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CD44通过影响猪流行性腹泻病毒复制调节钠氢交换体3活性
1
作者
王静
张淑娟
+3 位作者
胡霞
刘向阳
张兴翠
宋振辉
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第5期2176-2185,共10页
本研究旨在研究CD44(cluster of differentiation 44)对感染猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)的猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)中钠氢交换体3(NHE3)表达及膜转移的影响。以IPEC-J2为细胞模型,采用RT-qPCR和Western b...
本研究旨在研究CD44(cluster of differentiation 44)对感染猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)的猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)中钠氢交换体3(NHE3)表达及膜转移的影响。以IPEC-J2为细胞模型,采用RT-qPCR和Western blot检测感染PEDV后不同时间点IPEC-J2细胞中NHE3和PEDV N表达量变化;转染质粒调控IPEC-J2中CD44表达后,采用TCID50和Western blot检测PEDV感染后不同时间点PEDV复制水平和NHE3蛋白表达变化,采用火焰原子吸收法检测IPEC-J2细胞内外Na^(+)浓度变化。转录组数据和细胞试验结果显示,与对照组相比,PEDV感染后IPEC-J2细胞中CD44蛋白表达水平和mRNA表达量均呈上调趋势,24~48 h内上升显著(P<0.05),而PEDV N蛋白表达水平在12~48 h内则呈显著下降趋势(P<0.05)。此外,CD44重组质粒转染试验结果显示,与PEDV感染组相比,过表达CD44后感染PEDV组细胞中病毒滴度和PEDV N蛋白表达水平显著降低(P<0.05),而干扰CD44后感染PEDV组细胞中病毒滴度和PEDV N蛋白表达水平则显著上升(P<0.05)。以上结果表明,高表达CD44具有抑制PEDV复制的作用,干扰CD44后PEDV复制增多。同时,为研究PEDV感染情况下,CD44是否参与了IPEC-J2细胞中NHE3表达的调节,采用Western blot和火焰原子吸收法检测了调节CD44后膜NHE3蛋白的表达水平和细胞内外Na^(+)浓度。结果表明,过表达CD44显著促进了膜NHE3蛋白的表达和活性(P<0.05),细胞内外Na^(+)浓度逐渐恢复正常水平。相反,干扰CD44显著降低了膜NHE3蛋白的表达和活性(P<0.05),细胞内外Na^(+)浓度呈现失衡状态。结果提示,CD44可能是缓解PEDV引发仔猪腹泻的潜在治疗靶点,它通过抑制IPEC-J2细胞中PEDV的复制来增加转移至质膜上的NHE3数量,从而维持细胞内外Na^(+)运转平衡。
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关键词
CD44
猪流行性腹泻病毒
钠氢交换体3
钠
离子
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职称材料
基于AQP8、NHE3、CFTR探究参苓白术散对腹泻幼鼠模型肠黏膜的保护作用及机制
2
作者
王彦彬
王晓颖
+3 位作者
徐国娟
戚敏敏
梁翠才
马玮玮
《当代医药论丛》
2023年第8期101-104,共4页
目的:基于水通道蛋白8(AQP8)、跨膜转运蛋白钠氢交换体3(NHE3)和囊性纤维化跨膜传导调节因子(CFTR)探究参苓白术散对腹泻幼鼠模型肠黏膜的保护作用及机制。方法:购置雄性SD幼鼠50只,随机取10只设为正常组。其余40只SD幼鼠于每日上午予...
目的:基于水通道蛋白8(AQP8)、跨膜转运蛋白钠氢交换体3(NHE3)和囊性纤维化跨膜传导调节因子(CFTR)探究参苓白术散对腹泻幼鼠模型肠黏膜的保护作用及机制。方法:购置雄性SD幼鼠50只,随机取10只设为正常组。其余40只SD幼鼠于每日上午予番泻叶药液灌胃,连续干预14 d,建立幼鼠腹泻模型;建模成功后分为模型组、参苓白术散低、中、高剂量组,每组10只。为参苓白术散低、中、高剂量组使用参苓白术散药液灌胃,给药体积均为10 mL/kg;低剂量组的给药剂量为1.2 g/kg,中剂量组的给药剂量为2.3 g/kg;高剂量组的给药剂量为4.6 g/kg。正常组、模型组予等量蒸馏水灌胃。各组均连续灌胃14 d,然后比较其一般情况、结肠黏膜形态学变化及结肠黏膜AQP8、NHE3、CFTR的表达情况。结果:与正常组比较,模型组幼鼠行动迟缓,精神萎靡不振,毛发稀疏,伴有毛发脱落,肛门红肿、周围体毛有少量稀便沾染。与模型组相比,参苓白术散低、中、高组幼鼠的行动灵活性、精神状态、毛发光泽度等情况均得到不同程度的改善。与正常组比较,模型组幼鼠的结肠黏膜表皮细胞坏死明显,且其结肠黏膜伴有毛细血管的扩张,存在少许中性粒细胞的浸润。与模型组比较,参苓白术散各剂量组幼鼠的结肠黏膜表皮细胞凋亡坏死、固有层毛细血管扩张充血和中性粒细胞浸润现象明显改善。与正常组比较,模型组幼鼠结肠黏膜AQP8、NHE3的表达下降,CFTR的表达升高。与模型组比较,参苓白术散各剂量组幼鼠结肠黏膜AQP8、NHE3的表达明显升高,而CFTR的表达明显下降。结论:参苓白术散可通过调节幼鼠肠黏膜AQP8、NHE3、CFTR的表达水平来促进其体内的水液代谢,并能减轻结肠黏膜受损,起到止泻的作用。
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关键词
参苓白术散
水通道蛋白8
跨膜转运蛋白
钠氢交换体3
囊性纤维化跨膜传导调节因子
腹泻模型
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职称材料
题名
CD44通过影响猪流行性腹泻病毒复制调节钠氢交换体3活性
1
作者
王静
张淑娟
胡霞
刘向阳
张兴翠
宋振辉
机构
西南大学动物医学院
新疆农业大学动物医学学院
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第5期2176-2185,共10页
基金
中央高校基本业务基金资助项目(XDJK2020RC001)
重庆市研究生科研创新项目(CYS19137)。
文摘
本研究旨在研究CD44(cluster of differentiation 44)对感染猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)的猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)中钠氢交换体3(NHE3)表达及膜转移的影响。以IPEC-J2为细胞模型,采用RT-qPCR和Western blot检测感染PEDV后不同时间点IPEC-J2细胞中NHE3和PEDV N表达量变化;转染质粒调控IPEC-J2中CD44表达后,采用TCID50和Western blot检测PEDV感染后不同时间点PEDV复制水平和NHE3蛋白表达变化,采用火焰原子吸收法检测IPEC-J2细胞内外Na^(+)浓度变化。转录组数据和细胞试验结果显示,与对照组相比,PEDV感染后IPEC-J2细胞中CD44蛋白表达水平和mRNA表达量均呈上调趋势,24~48 h内上升显著(P<0.05),而PEDV N蛋白表达水平在12~48 h内则呈显著下降趋势(P<0.05)。此外,CD44重组质粒转染试验结果显示,与PEDV感染组相比,过表达CD44后感染PEDV组细胞中病毒滴度和PEDV N蛋白表达水平显著降低(P<0.05),而干扰CD44后感染PEDV组细胞中病毒滴度和PEDV N蛋白表达水平则显著上升(P<0.05)。以上结果表明,高表达CD44具有抑制PEDV复制的作用,干扰CD44后PEDV复制增多。同时,为研究PEDV感染情况下,CD44是否参与了IPEC-J2细胞中NHE3表达的调节,采用Western blot和火焰原子吸收法检测了调节CD44后膜NHE3蛋白的表达水平和细胞内外Na^(+)浓度。结果表明,过表达CD44显著促进了膜NHE3蛋白的表达和活性(P<0.05),细胞内外Na^(+)浓度逐渐恢复正常水平。相反,干扰CD44显著降低了膜NHE3蛋白的表达和活性(P<0.05),细胞内外Na^(+)浓度呈现失衡状态。结果提示,CD44可能是缓解PEDV引发仔猪腹泻的潜在治疗靶点,它通过抑制IPEC-J2细胞中PEDV的复制来增加转移至质膜上的NHE3数量,从而维持细胞内外Na^(+)运转平衡。
关键词
CD44
猪流行性腹泻病毒
钠氢交换体3
钠
离子
Keywords
CD44
porcine epidemic diarrhea virus
NHE
3
Na^(+)
分类号
S852.659.6 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
基于AQP8、NHE3、CFTR探究参苓白术散对腹泻幼鼠模型肠黏膜的保护作用及机制
2
作者
王彦彬
王晓颖
徐国娟
戚敏敏
梁翠才
马玮玮
机构
河西学院
出处
《当代医药论丛》
2023年第8期101-104,共4页
基金
甘肃省大学生创新创业训练计划项目,目编号:S202210740074。
文摘
目的:基于水通道蛋白8(AQP8)、跨膜转运蛋白钠氢交换体3(NHE3)和囊性纤维化跨膜传导调节因子(CFTR)探究参苓白术散对腹泻幼鼠模型肠黏膜的保护作用及机制。方法:购置雄性SD幼鼠50只,随机取10只设为正常组。其余40只SD幼鼠于每日上午予番泻叶药液灌胃,连续干预14 d,建立幼鼠腹泻模型;建模成功后分为模型组、参苓白术散低、中、高剂量组,每组10只。为参苓白术散低、中、高剂量组使用参苓白术散药液灌胃,给药体积均为10 mL/kg;低剂量组的给药剂量为1.2 g/kg,中剂量组的给药剂量为2.3 g/kg;高剂量组的给药剂量为4.6 g/kg。正常组、模型组予等量蒸馏水灌胃。各组均连续灌胃14 d,然后比较其一般情况、结肠黏膜形态学变化及结肠黏膜AQP8、NHE3、CFTR的表达情况。结果:与正常组比较,模型组幼鼠行动迟缓,精神萎靡不振,毛发稀疏,伴有毛发脱落,肛门红肿、周围体毛有少量稀便沾染。与模型组相比,参苓白术散低、中、高组幼鼠的行动灵活性、精神状态、毛发光泽度等情况均得到不同程度的改善。与正常组比较,模型组幼鼠的结肠黏膜表皮细胞坏死明显,且其结肠黏膜伴有毛细血管的扩张,存在少许中性粒细胞的浸润。与模型组比较,参苓白术散各剂量组幼鼠的结肠黏膜表皮细胞凋亡坏死、固有层毛细血管扩张充血和中性粒细胞浸润现象明显改善。与正常组比较,模型组幼鼠结肠黏膜AQP8、NHE3的表达下降,CFTR的表达升高。与模型组比较,参苓白术散各剂量组幼鼠结肠黏膜AQP8、NHE3的表达明显升高,而CFTR的表达明显下降。结论:参苓白术散可通过调节幼鼠肠黏膜AQP8、NHE3、CFTR的表达水平来促进其体内的水液代谢,并能减轻结肠黏膜受损,起到止泻的作用。
关键词
参苓白术散
水通道蛋白8
跨膜转运蛋白
钠氢交换体3
囊性纤维化跨膜传导调节因子
腹泻模型
分类号
R57 [医药卫生—消化系统]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
CD44通过影响猪流行性腹泻病毒复制调节钠氢交换体3活性
王静
张淑娟
胡霞
刘向阳
张兴翠
宋振辉
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024
0
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职称材料
2
基于AQP8、NHE3、CFTR探究参苓白术散对腹泻幼鼠模型肠黏膜的保护作用及机制
王彦彬
王晓颖
徐国娟
戚敏敏
梁翠才
马玮玮
《当代医药论丛》
2023
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