:临床患者的标本中共分离出213株细菌。主要致病菌依次为大肠埃希菌104株(48.83%)、屎肠球菌20株(9.39%)、粪肠球菌17株(7.98%)、肺炎克雷伯氏菌12株(5.63%),表皮葡萄球菌11株(5.16%)。其他分离较少的细菌有铜绿假单胞菌9株、金黄色葡萄球菌5株、产酸克雷伯氏菌5株。ESBL确证试验结果:2001年3月至2002年3月共对81株大肠埃希菌22株,产酶率27%;10株肺炎克雷伯菌5株,产酶率50%。结论:临床细菌耐药严重,应根据细菌检验结果合理用药。 展开更多
关键词 药物敏感 性尿路感染 监测 分析及 20033 肺炎克雷伯氏 金黄色葡萄球 2002年 大肠埃希 临床合理用药 表皮葡萄球 铜绿假单 肺炎克雷伯 感染患者 2001年 流行趋势 感染 东方医院 屎肠球 粪肠球
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NY3菌固定化及生物膜处理含油废水的研究
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作者 聂麦茜 贺美丽 +4 位作者 张森爰 王琰 聂红云 田晓婷 符海林 《西安建筑科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2014年第4期572-577,共6页
利用嗜油菌NY3菌的固定化生物膜处理含油废水.用静态曝气法确定固定化时间、载体量、固定化液初始pH值.确定生物膜处理运行的HRT,并评估生物膜循环使用的可能性.结果表明,载体10 g/L,pH7.5~9.0,固定51 h,膜生物量达488.32 mg/g.其处理... 利用嗜油菌NY3菌的固定化生物膜处理含油废水.用静态曝气法确定固定化时间、载体量、固定化液初始pH值.确定生物膜处理运行的HRT,并评估生物膜循环使用的可能性.结果表明,载体10 g/L,pH7.5~9.0,固定51 h,膜生物量达488.32 mg/g.其处理含油废水最佳HRT为6 h,出水油量在1.38~3.2 mg/L.废水处理后,将载体置于营养液中培养15 d,膜上NY3菌能将所吸附的油降解,使其恢复活性,并可循环利用. 展开更多
关键词 铜绿假单NY3 固定化生物膜 含油废水 膜活性
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植物乳杆菌DL3对草鱼片中腐败菌的抑制 被引量:3
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作者 崔天琦 吕欣然 +4 位作者 杜宏 王君勇 白凤翎 仪淑敏 励建荣 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2019年第19期117-121,128,共6页
应用植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)DL3对草鱼片中铜绿假单胞菌和腐败希瓦氏菌进行抑制作用研究,从感官评价、微生物指标和理化指标验证其抑菌保鲜效果。结果表明:4℃冷藏条件下,菌株DL3处理组能有效维持草鱼片的感官品质。与对... 应用植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)DL3对草鱼片中铜绿假单胞菌和腐败希瓦氏菌进行抑制作用研究,从感官评价、微生物指标和理化指标验证其抑菌保鲜效果。结果表明:4℃冷藏条件下,菌株DL3处理组能有效维持草鱼片的感官品质。与对照组相比,菌株DL3可使草鱼片中铜绿假单胞菌和腐败希瓦氏菌的细菌数量分别降低2.06和0.97 lg CFU/g,能有效抑制草鱼片中腐败菌的生长繁殖。鱼片中pH呈现先降低后逐渐增加的"V"型变化趋势,表明添加菌株DL3对pH上升具有延缓作用。菌株DL3单独处理组的TVB-N值为18 mg/100 g,能够有效控制蛋白质的降解。研究表明菌株DL3可作为淡水鱼及其制品的生物保鲜剂,对控制水产品腐败具有一定的应用价值。 展开更多
关键词 植物乳杆DL3 腐败控制 铜绿假单 腐败希瓦氏 草鱼保鲜
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细菌生长过程中的病毒消失行为研究 被引量:2
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作者 蒋艳 赵炳梓 《土壤》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期522-528,共7页
环境中土著微生物存在及微生物的不同生长阶段可能影响病毒去向。本研究选择自然界广泛存在的3株细菌:恶臭假单胞菌(PP)、铜绿假单胞菌(PA)、枯草芽孢杆菌(BS)为微生物代表,以噬菌体X174为指示病毒,通过30℃(PP)和35℃(PA和BS)条件下病... 环境中土著微生物存在及微生物的不同生长阶段可能影响病毒去向。本研究选择自然界广泛存在的3株细菌:恶臭假单胞菌(PP)、铜绿假单胞菌(PA)、枯草芽孢杆菌(BS)为微生物代表,以噬菌体X174为指示病毒,通过30℃(PP)和35℃(PA和BS)条件下病毒与细菌同步生长的培养实验和4℃条件下病毒与不同生长时段的菌株培养物的静态吸附实验,比较分析了细菌生长发育阶段对病毒消失(包括可逆/不可逆吸附和消亡)的影响。培育实验结果表明,病毒在30℃和35℃培养基中的浓度随着培育时间持续降低;但当培养基中接菌时,病毒浓度从接种至对数期6 h间急剧降低,降低幅度超过对照处理,其中在BS处理中降幅最大,其次为PA和PP处理;随着细菌由对数期进入稳定期和衰亡期,病毒浓度先反弹升高,然后后持续降低,反弹最高点病毒浓度在3株菌处理中均高于各自对照处理,反弹持续时间和病毒浓度的反弹提升程度依不同菌株而异。静态实验结果表明,菌株培养物的培育时间从6 h延长至18 h时,病毒的消失比例逐渐降低,继续延长至24 h时又迅速升高,然后随着培育时间的进一步延长而持续降低。以上结果表明细菌对病毒消失的影响随细菌生长发育阶段和菌种而异,暗示在研究病毒在环境中去向时,必须考虑环境中本土微生物的存在及其组成。 展开更多
关键词 恶臭假单 铜绿假单 枯草芽孢杆 噬菌体X174 消失
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