铜绿假单胞菌主动外排系统研究进展 被引量：6

1

作者 魏光 叶英 沈继录 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期886-892,共7页

主动外排系统在铜绿假单胞菌耐药形成过程中起到重要作用,近年来对其的研究也愈来愈多。截止到目前为止,在铜绿假单胞菌中总共发现了13种外排泵,其中12种属于耐药节结细胞分化(resistance nodulation cell division,RND)家族的外排泵,另... 主动外排系统在铜绿假单胞菌耐药形成过程中起到重要作用,近年来对其的研究也愈来愈多。截止到目前为止,在铜绿假单胞菌中总共发现了13种外排泵,其中12种属于耐药节结细胞分化(resistance nodulation cell division,RND)家族的外排泵,另外1种属于多药和毒物化合物外排家族(multidrug and toxic compound extrusion family,MATE)。本文就铜绿假单胞菌13种外排泵的底物谱、调控机制以及相关的基础研究进展进行综述。 展开更多

关键词 铜绿假单胞菌 主动外排系统 耐药机制

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铜绿假单胞菌多药主动外排系统研究进展 被引量：20

2

作者 曹敬荣 沈定霞 《中国感染与化疗杂志》 CAS 2006年第2期135-139,共5页

关键词 铜绿假单胞菌 多重耐药 主动外排

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主动外排系统MexAB-OprM分离铜绿假单胞菌的分布和表达 被引量：1

3

作者 彭少华 金正江 +2 位作者 李从荣 顾剑 詹燏 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2004年第10期917-919,共3页

关键词 主动外排系统 MEXAB-OPRM 分离 铜绿假单胞菌 分布 表达

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铜绿假单胞菌MexAB-OprM、MexXY-OprM主动外排系统的耐药作用 被引量：6

4

作者 姚慧琳 《中国感染与化疗杂志》 CAS 北大核心 2012年第1期32-35,共4页

目的探讨MexAB-OprM、MexXY-OprM主动外排系统(外排泵)在多重耐药铜绿假单胞菌耐药机制中的作用。方法选取36株临床分离的多重耐药铜绿假单胞菌,采用琼脂二倍稀释法,测定环丙沙星对铜绿假单胞菌的MIC及进行泵抑制剂碳酰氰基-对-氯苯腙(C... 目的探讨MexAB-OprM、MexXY-OprM主动外排系统(外排泵)在多重耐药铜绿假单胞菌耐药机制中的作用。方法选取36株临床分离的多重耐药铜绿假单胞菌,采用琼脂二倍稀释法,测定环丙沙星对铜绿假单胞菌的MIC及进行泵抑制剂碳酰氰基-对-氯苯腙(CCCP)存在情况下的干预试验;用实时定量RT-PCR测定结构基因mexA、mexX的mRNA表达水平来判断MexAB-OprM、MexXY-OprM外排泵表达情况;用PCR法分别扩增其调控基因mexR、mexZ,并对其产物测序,用Blast软件在GenBank与已知序列比较,研究其过度表达的机制。结果在CCCP作用下,36株铜绿假单胞菌中24株菌对环丙沙星的敏感性(MIC)由20～320 mg/L提高到2.5～40 mg/L,主动外排表型阳性率为66.7%(24/36),15株菌高表达Mex-AB-OprM外排系统(41.7%),21株高表达MexXY-OprM外排系统(58.3%)。15株高表达MexAB-OprM外排系统铜绿假单胞菌同时表达MexXY-OprM外排系统;12株干预试验阴性的铜绿假单胞菌均无mexA、mexX高表达;随机选择mexA、mexX高表达的4株细菌均发生mexR、mexZ基因突变,出现氨基酸替代。结论主动外排系统MexAB-OprM、MexXY-OprM在多重耐药铜绿假单胞菌中过度表达是铜绿假单胞菌多重耐药的机制之一;外排泵MexAB-OprM、MexXY-OprM高表达分别与调控基因mexR、mexZ发生变异有关。 展开更多

关键词 外排泵 铜绿假单胞菌 多重耐药

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铜绿假单胞菌MexAB-OprM主动外排表型筛选和外排基因检测 被引量：9

5

作者 曹敬荣 沈定霞 +3 位作者 钱妙玲 罗燕萍 徐雅萍 田芳 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期371-376,共6页

目的研究解放军总医院临床分离的多重耐药铜绿假单胞菌的主动外排系统,为指导临床合理选择抗生素提供依据。方法采用外排泵抑制剂(苯丙氨酸-精氨酸-β萘酰胺)与喹诺酮类抗生素,以微量肉汤稀释法测定加与不加外排泵抑制剂时环丙沙星与左... 目的研究解放军总医院临床分离的多重耐药铜绿假单胞菌的主动外排系统,为指导临床合理选择抗生素提供依据。方法采用外排泵抑制剂(苯丙氨酸-精氨酸-β萘酰胺)与喹诺酮类抗生素,以微量肉汤稀释法测定加与不加外排泵抑制剂时环丙沙星与左氧氟沙星的最低抑菌浓度(MIC)值,并计算MIC值的变化,根据加与不加外排泵抑制剂MIC值降低3个稀释度及以上筛选主动外排表型阳性菌株;PCR扩增外排表型阳性菌的耐药基因oprM、mexB和mexR,并对3株菌进行mexR基因测序分析;RT-PCR检测oprM基因的mRNA水平,分析耐药基因的表达情况。结果苯丙氨酸-精氨酸-β萘酰胺能极大的降低左氧氟沙星和环丙沙星的MIC值,70株多重耐药铜绿假单胞菌中46株表型阳性(65.7%),其中PCR检测oprM、mexB和mexR基因同时阳性菌株42株(91.3%),仅oprM基因阳性2株(4.3%),oprM、mexB和mexR基因均阴性2株(4.3%)。RT-PCR产物测定A值(A260/A280)与PAO1对照阳性菌株13株,以PAO1的oprM/rpoD的A值为对照阳性菌株4株,同时满足A值(A260/A280)和oprM/rpoD比值均高于PAO1的菌株3株。测序结果与GenBank中已知的mexR基因比对,其中2株同源性为100%,1株第434位核苷酸插入2bp(AT)。结论中国人民解放军总医院多重耐药铜绿假单胞菌大多存在主动外排的耐药机制,其耐药与外排泵过度表达相关。 展开更多

关键词 铜绿假单胞菌 主动外排 外排泵抑制剂 苯丙氨酸-精氨酸-β萘酰胺 MEXAB-OPRM RT-PCR

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主动外排泵对铜绿假单胞菌摄入硅纳米颗粒的影响研究

6

作者 敖翔 唐爱国 +2 位作者 罗昔波 皮兰敢 章清 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第27期3261-3263,共3页

目的探讨主动外排泵对铜绿假单胞菌(PA)摄入硅纳米颗粒的影响,为将其作为药物载体提供实验依据。方法收集中南大学湘雅二医院2007年1—6月检测的PA临床菌株24株,分别编号为S1～S24;以PA的野生菌株PA01作为MexA基因的阳性对照。将筛选出... 目的探讨主动外排泵对铜绿假单胞菌(PA)摄入硅纳米颗粒的影响,为将其作为药物载体提供实验依据。方法收集中南大学湘雅二医院2007年1—6月检测的PA临床菌株24株,分别编号为S1～S24;以PA的野生菌株PA01作为MexA基因的阳性对照。将筛选出的6株PA临床菌株及野生菌株PA01培养到对数增长期,分别以终浓度为30μg/ml(高浓度组)和终浓度为6μg/ml(低浓度组)的硅纳米颗粒加入到菌液中,培养2、4、8、12、24 h时取样并在电子显微镜下观察硅纳米颗粒摄入情况。结果 24株PA临床菌株菌液中均有不同程度的外排泵基因表达,S24同时表达4种外排泵基因(MexA、MexC、MexX、MexE)。PA01(仅表达1种外排泵基因MexA)与S24摄入的硅纳米颗粒情况相似,PA01菌液培养2 h时可以发现硅纳米颗粒摄入,以12、24 h时硅纳米颗粒摄入最多,且摄入情况相似;高浓度组S24培养24 h时硅纳米颗粒摄入量是低浓度组的2倍。结论硅纳米颗粒不完全受主动外排泵的影响,至少有一部分硅纳米颗粒能进入到细菌体内并持续一段时间,这为其作为抗菌药物载体提供了实验依据。 展开更多

关键词 假单胞菌 铜绿 硅 主动外排泵 药物载体 多药耐药

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铜绿假单胞菌主动外排泵介导的多重抗生素耐药性(英文) 被引量：18

7

作者 李显志 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第10期577-596,共20页

铜绿假单胞菌作为一种机会致病菌 ,对多种临床常用抗生素呈现明显的固有与获得性耐药 ,这种多重耐药性的形成机制在于该菌具有的多种能量依赖性的药物主动外排泵和低通透性外膜屏障协同作用所致。近 10年对铜绿假单胞菌药物外排泵的研... 铜绿假单胞菌作为一种机会致病菌 ,对多种临床常用抗生素呈现明显的固有与获得性耐药 ,这种多重耐药性的形成机制在于该菌具有的多种能量依赖性的药物主动外排泵和低通透性外膜屏障协同作用所致。近 10年对铜绿假单胞菌药物外排泵的研究已经颇为深入 ,本文对有关进展予以讨论。在铜绿假单胞菌已报道了 6种属于“耐药—生节—分裂 (RND)”类的药物外排泵系统 ,它们可在天然野生株表达或者由于基因突变而诱导表达 ,从而介导了对β-内酰胺类 (包括β-内酰胺酶抑制剂 )、氨基糖苷类、氟喹诺酮类、大环内酯类及四环素类等的耐药性。这些外排泵中尤其以 Mex AB-Opr M系统的作用底物范围最广 ,在耐药性形成中起主要作用。RND类外排泵系统也普遍存在于其它革兰氏阴性细菌。各外排泵通常由内膜转运体蛋白、内膜融合蛋白及外膜通道蛋白一起形成功能性转运复合体将药物排至胞外。药物外排泵常影响对灭活酶较稳定的抗菌药物。一些新抗菌药物如 L inezolid(Oxa-zolidinoes类 )、Telithromycin(Ketolides类 )及 Tigecycline(Glycyclines类 )也是 Mex AB-Opr M等 RND类外排泵的作用底物 ,故这些药物抗革兰氏阳性细菌的活性较强。铜绿假单胞菌外排泵表达的调控机制多是在转录水平上受局部阻遏物或激活物的作用。 展开更多

关键词 铜绿假单胞菌 抗生素多重耐药性 主动外排泵 外排泵抑制剂

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阿奇霉素对铜绿假单胞菌MexAB-OprM外排泵及耐药性的影响 被引量：10

8

作者 夏超 谢旭华 +3 位作者 王丽丽 龚凤云 宋莹 宋建新 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期551-555,共5页

目的探讨阿奇霉素对铜绿假单胞菌MexAB-OprM外排泵的影响,为指导临床合理选择抗生素提供依据。方法排泵抑制剂(苯丙氨酸-精氨酸-β-萘酰胺PAβN)干预铜绿假单胞菌后,采用微量肉汤稀释法测定常见药物的最低抑菌浓度(minimal inhibitory c... 目的探讨阿奇霉素对铜绿假单胞菌MexAB-OprM外排泵的影响,为指导临床合理选择抗生素提供依据。方法排泵抑制剂(苯丙氨酸-精氨酸-β-萘酰胺PAβN)干预铜绿假单胞菌后,采用微量肉汤稀释法测定常见药物的最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)值的变化,筛选主动外排表型阳性菌株。PCR扩增主动外排表型阳性菌株oprM、mexB和mexR;real-time PCR检测主动外排表型阳性菌株mexB的mRNA水平;对主动外排表型阳性菌株进行mexR基因测序分析。在阿奇霉素作用下,观察铜绿假单胞菌的mexB基因表达及对头孢他啶、左氧氟沙星、环丙沙星和美罗培南的MIC值变化。结果从20个临床多重耐药的铜绿假单胞菌菌株中筛选出8株主动外排表型阳性菌。检测表明这8株菌oprM、mexB和mexR均呈阳性,mexB的mRNA水平均较PAO1显著增高。对8株MexAB-OprM高表达菌mexR基因进行测序,发现菌株PAO03的mexR基因存在突变。阿奇霉素可显著降低mexR基因未突变MexAB-OprM高表达菌株的mexB基因的表达和对头孢他啶、左氧氟沙星、环丙沙星和美罗培南的MIC值,而对菌株PAO03和nalB突变株(mexR基因突变MexAB-OprM高表达菌株)无显著影响。结论阿奇霉素可抑制铜绿假单胞菌MexAB-OprM外排泵的表达,提高铜绿假单胞菌对抗生素的敏感性。 展开更多

关键词 铜绿假单胞菌 外排泵抑制剂 阿奇霉素 MEXAB-OPRM

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碳青霉烯类耐药铜绿假单胞菌外排泵MexAB-OprM的研究 被引量：12

9

作者 魏光 叶英 +1 位作者 郑美娟 沈继录 《中国感染与化疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期193-198,共6页

目的研究铜绿假单胞菌对碳青霉烯类耐药与外排泵MexAB-OprM的相关性。方法琼脂稀释法测定亚胺培南和美罗培南对75株铜绿假单胞菌的最低抑菌浓度(MIC),联合外排泵抑制剂MC207110进行外排泵表型的筛选;用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增M... 目的研究铜绿假单胞菌对碳青霉烯类耐药与外排泵MexAB-OprM的相关性。方法琼脂稀释法测定亚胺培南和美罗培南对75株铜绿假单胞菌的最低抑菌浓度(MIC),联合外排泵抑制剂MC207110进行外排泵表型的筛选;用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增MexAB-OprM融合蛋白结构基因mexA以及内参基因rpoD,并测定其mRNA的表达量,用PCR扩增MexAB-OprM相对高表达菌株的外排泵调节基因mexR、nalC和nalD,对扩增产物进行DNA双向测序;结果进行BLAST比对分析。结果 75株铜绿假单胞菌中外排泵表型阳性菌株13株,其中10株细菌的MexAB-OprM相对表达量增高,此高表达MexAB-OprM菌株的调节基因mexR、nalC及nalD均阳性。其中9株菌nalC均发生第71位氨基酸突变(甘氨酸→谷氨酸)、8株菌同时还有第209位氨基酸突变(丝氨酸→精氨酸),仅发现1株菌nalD第158位氨基酸突变(苏氨酸→异亮氨酸),8株菌mexR发生突变。结论外排泵MexAB-OprM的高表达在铜绿假单胞菌对碳青霉烯类耐药中可能起到重要作用。MexAB-OprM的高表达与其调节基因突变相关。 展开更多

关键词 铜绿假单胞菌 耐药机制 碳青霉烯类 主动外排系统

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碳青霉烯类抗生素耐药铜绿假单胞菌外排泵和外膜孔蛋白表达水平的研究 被引量：12

10

作者 李红玲 廖康 +2 位作者 陈亚岗 俞云松 李兰娟 《中国感染与化疗杂志》 CAS 2008年第6期414-418,共5页

目的探讨我国临床分离的碳青霉烯类抗生素耐药铜绿假单胞菌外排泵MexAB-OprM和外膜孔蛋白OprD2表达水平及其与碳青霉烯类抗生素耐药性之间的关系。方法收集我国15个省市28所医院临床分离的铜绿假单胞菌655株,琼脂稀释法测定该菌加入外... 目的探讨我国临床分离的碳青霉烯类抗生素耐药铜绿假单胞菌外排泵MexAB-OprM和外膜孔蛋白OprD2表达水平及其与碳青霉烯类抗生素耐药性之间的关系。方法收集我国15个省市28所医院临床分离的铜绿假单胞菌655株,琼脂稀释法测定该菌加入外排泵抑制剂羟基氰氯苯腙(CCCP)前后对亚胺培南和美罗培南的MIC;RT-PCR检测外排泵MexAB-OprM和孔蛋白OprD2的表达水平;十二烷基硫酸钠-聚丙酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白印迹(Western-blot)检测外膜孔蛋白OprD2。结果收集到的655株铜绿假单胞菌菌株对亚胺培南和美罗培南敏感率分别为52.5%和59.2%,加入CCCP前后其对亚胺培南和美罗培南的敏感率无明显变化;52.0%(51/98)美罗培南耐药株MexAB-OprM显著高表达(P<0.05),43.7%(59/135)亚胺培南耐药株OprD2显著低表达(P<0.05),14.8%(20/135)亚胺培南耐药株OprD2表达缺失;SDS-PAGE和Western-blot显示与标准菌株PAO1相比,OprD2表达水平减低菌株ZZ20显影减低,表达缺失菌株BJ1不显影。结论MexAB-OprM表达升高和OprD2表达降低甚至缺失是我国铜绿假单胞菌对美罗培南和亚胺培南耐药的重要机制。 展开更多

关键词 铜绿假单胞菌 外排泵 外膜孔蛋白 羟基氰氯苯腙 实时荧光定量反转录聚合酶链反应

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铜绿假单胞菌MexXY外排泵调控机制研究进展 被引量：8

11

作者 鞠晓红 王月华 孙艳美 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 2019年第1期40-46,共7页

MexXY外排泵属于耐药结节分化(resistance nodulation division, RND)家族成员,是氨基糖苷类耐药决定子,在多重耐药或泛耐药铜绿假单胞菌中发挥重要作用,并与细菌的应激反应和致病性相关。阐明其表达调控机制将为抗菌药物研制及有效抑... MexXY外排泵属于耐药结节分化(resistance nodulation division, RND)家族成员,是氨基糖苷类耐药决定子,在多重耐药或泛耐药铜绿假单胞菌中发挥重要作用,并与细菌的应激反应和致病性相关。阐明其表达调控机制将为抗菌药物研制及有效抑制剂筛选提供新思路。本文在简要介绍RND外排系统的基础上,重点对近年来MexXY外排泵调控机制的研究进展做一简要综述。 展开更多

关键词 铜绿假单胞菌 MexXY 外排泵 RND家族 调控机制 耐药

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美罗培南耐药铜绿假单胞菌多药外排泵研究 被引量：10

12

作者 沈继录 吴卫红 朱德妹 《中国感染与化疗杂志》 CAS 2011年第6期446-451,共6页

目的研究美罗培南耐药铜绿假单胞菌的多药外排泵机制。方法采用琼脂稀释法测定美罗培南对141株铜绿假单胞菌的最低抑菌浓度(MIC),同时观察加入泵抑制剂MC207110后的美罗培南对141株铜绿假单胞菌MIC变化,检测多药外排泵机制。实时定量PC... 目的研究美罗培南耐药铜绿假单胞菌的多药外排泵机制。方法采用琼脂稀释法测定美罗培南对141株铜绿假单胞菌的最低抑菌浓度(MIC),同时观察加入泵抑制剂MC207110后的美罗培南对141株铜绿假单胞菌MIC变化,检测多药外排泵机制。实时定量PCR检测外排泵mRNA水平的表达。PCR扩增外排泵编码基因及调控基因并测序分析。结果外排泵表型试验显示美罗培南对69.1%(65/94)菌株的MIC降低至原来的1/4～1/512。20株美罗培南耐药铜绿假单胞菌中有4种外排泵基因mRNA表达水平有增高。其中以MexEF-OprN为最多,共有10株。其次为MexCD-oprJ,有5株。MexAB-OprM有4株,MexXY-OprM有3株。其中有2株细菌的MexA和MexC基因mRNA表达水平同时增高。20株美罗培南耐药铜绿假单胞菌的4种外排泵调控基因测序结果显示MexAB-OprM过度表达的菌株中有3株系mexR突变,1株系nalC突变所致,未发现nalD突变。5株MexCD-OprJ过度表达的菌株均发生了nfxB突变,10株MexEF-OprN高表达株均有mexT突变,3株MexXY-OprM高表达株均有mexZ基因突变。20株菌株外排泵编码基因(MexB、MexD、MexF、MexY)均未发生突变。结论外排泵机制可能是造成铜绿假单胞菌对美罗培南耐药的主要原因之一。外排泵系统的过度表达主要是由于其相应的调节基因突变所致。 展开更多

关键词 铜绿假单胞菌 耐药性 美罗培南 多药外排泵

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铜绿假单胞菌主要RND外排泵表达与β-内酰胺类抗生素耐药性的相关性研究 被引量：5

13

作者 吴国营 杨洪江 +5 位作者 林书祥 巴兆粉 李群 秦旭颖 吴海鹏 王维 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期459-464,共6页

目的探讨铜绿假单胞菌4种主要RND外排泵的表达水平与β-内酰胺类抗生素耐药性间关系。方法采用药敏实验检测临床菌株β-内酰胺类抗生素耐药性;构建转录融合报告基因mexA-lacZ、mexC-lacZ、mexE-lacZ和mexX-lacZ,通过测定β-半乳糖苷酶活... 目的探讨铜绿假单胞菌4种主要RND外排泵的表达水平与β-内酰胺类抗生素耐药性间关系。方法采用药敏实验检测临床菌株β-内酰胺类抗生素耐药性;构建转录融合报告基因mexA-lacZ、mexC-lacZ、mexE-lacZ和mexX-lacZ,通过测定β-半乳糖苷酶活力,分析和比较4种RND外排泵表达水平的差异,及其表达水平与菌株抗生素耐药性的相关性。结果共检测151株临床菌株,对羧苄西林、替卡西林、氨曲南和头孢他啶的耐药性分别为19.87%、9.93%、2.65%和26.49%。选择耐2种及以上抗生素的菌株23株和对4种抗生素全部敏感的菌株19株,测定β-半乳糖苷酶活力。耐药菌株的mexA、mexC和mexX基因的表达水平与敏感菌株之间的差异有统计学意义(P均<0.05)。多元线性回归分析发现,mexA、mexC和mexX基因的表达水平分别与羧苄西林、替卡西林和氨曲南的抑菌圈直径存在高度或中度负相关性;贝塔权重数据显示mexA基因表达水平是影响羧苄西林(-0.595)、替卡西林(-0.483)和氨曲南(-0.553)3种抗菌素耐药性的主要因素。结论外排泵MexAB-OprM、MexCD-OprJ和MexXY-OprM的表达水平与β-内酰胺类抗生素耐药性存在显著相关性,MexAB-OprM对临床菌株β-内酰胺类抗生素耐药性具有主要影响。 展开更多

关键词 铜绿假单胞菌 Β-内酰胺类 RND外排泵 融合报告基因 相关性

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作用于铜绿假单胞菌外排泵的药物筛选模型的建立及初步应用 被引量：2

14

作者 王玉峰 余利岩 +2 位作者 杨喆 左联 姚天爵 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期6-10,共5页

铜绿假单胞菌是耐药性十分突出的一类院内感染条件致病革兰氏阴性细菌 ,根据外排泵是铜绿假单胞菌产生耐药性的主要原因这一原理 ,以铜绿假单胞菌的外排泵为靶点 ,用过量表达外排泵的铜绿假单胞菌 Y5和外膜微孔蛋白 (Opr D2 )缺陷菌株 7... 铜绿假单胞菌是耐药性十分突出的一类院内感染条件致病革兰氏阴性细菌 ,根据外排泵是铜绿假单胞菌产生耐药性的主要原因这一原理 ,以铜绿假单胞菌的外排泵为靶点 ,用过量表达外排泵的铜绿假单胞菌 Y5和外膜微孔蛋白 (Opr D2 )缺陷菌株 72 0 8以及铜绿假单胞菌标准菌株 PAO1建立了一个作用于铜绿假单胞菌外排泵的药物筛选模型。应用此模型可以初筛作用于铜绿假单胞菌外排泵的药物以及与现有已知的抗生素有协同作用的活性物质的筛选。应用所建立的方法从 2 44 9株微生物发酵液中 (真菌 170 0株 ,放线菌70 0株 ,海洋细菌 49株 )筛选得到 4株阳性菌 ,多次发酵表明这 4株阳性菌产生抗铜绿假单胞菌的活性物质的性质比较稳定 。 展开更多

关键词 铜绿假单胞菌 筛选模型 外排泵 耐药性

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临床铜绿假单胞菌多重耐药株外排泵机制研究 被引量：10

15

作者 吴安华 罗晓燕 《中国感染控制杂志》 CAS 2006年第4期293-297,共5页

目的研究临床分离的多重耐药铜绿假单胞菌MexA-MexB-OprM外排泵的外膜蛋白OprM的表达及泵调节基因mexR突变情况。方法筛选铜绿假单胞菌多重耐药株13株和敏感菌株5株进行外膜蛋白SDS-PAGE分析,比较OprM的表达差异。聚合酶链反应(PCR)法扩... 目的研究临床分离的多重耐药铜绿假单胞菌MexA-MexB-OprM外排泵的外膜蛋白OprM的表达及泵调节基因mexR突变情况。方法筛选铜绿假单胞菌多重耐药株13株和敏感菌株5株进行外膜蛋白SDS-PAGE分析,比较OprM的表达差异。聚合酶链反应(PCR)法扩增mexR基因,鉴定产物,测序。结果多重耐药菌株组OprM蛋白在相对分子量为49 kD处的各电泳条带较敏感菌株和质控菌株铜绿假单胞菌ATCC 27853的灰度明显增强,其光密度值多重耐药菌株组为157.79,敏感菌株组为132.03,两组比较,差异有显著性(t=19.345,P<0.01);多重耐药菌株mexR基因产物测序,除个别碱基插入外,以A-96→G,G-411→A,C-308→G,T-377→A 4个核苷酸点突变为主,后二者还导致了其编码的氨基酸发生改变,分别为Ala-103→Gly,Val-126→Glu。结论OprM表达增强提示MexA-MexB-OprM外排泵耐药机制参与多重耐药形成。多重耐药菌株的mexR基因均存在点突变,提示mexR基因突变引起MexA-MexB-OprM外排泵表达增强。 展开更多

关键词 铜绿假单胞菌 多重耐药 外排泵 mexR基因 抗药性 微生物

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铜绿假单胞菌中RND外排泵功能的研究 被引量：1

16

作者 宗自卫 董兆麟 段康民 《西北大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期434-437,共4页

目的铜绿假单胞菌的耐药性与细胞膜的低通透性和膜上存在的RND外排泵有关,而且RND外排泵起主导作用。方法利用发光杆菌的荧光素酶基因操纵子luxCDABE为报道子,对铜绿假单胞菌基因组中所有的12种已知和可能的RND外排泵基因进行了系统的... 目的铜绿假单胞菌的耐药性与细胞膜的低通透性和膜上存在的RND外排泵有关,而且RND外排泵起主导作用。方法利用发光杆菌的荧光素酶基因操纵子luxCDABE为报道子,对铜绿假单胞菌基因组中所有的12种已知和可能的RND外排泵基因进行了系统的研究。结果低于抑制浓度庆大霉素对PAOC和PAOI有明显的调节作用。低于抑制浓度四环素对PAOJ调节作用,但属于同一类抗生素的土霉素却没有调节作用。α-氨苄青霉素对12个RND外排泵中的11个都有明显的调节。结论这些RND受不同类型抗生素调节并将它们向外排出。外排泵所向外排出的物质如抗生素,在结构上没有可识别的相关性。其中一个由基因PA2520,PA2521和PA2522组成的RND外排泵,不仅能够向外排出锌离子,而且还能向外排出抗生素。 展开更多

关键词 铜绿假单胞菌 主动外排泵 基因调节 抗生素

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铜绿假单胞菌多重药物耐药性外排泵十年研究回顾(英文) 被引量：7

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作者 李显志 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期481-500,共20页

细菌抗生素耐药性严重地威胁着感染性疾病的治疗,如常见于ESKAPE病原菌(即肠球菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌和肠道杆菌属)。铜绿假单胞菌的多重药物耐药性主要在于该菌具有多重药物外排泵如MexAB-OprM... 细菌抗生素耐药性严重地威胁着感染性疾病的治疗,如常见于ESKAPE病原菌(即肠球菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌和肠道杆菌属)。铜绿假单胞菌的多重药物耐药性主要在于该菌具有多重药物外排泵如MexAB-OprM和MexXY,后者属于耐药结节细胞分化(RND)家族转运体。自20年前发现RND外排泵后,现已对这些外排泵的临床意义、结构与组装、外排机制、表达调控与抑制等有了深入的认识。药物外排泵不仅介导了具有临床重要意义的多重耐药性,而且参与了其他细胞功能如恶劣环境下(包括存在抗菌药物时)的应激反应和致病性等。研究开发不受外排泵明显作用的抗菌药物或外排泵抑制剂以便与作为外排泵底物的抗铜绿假单胞菌抗生素联合应用仍然是新药研发所面临的一大挑战。本文旨在回顾讨论作者于2003年在本刊所发表的相关综述后上述多个方面过去10年的研究进展。这些研究再次清楚显示全面合理控制各类抗生素使用的重要性和紧迫性以避免后抗生素时代的来临。 展开更多

关键词 铜绿假单胞菌 ESKAPE病原菌 抗生素耐药性 多重耐药性 外排泵 RND外排泵 应激反应 生物被膜

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蟾酥醇提物对多重耐药铜绿假单胞菌头孢他啶敏感性的影响

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作者 周鸿威 王成祥 +8 位作者 吕思缘 林英 张悦 刘国星 李磊 王玉婷 郭雨菲 薛贝 于会勇 《世界中医药》 北大核心 2024年第23期3592-3596,共5页

目的:探讨蟾酥醇提物通过铜绿假单胞菌主动外排系统(MexABOprM)对多重耐药铜绿假单胞菌(MDRPA)头孢他啶敏感性的影响。方法:筛选MexAB-OprM阳性的铜绿假单胞菌菌株,通过肉汤稀释法建立MDRPA体外抑菌实验模型,测定蟾酥醇提物及其联合头... 目的:探讨蟾酥醇提物通过铜绿假单胞菌主动外排系统(MexABOprM)对多重耐药铜绿假单胞菌(MDRPA)头孢他啶敏感性的影响。方法:筛选MexAB-OprM阳性的铜绿假单胞菌菌株,通过肉汤稀释法建立MDRPA体外抑菌实验模型,测定蟾酥醇提物及其联合头孢他啶时的最小抑菌浓度;蟾酥醇提物干预前后用实时荧光反转录PCR检测MDRPA铜绿假单胞菌主动外排系统MexAB-OprM中mexB、mexR、oprM基因mRNA表达量。结果:蟾酥醇提物对MDRPA的最小抑菌浓度值是6.25 mg/mL。蟾酥醇提物联合头孢他啶的联合指数低于1,两药联合应用时存在相加作用。随蟾酥醇提物浓度升高,MDRPA外排泵MexAB-OprM的mexB、oprM相对表达量降低(P<0.05),mexR相对表达量升高(P<0.05)。结论:蟾酥醇提物通过抑制MexABOprM外排泵的表达提高MDRPA对头孢他啶的敏感性。 展开更多

关键词 蟾酥醇提物 多重耐药铜绿假单胞菌 体外抑菌 肉汤稀释法 实时荧光反转录聚合酶链反应 铜绿假单胞菌主动外排系统 抗耐药作用 逆转外排泵机制

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扶正解毒化瘀方对多重耐药铜绿假单胞菌MexAB-OprM外排泵表达影响的研究 被引量：10

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作者 王玉婷 徐红日 +5 位作者 赵世同 程淼 姚兴伟 常桂娇 陈师林 王成祥 《世界中医药》 CAS 2019年第4期859-863,共5页

目的:研究扶正解毒化瘀方对多重耐药铜绿假单胞菌MexAB-OprM外排泵表达的影响。方法:针对筛选出的MexAB-OprM阳性的铜绿假单胞菌菌株,通过微量稀释法,测定哌拉西林-他唑巴坦的最小抑菌浓度和扶正解毒化瘀方水提物的最小杀菌浓度,从而确... 目的:研究扶正解毒化瘀方对多重耐药铜绿假单胞菌MexAB-OprM外排泵表达的影响。方法:针对筛选出的MexAB-OprM阳性的铜绿假单胞菌菌株,通过微量稀释法,测定哌拉西林-他唑巴坦的最小抑菌浓度和扶正解毒化瘀方水提物的最小杀菌浓度,从而确定荧光定量PCR细菌样本时培养剂中哌拉西林-他唑巴坦和扶正解毒化瘀方水提物的浓度。绘制细菌生长曲线,确定细菌样本的培养时间。利用实时荧光定量PCR技术检测药物干预前后mex B、oprM、mexR的表达量。结果:扶正解毒化瘀方水提物能降低MexAB-OprM外排泵阳性MDRPA菌株的mex B、oprM表达量(P <0. 05),同时能增加mexR的表达量(P <0. 05)。结论:扶正解毒化瘀方对MDRPA所致肺炎的作用机制之一可能是通过抑制MexAB-OprM外排泵的表达实现的。 展开更多

关键词 扶正解毒化瘀方 多重耐药铜绿假单胞菌 外排泵 MEXAB-OPRM 最小抑菌浓度 生长曲线 实时荧光定量PCR 作用机制

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海南西部地区多重耐药铜绿假单胞菌外排泵基因表达及其危险因素分析 被引量：2

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作者 杨祚明 谭孟源 +1 位作者 符春花 李永超 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2015年第17期2895-2897,共3页

目的:了解多重耐药铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,Pa)多药物外排泵基因表达的分子流行趋势及危险因素。方法:选取2014年4-10月期间本院多重耐药Pa感染病例100例,分离Pa菌株,分析3种外排泵基因表达及相关危险因素。结果:100株Pa中... 目的:了解多重耐药铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,Pa)多药物外排泵基因表达的分子流行趋势及危险因素。方法:选取2014年4-10月期间本院多重耐药Pa感染病例100例,分离Pa菌株,分析3种外排泵基因表达及相关危险因素。结果:100株Pa中,Mex AB-Opr M、Mex EF-Opr N和Mex CD-Opr J阳性株数分别为100株(100%),50株(50%)、35株(35%);Pa菌Mex AB-Opr M、Mex EF-Opr N和Mex CD-Opr J表达的危险因素分析表明:碳青酶烯类和糖肽类抗生素的使用是Pa菌Mex AB-Opr M外排泵诱导性高表达的危险因素,而碳青酶烯类及大环内酯类抗生素使用是Mex EF-Opr N和Mex CD-Opr J诱导性表达的危险因素;侵入性操作、低白细胞、贫血、慢性基础疾病、入住ICU病房是Pa菌3种外排泵传播性表达的共同危险因素;侵入性操作、低白细胞、贫血、慢性病、入住ICU是Pa菌3种常见外排泵表达或高表达共同的独立危险因素。结论:严格规范抗生素的使用、治疗慢性病、提高免疫力、减少侵入性损伤、把握转入ICU指征,对Pa多种外排泵系统的诱导表达将有积极的抑制作用。 展开更多

关键词 多重耐药铜绿假单胞菌 外排泵 危险因素

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