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CD44通过影响猪流行性腹泻病毒复制调节钠氢交换体3活性
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作者 王静 张淑娟 +3 位作者 胡霞 刘向阳 张兴翠 宋振辉 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期2176-2185,共10页
本研究旨在研究CD44(cluster of differentiation 44)对感染猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)的猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)中钠氢交换体3(NHE3)表达及膜转移的影响。以IPEC-J2为细胞模型,采用RT-qPCR和Western b... 本研究旨在研究CD44(cluster of differentiation 44)对感染猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)的猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)中钠氢交换体3(NHE3)表达及膜转移的影响。以IPEC-J2为细胞模型,采用RT-qPCR和Western blot检测感染PEDV后不同时间点IPEC-J2细胞中NHE3和PEDV N表达量变化;转染质粒调控IPEC-J2中CD44表达后,采用TCID50和Western blot检测PEDV感染后不同时间点PEDV复制水平和NHE3蛋白表达变化,采用火焰原子吸收法检测IPEC-J2细胞内外Na^(+)浓度变化。转录组数据和细胞试验结果显示,与对照组相比,PEDV感染后IPEC-J2细胞中CD44蛋白表达水平和mRNA表达量均呈上调趋势,24~48 h内上升显著(P<0.05),而PEDV N蛋白表达水平在12~48 h内则呈显著下降趋势(P<0.05)。此外,CD44重组质粒转染试验结果显示,与PEDV感染组相比,过表达CD44后感染PEDV组细胞中病毒滴度和PEDV N蛋白表达水平显著降低(P<0.05),而干扰CD44后感染PEDV组细胞中病毒滴度和PEDV N蛋白表达水平则显著上升(P<0.05)。以上结果表明,高表达CD44具有抑制PEDV复制的作用,干扰CD44后PEDV复制增多。同时,为研究PEDV感染情况下,CD44是否参与了IPEC-J2细胞中NHE3表达的调节,采用Western blot和火焰原子吸收法检测了调节CD44后膜NHE3蛋白的表达水平和细胞内外Na^(+)浓度。结果表明,过表达CD44显著促进了膜NHE3蛋白的表达和活性(P<0.05),细胞内外Na^(+)浓度逐渐恢复正常水平。相反,干扰CD44显著降低了膜NHE3蛋白的表达和活性(P<0.05),细胞内外Na^(+)浓度呈现失衡状态。结果提示,CD44可能是缓解PEDV引发仔猪腹泻的潜在治疗靶点,它通过抑制IPEC-J2细胞中PEDV的复制来增加转移至质膜上的NHE3数量,从而维持细胞内外Na^(+)运转平衡。 展开更多
关键词 CD44 猪流行性腹泻病毒 钠氢交换体3 离子
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钠氢交换体的结构、功能及其在疾病中的作用 被引量:3
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作者 邱晓媚 余柳婷 +2 位作者 詹彦俐 肖斌 郝文波 《成都医学院学报》 CAS 2014年第4期480-484,共5页
细胞内pH维持在一定的生理范围内,对细胞的生长分化、细胞内酶的活性、细胞骨架的装配与解聚等生理过程至关重要。细胞主要依赖于一系列离子转运蛋白来调控细胞内pH的动态平衡,钠氢交换体(Na+/H+exchanger,NHE)是其中重要的成员之一。
关键词 钠氢交换体(NHE) 基因表达 分子结构 PH调节
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细胞外信号调节激酶对心肌细胞钠氢交换体调控的作用
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作者 孙朴 罗健东 《广州医学院学报》 2011年第1期1-4,共4页
目的:探讨细胞外信号调节激酶(ERK)对心肌细胞钠氢交换体(NHE)的调控作用。方法:用氯化铵诱导乳鼠心肌细胞内酸化,用荧光指示剂(BCECF/AM)法测定细胞内pH值,钠氢交换体的活性用酸化后每分钟pH值的变化率(dpH_i/dt)表示,观察使用ERK特异... 目的:探讨细胞外信号调节激酶(ERK)对心肌细胞钠氢交换体(NHE)的调控作用。方法:用氯化铵诱导乳鼠心肌细胞内酸化,用荧光指示剂(BCECF/AM)法测定细胞内pH值,钠氢交换体的活性用酸化后每分钟pH值的变化率(dpH_i/dt)表示,观察使用ERK特异性抑制剂UO126后对NHE活性的影响;用Western blottmg检测心肌细胞ERK蛋白的磷酸化水平。结果:用ERK的选择性抑制剂UO126(3μmoL/L)预孵育5 min,与模型组比较,UO126组可以使钠氢交换的活性下降49.46%(P<0.05);与模型组比较,ERK的磷酸化水平降低66.5%(P<0.05)。结论:细胞内酸化激活NHE和ERK的过程中,NHE的激活受到ERK的调控。 展开更多
关键词 细胞外信号调节MAP激酶类 模型 动物 肌细胞 心脏 细胞内酸化 钠氢交换体
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钠氢交换体1在星形细胞瘤中的表达及其与恶性程度的关系
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作者 李文娟 黄林 孙善全 《解剖学杂志》 CAS 2020年第2期117-120,共4页
目的:检测人星形细胞瘤和正常脑组织中钠氢交换体1(NHE1)的表达差异及其与恶性程度的关系,探讨星形细胞瘤增殖、生长的分子机制。方法:收集人星形细胞瘤标本51例,低、高级别星形细胞瘤组织分别为22例、29例,以肿瘤周围相对正常脑组织作... 目的:检测人星形细胞瘤和正常脑组织中钠氢交换体1(NHE1)的表达差异及其与恶性程度的关系,探讨星形细胞瘤增殖、生长的分子机制。方法:收集人星形细胞瘤标本51例,低、高级别星形细胞瘤组织分别为22例、29例,以肿瘤周围相对正常脑组织作为对照。用H-E染色进行诊断和分级,免疫组织化学和免疫印迹检测肿瘤组织与正常脑组织中NHE1表达变化。结果:NHE1主要分布在对照组神经元和少量星形胶质细胞胞膜上;在肿瘤组织中,NHE1分布在低级别星形细胞瘤细胞膜上,并强烈表达于高级别星形细胞瘤的胞质和胞膜上。与对照组相比较,在低级别和高级别星形细胞瘤组织中NHE1表达上调,其中,恶性程度较高的高级别肿瘤相对于恶性程度低的低级别肿瘤,NHE1的表达更为强烈。结论:NHE1在人星形细胞瘤组织中表达增强,其强度变化与肿瘤的恶性程度有关。 展开更多
关键词 钠氢交换体1 星形细胞瘤 恶性程度
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NHE1 siRNA对VEGF诱导HUVECs细胞迁移与Matrigel小管形成的影响 被引量:1
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作者 莫显刚 陈庆伟 +1 位作者 李兴升 蒋金 《激光杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期68-70,共3页
目的:本文探讨用小干扰RNA(siRNA)抑制钠氢交换体-1(NHE1)能否抑制血管内皮生长因子(VEGF)诱导的体外血管生成。方法:用阳离子脂质体方法将靶向抑制NHEl的小分子RNA(NHE1 siRNA)及阴性对照的寡核苷酸片段(NHE1 siNC)转染到人脐静脉内皮... 目的:本文探讨用小干扰RNA(siRNA)抑制钠氢交换体-1(NHE1)能否抑制血管内皮生长因子(VEGF)诱导的体外血管生成。方法:用阳离子脂质体方法将靶向抑制NHEl的小分子RNA(NHE1 siRNA)及阴性对照的寡核苷酸片段(NHE1 siNC)转染到人脐静脉内皮细胞(HUVECs),荧光显微照相检测转染效率,RT-PCT及Western blot检测转染48h后mRNA的蛋白及NHE1的表达水平,BCECF/AM法检测细胞内pH(phi)反映NHEl活性,进而转染后检测细胞总数及死亡细胞数量改变,Transwell法检测VEGF诱导HUVECs迁移能力及Matrigel小管形成的影响。结果:转染效率在95%以上。转染48h,NHE1 siRNA转染组与NHE1 siNC转染组比较,在mRNA及蛋白水平表达分别减低90.82%与74.42%(P<0.05,P<0.01),细胞内pH值降低(7.224±0.231vs 7.405±0.163;P<0.05)。NHE1 siRNA组细胞总数较NHEl siNC组少,而细胞死亡比例增加。相对NHE1 siNC,NHE1 siRNA抑制细胞迁移为33.14%及抑制Matrigel小管形成达29.47%。结论:抑制NHEl表达和活性可能抑制VEGF诱导血管生成,NHE1可能是控制各种病理的血管生成的潜在靶点。 展开更多
关键词 人脐静脉内皮细胞 钠氢交换体-1 小干扰RNA 血管内皮生长因子 血管生成
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大菱鲆水通道蛋白(AQP1、AQP3)以及离子通道蛋白(CFTR、NHE1)对低盐胁迫的响应 被引量:5
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作者 张金生 刘志峰 +2 位作者 马爱军 崔文晓 曲江波 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2020年第4期41-49,共9页
在鱼类适应环境盐度变化的过程中,鳃、肾、肠是主要的渗透调节器官,而水通道蛋白(Aquaporins, AQPs)、囊性纤维化跨膜传导调节因子(CFTR)、钠氢交换体(NHE)又是这些器官中重要的渗透调节基因。为研究AQP1、AQP3、CFTR、NHE1在大菱鲆(Sco... 在鱼类适应环境盐度变化的过程中,鳃、肾、肠是主要的渗透调节器官,而水通道蛋白(Aquaporins, AQPs)、囊性纤维化跨膜传导调节因子(CFTR)、钠氢交换体(NHE)又是这些器官中重要的渗透调节基因。为研究AQP1、AQP3、CFTR、NHE1在大菱鲆(Scophthalmusmaximus)低盐胁迫过程中的渗透调节功能,本研究采用荧光定量PCR技术,对4种基因在盐度5和盐度10下大菱鲆鳃、肾、肠中表达量随时间的变化进行检测。结果显示,AQP1表达量在鳃中极少(P<0.05),在肾和肠中较高,低盐胁迫下,盐度5组和盐度10组在鳃中的表达量无显著变化,在肾和肠中均显著上升(P<0.05)。AQP3表达量在肾中极少(P<0.05),在鳃中较高,在肠中较少,低盐胁迫下,盐度5组和盐度10组在肾中的表达量无显著变化,在鳃和肠中均显著上升(P<0.05)。CFTR表达量在肾中极少,在鳃中较高,在肠中较少,低盐胁迫下,盐度5组和盐度10组在肾中的表达量无显著变化,在鳃和肠中均显著下降(P<0.05)。NHE1在鳃和肠中表达量较少,在肾中较高,低盐胁迫下,盐度5组和盐度10组在鳃中的表达量无显著变化,在肾和肠中均显著上升(P<0.05)。这些结果表明,4种基因表达水平因组织、盐度和时间的不同而不同,反映了这4种基因的功能特异性;在低盐胁迫下,4种基因积极响应,表达量均发生不同程度的变化,表明AQP1、AQP3、CFTR和NHE1在大菱鲆低盐环境适应中可能具有潜在的重要作用。另外,本研究结果可为大菱鲆半咸水养殖和淡化养殖提供理论依据,同时为培育适应低盐环境大菱鲆良种提供理论和技术支撑。 展开更多
关键词 大菱鲆 低盐胁迫 水通道蛋白 囊性纤维化跨膜传导调节因子 钠氢交换体 荧光定量PCR
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基于AQP8、NHE3、CFTR探究参苓白术散对腹泻幼鼠模型肠黏膜的保护作用及机制
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作者 王彦彬 王晓颖 +3 位作者 徐国娟 戚敏敏 梁翠才 马玮玮 《当代医药论丛》 2023年第8期101-104,共4页
目的:基于水通道蛋白8(AQP8)、跨膜转运蛋白钠氢交换体3(NHE3)和囊性纤维化跨膜传导调节因子(CFTR)探究参苓白术散对腹泻幼鼠模型肠黏膜的保护作用及机制。方法:购置雄性SD幼鼠50只,随机取10只设为正常组。其余40只SD幼鼠于每日上午予... 目的:基于水通道蛋白8(AQP8)、跨膜转运蛋白钠氢交换体3(NHE3)和囊性纤维化跨膜传导调节因子(CFTR)探究参苓白术散对腹泻幼鼠模型肠黏膜的保护作用及机制。方法:购置雄性SD幼鼠50只,随机取10只设为正常组。其余40只SD幼鼠于每日上午予番泻叶药液灌胃,连续干预14 d,建立幼鼠腹泻模型;建模成功后分为模型组、参苓白术散低、中、高剂量组,每组10只。为参苓白术散低、中、高剂量组使用参苓白术散药液灌胃,给药体积均为10 mL/kg;低剂量组的给药剂量为1.2 g/kg,中剂量组的给药剂量为2.3 g/kg;高剂量组的给药剂量为4.6 g/kg。正常组、模型组予等量蒸馏水灌胃。各组均连续灌胃14 d,然后比较其一般情况、结肠黏膜形态学变化及结肠黏膜AQP8、NHE3、CFTR的表达情况。结果:与正常组比较,模型组幼鼠行动迟缓,精神萎靡不振,毛发稀疏,伴有毛发脱落,肛门红肿、周围体毛有少量稀便沾染。与模型组相比,参苓白术散低、中、高组幼鼠的行动灵活性、精神状态、毛发光泽度等情况均得到不同程度的改善。与正常组比较,模型组幼鼠的结肠黏膜表皮细胞坏死明显,且其结肠黏膜伴有毛细血管的扩张,存在少许中性粒细胞的浸润。与模型组比较,参苓白术散各剂量组幼鼠的结肠黏膜表皮细胞凋亡坏死、固有层毛细血管扩张充血和中性粒细胞浸润现象明显改善。与正常组比较,模型组幼鼠结肠黏膜AQP8、NHE3的表达下降,CFTR的表达升高。与模型组比较,参苓白术散各剂量组幼鼠结肠黏膜AQP8、NHE3的表达明显升高,而CFTR的表达明显下降。结论:参苓白术散可通过调节幼鼠肠黏膜AQP8、NHE3、CFTR的表达水平来促进其体内的水液代谢,并能减轻结肠黏膜受损,起到止泻的作用。 展开更多
关键词 参苓白术散 水通道蛋白8 跨膜转运蛋白钠氢交换体3 囊性纤维化跨膜传导调节因子 腹泻模型
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