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Na^+-K^+-ATP酶α1亚基DR多肽单克隆抗体的制备和应用
1
作者
闫小飞
武丽涛
+5 位作者
杜小娟
李靖
张福军
韩燕
吕社民
李冬民
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第12期1695-1699,共5页
目的制备钠钾ATP酶(Na^+-K^+-ATPase)α1亚基DR区段(897DVEDSYGQQWTYEQR911)的单克隆抗体(mAb)并鉴定其活性。方法以合成的DR-钥孔戚血蓝素(KLH)为免疫原,免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合技术建立能稳定分泌抗DR的杂交瘤细胞株,制备Na^+-K^...
目的制备钠钾ATP酶(Na^+-K^+-ATPase)α1亚基DR区段(897DVEDSYGQQWTYEQR911)的单克隆抗体(mAb)并鉴定其活性。方法以合成的DR-钥孔戚血蓝素(KLH)为免疫原,免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合技术建立能稳定分泌抗DR的杂交瘤细胞株,制备Na^+-K^+-ATPaseα1亚基DR mAb。ELISA测定杂交瘤细胞上清中mAb效价,斑点免疫杂交、Western blot法及免疫荧光细胞化学染色法检测单克隆的特异性,采用Senso LyteFDP蛋白磷酸酶定量试剂盒检测Na^+-K^+-ATPase活性,高糖细胞损伤实验检测DR mAb对高糖引起细胞损伤的保护作用。结果成功制备3株稳定分泌抗体的阳性细胞株。选择强阳性DRm217细胞株,制备腹水进一步验证。免疫荧光细胞化学染色、免疫斑点杂交及Western blot法结果显示,DRm217 mAb能够特异性结合在细胞膜表面,识别Na^+-K^+-ATPase的DR多肽。DRm217能够提高Na^+-K^+-ATPase活性,对高糖引起的细胞损伤具有一定的保护作用。结论成功制备了针对Na^+-K^+-ATPase DR多肽的mAb。
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关键词
钠
钾
atp
酶
(
na
+
-k
+
-atpase
)
DR多肽
单克隆抗体
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职称材料
饲料中钾对皱纹盘鲍幼鲍生长及其生理指标的影响
被引量：
3
2
作者
王蔚芳
张文兵
+4 位作者
麦康森
徐玮
刘付志国
艾庆辉
李会涛
《水生生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第6期1106-1112,共7页
在以酪蛋白和明胶为蛋白源的半精制基础饲料中,添加不同浓度梯度的钾(0、2、4、8、16、32 g钾/kg饲料),钾源为KCl,配制成6种实验饲料(实测钾含量分别为:0.10、2.12、4.39、9.79、20.08和27.26 g/kg),探讨皱纹盘鲍(Haliotis discus hann...
在以酪蛋白和明胶为蛋白源的半精制基础饲料中,添加不同浓度梯度的钾(0、2、4、8、16、32 g钾/kg饲料),钾源为KCl,配制成6种实验饲料(实测钾含量分别为:0.10、2.12、4.39、9.79、20.08和27.26 g/kg),探讨皱纹盘鲍(Haliotis discus hannai)幼鲍对饲料中钾的需求量及其在长期适应不同含量钾的过程中的生理反应。幼鲍初始体重为(0.24±0.00)g,初始壳长为(12.24±0.04)mm,实验在流水系统中进行,养殖周期为15周。实验期间水温12—23℃,海水钾含量为(472.94±3.59)mg/L。结果表明,饲料中不同含量的钾对皱纹盘鲍的增重率(WGR,%)、贝壳日增长(DISL,μm/d)及存活率没有显著影响(P>0.05)。皱纹盘鲍软体部的水分、粗脂肪和贝壳的灰分含量受饲料中钾含量的影响不显著(P>0.05)。当饲料中钾含量大于等于4.39 g/kg时,与0.10 g/kg饲料组相比,软体部粗蛋白质含量显著升高(P<0.05)。软体部钾的含量和贝壳中钾、钠的含量受饲料中钾含量的影响不显著(P>0.05)。幼鲍软体部钠含量在饲料钾含量为20.08、27.26 g/kg时显著低于其他各组(P<0.05)。鳃Na+-K+ATP酶活力随着饲料中钾含量的增加逐渐下降,当饲料中钾含量为20.08、27.26g/kg时,与0.10 g/kg组相比显著降低(P<0.05),但与其他组相比差异不显著。因此研究认为:以生长指标为判据,不需要在饲料中补充钾,海水中钾和饲料原料中的钾能够维持皱纹盘鲍幼鲍的正常生长;但以生理指标(软体部粗蛋白质和钠含量,鳃Na+-K+ATP酶活力)评判,饲料中钾的适宜含量为2.12 g/kg。
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关键词
皱纹盘鲍
钾
生长
饲料
营养
na
+
-k
+
atp
酶
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职称材料
题名
Na^+-K^+-ATP酶α1亚基DR多肽单克隆抗体的制备和应用
1
作者
闫小飞
武丽涛
杜小娟
李靖
张福军
韩燕
吕社民
李冬民
机构
西安交通大学基础医学院生物化学与分子生物学系
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第12期1695-1699,共5页
基金
国家自然科学基金(81400232)
中国博士后基金(2015M572571)
中央高校基本科研业务费-国际合作资助项目(xjtu-2015gjhz17)
文摘
目的制备钠钾ATP酶(Na^+-K^+-ATPase)α1亚基DR区段(897DVEDSYGQQWTYEQR911)的单克隆抗体(mAb)并鉴定其活性。方法以合成的DR-钥孔戚血蓝素(KLH)为免疫原,免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合技术建立能稳定分泌抗DR的杂交瘤细胞株,制备Na^+-K^+-ATPaseα1亚基DR mAb。ELISA测定杂交瘤细胞上清中mAb效价,斑点免疫杂交、Western blot法及免疫荧光细胞化学染色法检测单克隆的特异性,采用Senso LyteFDP蛋白磷酸酶定量试剂盒检测Na^+-K^+-ATPase活性,高糖细胞损伤实验检测DR mAb对高糖引起细胞损伤的保护作用。结果成功制备3株稳定分泌抗体的阳性细胞株。选择强阳性DRm217细胞株,制备腹水进一步验证。免疫荧光细胞化学染色、免疫斑点杂交及Western blot法结果显示,DRm217 mAb能够特异性结合在细胞膜表面,识别Na^+-K^+-ATPase的DR多肽。DRm217能够提高Na^+-K^+-ATPase活性,对高糖引起的细胞损伤具有一定的保护作用。结论成功制备了针对Na^+-K^+-ATPase DR多肽的mAb。
关键词
钠
钾
atp
酶
(
na
+
-k
+
-atpase
)
DR多肽
单克隆抗体
Keywords
na
＋
-k
＋
-atpase
DR region
monoclo
na
l antibody
分类号
Q813.2 [生物学—生物工程]
R392.33 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
饲料中钾对皱纹盘鲍幼鲍生长及其生理指标的影响
被引量：
3
2
作者
王蔚芳
张文兵
麦康森
徐玮
刘付志国
艾庆辉
李会涛
机构
中国海洋大学海水养殖教育部重点实验室
中国水产科学研究院黄海水产研究所青岛市海水鱼类种子工程与生物技术重点实验室
出处
《水生生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第6期1106-1112,共7页
基金
国家自然科学基金(编号:30972262)资助
文摘
在以酪蛋白和明胶为蛋白源的半精制基础饲料中,添加不同浓度梯度的钾(0、2、4、8、16、32 g钾/kg饲料),钾源为KCl,配制成6种实验饲料(实测钾含量分别为:0.10、2.12、4.39、9.79、20.08和27.26 g/kg),探讨皱纹盘鲍(Haliotis discus hannai)幼鲍对饲料中钾的需求量及其在长期适应不同含量钾的过程中的生理反应。幼鲍初始体重为(0.24±0.00)g,初始壳长为(12.24±0.04)mm,实验在流水系统中进行,养殖周期为15周。实验期间水温12—23℃,海水钾含量为(472.94±3.59)mg/L。结果表明,饲料中不同含量的钾对皱纹盘鲍的增重率(WGR,%)、贝壳日增长(DISL,μm/d)及存活率没有显著影响(P>0.05)。皱纹盘鲍软体部的水分、粗脂肪和贝壳的灰分含量受饲料中钾含量的影响不显著(P>0.05)。当饲料中钾含量大于等于4.39 g/kg时,与0.10 g/kg饲料组相比,软体部粗蛋白质含量显著升高(P<0.05)。软体部钾的含量和贝壳中钾、钠的含量受饲料中钾含量的影响不显著(P>0.05)。幼鲍软体部钠含量在饲料钾含量为20.08、27.26 g/kg时显著低于其他各组(P<0.05)。鳃Na+-K+ATP酶活力随着饲料中钾含量的增加逐渐下降,当饲料中钾含量为20.08、27.26g/kg时,与0.10 g/kg组相比显著降低(P<0.05),但与其他组相比差异不显著。因此研究认为:以生长指标为判据,不需要在饲料中补充钾,海水中钾和饲料原料中的钾能够维持皱纹盘鲍幼鲍的正常生长;但以生理指标(软体部粗蛋白质和钠含量,鳃Na+-K+ATP酶活力)评判,饲料中钾的适宜含量为2.12 g/kg。
关键词
皱纹盘鲍
钾
生长
饲料
营养
na
+
-k
+
atp
酶
Keywords
Haliotis discus han
na
i
Potassium
Growth
Feed
Nutrition
na
＋
-k
＋
atp
ase
分类号
S968.9 [农业科学—水产养殖]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
Na^+-K^+-ATP酶α1亚基DR多肽单克隆抗体的制备和应用
闫小飞
武丽涛
杜小娟
李靖
张福军
韩燕
吕社民
李冬民
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016
0
在线阅读
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职称材料
2
饲料中钾对皱纹盘鲍幼鲍生长及其生理指标的影响
王蔚芳
张文兵
麦康森
徐玮
刘付志国
艾庆辉
李会涛
《水生生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012
3
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下载PDF
职称材料
已选择
0
条
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引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
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