钙调神经磷酸酶介导碱性成纤维细胞生长因子诱导的大鼠心肌细胞肥大 被引量：8

1

作者 符民桂 许松 +2 位作者 庞永正 刘乃奎 唐朝枢 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期38-41,共4页

目的 :观察钙调神经磷酸酶 (calcineurin ,CaN)在碱性成纤维细胞生长因子 (basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)诱导心肌细胞肥大中的作用。方法 :在原代培养的大鼠心肌细胞上 ,应用双波长荧光光度计检测心肌细胞游离Ca2 +浓度 ;应用对... 目的 :观察钙调神经磷酸酶 (calcineurin ,CaN)在碱性成纤维细胞生长因子 (basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)诱导心肌细胞肥大中的作用。方法 :在原代培养的大鼠心肌细胞上 ,应用双波长荧光光度计检测心肌细胞游离Ca2 +浓度 ;应用对硝基苯磷酸 (p nitrophenylphosphate,PNPP)作底物测定CaN活性 ;根据3H 亮氨酸参入水平评估各种信号通路阻断剂对bFGF刺激的心肌细胞蛋白质合成速率的影响。结果 :bFGF刺激心肌细胞 2 4h后 ,胞内游离Ca2 +浓度较对照组增高 2 72 % (P <0 .0 1) ;同时 ,bFGF刺激的心肌细胞CaN活性较对照组增高 173 %(P <0 .0 1)。bFGF( 6 0 μg·L-1)刺激的心肌细胞3H 亮氨酸参入较对照组增高 10 6 % (P <0 .0 1) ;CsA( 0 .1～ 10 μmol·L-1)可以浓度依赖的方式抑制bFGF刺激的心肌细胞3H 亮氨酸参入。此外H7(PKC抑制剂 )和 5 0 μmol·L-1PD980 59(MAPK抑制剂 )亦可完全阻断bFGF刺激的心肌细胞3H 亮氨酸参入。结论 :Ca2 +/CaN信号通路参与bFGF诱导心肌细胞肥大的信息传递。另外 。 展开更多

关键词 碱性成纤维细胞生长因子 心肌细胞肥大 信号传递 钙调神经磷酸酶

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钙调神经磷酸酶1基因亚型4的调节器在肝细胞癌中表达下调并通过抑制NFAT1核转位而阻止癌细胞增殖、迁移和侵袭活性以及原位瘤的转移 被引量：2

2

作者 周腾飞 《临床肝胆病杂志》 CAS 2017年第11期2229-2229,共1页

【据《Gastroenterology》2017年9月报道】题：钙调神经磷酸酶1基因亚型4的调节器在肝细胞癌中表达下调并通过抑制NFAT1核转位而阻止癌细胞增殖、迁移和侵袭活性以及原位瘤的转移（作者Jin HJ等）

关键词 钙调神经磷酸酶 癌细胞增殖 表达下调 肝细胞癌 基因亚型 核转位 调节器 转移

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钙调神经磷酸酶-T细胞核因子信号通路在应力诱导成肌细胞凋亡中的作用 被引量：2

3

作者 丁弦 夏晨蕾 +8 位作者 贺苗 孙文娜 王芳 姜文心 张彩霞 王爽玉 张强 姚如永 袁晓 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期456-461,共6页

目的探讨钙调神经磷酸酶(CaN)-T细胞核因子(NFAT)信号通路在应力介导的成肌细胞凋亡中的作用。方法构建成肌细胞体外培养—力学刺激模型,利用多通道应力加载系统对细胞加载不同时间的周期性张应力,加入CaN的特异性抑制剂环孢素(CsA)作... 目的探讨钙调神经磷酸酶(CaN)-T细胞核因子(NFAT)信号通路在应力介导的成肌细胞凋亡中的作用。方法构建成肌细胞体外培养—力学刺激模型,利用多通道应力加载系统对细胞加载不同时间的周期性张应力,加入CaN的特异性抑制剂环孢素(CsA)作为对比。采用Hoechst 33258染色法和流式细胞术检测成肌细胞凋亡情况,实时聚合酶链式反应检测CaN和NFAT mRNA的表达情况,蛋白质印迹法检测NFAT3的蛋白含量。结果随加力时间的延长,细胞凋亡逐渐增加,CaN亚基CnA、CnB及NFAT3的mRNA表达及NFAT3蛋白含量逐渐升高;加入CsA后,细胞凋亡减少,CnA、NFAT3的mRNA表达及NFAT3的蛋白含量明显减少。结论周期性张应力可以诱导成肌细胞发生凋亡;CaN-NFAT信号通路可能参与了周期性张应力诱导的成肌细胞凋亡。 展开更多

关键词 成肌细胞 细胞凋亡 钙调神经磷酸酶 T细胞核因子 周期性张应力

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血小板活化因子和钙调神经磷酸酶与脊髓损伤临床转归的观察 被引量：1

4

作者 项菁 刘君 黄拥军 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2010年第19期3537-3539,共3页

目的:研究脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)患者血小板活化因子(platelet activating factor,PAF)和钙调神经磷酸酶(calcineurin,CaN)水平变化及其与疾病转归的相关性。方法:ELISA法检测46例SCI患者急性期和治疗3个月后的血清PAF和CaN... 目的:研究脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)患者血小板活化因子(platelet activating factor,PAF)和钙调神经磷酸酶(calcineurin,CaN)水平变化及其与疾病转归的相关性。方法:ELISA法检测46例SCI患者急性期和治疗3个月后的血清PAF和CaN水平,采用美国脊髓损伤学会运动感觉评分标准(ASIA)和国内标准对所有患者进行运动和感觉评分,PAF和CaN水平分别与患者的评分进行相关分析。结果:治疗后患者PAF水平[(66.4±12.3)pg/mL]比治疗前[(190.5±43.5)pg/mL]明显下降(P<0.01);治疗后CaN水平[(36.6±3.9)ng/mL]较治疗前[(9.3±1.5)ng/mL]明显升高(P<0.01);治疗前后患者血清PAF值与运动评分、感觉评分均呈负相关(P<0.05);治疗前后患者血清CaN值与运动评分、感觉评分均呈正相关(P<0.05)。结论:PAF和CaN可作为SCI后的损伤标志物和脊髓功能恢复的监测指标。 展开更多

关键词 血小板活化因子 钙调神经磷酸酶 脊髓损伤

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血管紧张素受体1型-钙调神经磷酸酶信号通路对肥大乳鼠心房肌细胞瞬时外向钾电流离子通道重构的调控作用 被引量：3

5

作者 夏桂玲 胥亚楠 +5 位作者 杨龙 李隽 何炯红 邓娜 田龙海 田银 《中国循环杂志》 CSCD 北大核心 2016年第4期398-402,共5页

目的:探讨血管紧张素受体1型(AT1)-钙调神经磷酸酶(Calcineurin;Ca N)信号通路对肥大乳鼠心房肌细胞瞬时外向钾电流(Ito)离子通道重构的调控作用。方法:分离1天龄乳大鼠心房肌细胞,培养24 h分组:①对照组:不予牵张刺激;②牵张组:牵张增... 目的:探讨血管紧张素受体1型(AT1)-钙调神经磷酸酶(Calcineurin;Ca N)信号通路对肥大乳鼠心房肌细胞瞬时外向钾电流(Ito)离子通道重构的调控作用。方法:分离1天龄乳大鼠心房肌细胞,培养24 h分组:①对照组:不予牵张刺激;②牵张组:牵张增加12%硅胶模面积,培养24 h;③替米沙坦组:替米沙坦1μmol/L干预1 h,继之牵张24 h;④环孢素A(Cs A)组:Cs A 0.25μg/ml干预1 h,继之牵张24 h。定量分析牵张组与对照组细胞蛋白/DNA比值、心房钠尿肽(ANP)m RNA表达鉴定细胞肥大。全细胞膜片钳技术检测细胞Ito的变化。蛋白免疫印迹法检测Ito离子通道α亚单位Kv4.3和Ca NA亚基的蛋白表达。结果:牵张组较对照组,Ito电流密度显著降低;Kv4.3蛋白表达下调、促进Ca NA蛋白表达;与牵张组比较,替米沙坦组和CSA组明显抑制牵张刺激上述反应。结论:AT_1-Ca N信号通路参与调控肥大乳鼠心房肌细Ito离子通道重构。 展开更多

关键词 受体 血管紧张素 1型 离子通道 信号转导 钙调神经磷酸酶

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钙调神经磷酸酶在弗氏佐剂致大鼠炎性痛中的作用 被引量：2

6

作者 王爱桃 姚尚龙 +2 位作者 杜晓冰 王丹 董海云 《临床麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期377-381,共5页

目的探讨钙调神经磷酸酶(calcineurin,CaN)在弗氏佐剂致大鼠炎性痛痛觉过敏中的作用。方法选择雄性SD大鼠75只,体重200~300g,将其随机均分为对照组(C组)、完全弗氏佐剂(CFA)组(F组)和CaN+CFA组(NF组)。C组大鼠右侧后爪趾底注射生理盐水... 目的探讨钙调神经磷酸酶(calcineurin,CaN)在弗氏佐剂致大鼠炎性痛痛觉过敏中的作用。方法选择雄性SD大鼠75只,体重200~300g,将其随机均分为对照组(C组)、完全弗氏佐剂(CFA)组(F组)和CaN+CFA组(NF组)。C组大鼠右侧后爪趾底注射生理盐水100μl,F组和NF组大鼠右侧后爪趾底注射CFA 100μl制备炎性痛模型,NF组大鼠于右侧后爪趾底注射CFA前1d鞘内注射CaN 10 U。三组大鼠于右侧后爪趾底注射前30 min(T0)、注射后0.5h(T_1)、1h(T_2)、2h(T_3)及4h(T_4)测定大鼠热刺激缩足潜伏期(PWTL);同时各取5只大鼠脊髓组织,Western blot法测定各组大鼠脊髓中CaN、核因子κB(NF-κB)p65蛋白含量;RT-PCR法测定大鼠脊髓中CaN及NF-κB基因的表达。ELISA法测定大鼠脊髓组织中IL-1β、TNF-α和IL-10浓度。结果T_2~T_4时F组,T_3、T_4时NF组PWTL明显短于T0时和C组(P<0.05);T_2~T_4时NF组PWTL明显长于F组(P<0.05)。T_1~T_4时F组,T_2~T_4时NF组脊髓组织CaN蛋白含量明显低于,NF-κB p65蛋白明显高于T0时和C组(P<0.05);T_2~T_4时F组、NF组脊髓组织CaN基因表达、IL-10浓度明显低于,NF-κB基因表达及IL-1β、TNF-α浓度明显高于T0时和C组(P<0.05);T_1~T_4时NF组脊髓组织CaN蛋白含量和基因表达明显高于,NF-κB p65蛋白含量和基因表达及IL-1β、TNF-α明显低于,IL-10浓度明显高于F组(P<0.05)。结论 CaN通过抑制NF-κB,调节抗炎细胞因子和促炎细胞因子的平衡,抑制大鼠炎性痛的发生发展。 展开更多

关键词 钙调神经磷酸酶 核因子ΚB IL-10 炎性痛

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钙调神经磷酸酶B亚基高表达条件及产业化研究

7

作者 靳风智 石太平 +1 位作者 王小萌 魏群 《北京师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期255-259,共5页

重组人CNB高表达大肠杆菌已由本室构建成功 ,摇瓶发酵液表达量可达 10 0mg·L- 1.通过改进培养基配方及摇瓶表达工艺 ,使CNB在摇瓶发酵液中表达量达到 5 0 0mg·L- 1以上 .在高表达量的基础上 ,又进行了产业化改进 ,以蒸馏水添... 重组人CNB高表达大肠杆菌已由本室构建成功 ,摇瓶发酵液表达量可达 10 0mg·L- 1.通过改进培养基配方及摇瓶表达工艺 ,使CNB在摇瓶发酵液中表达量达到 5 0 0mg·L- 1以上 .在高表达量的基础上 ,又进行了产业化改进 ,以蒸馏水添加无机盐取代了原配方中的自来水 ,并提高了表达量 . 展开更多

关键词 钙调神经磷酸酶 调节亚基B 表达 基因工程 产业化

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活化的T细胞核内因子(NFAT)的调节及其在神经系统中的功能 被引量：1

8

作者 孙越 赵艳娥 骆静 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期623-629,共7页

活化的T细胞核内因子(nuclear factor of activated T-cells,NFAT)作为细胞信号转导通路中的一类重要的转录因子参与细胞功能的调节.NFAT的活化主要是通过细胞内钙/钙调神经磷酸酶(Ca2+/calcineurin)的刺激启动,它脱磷酸后发生核转位并... 活化的T细胞核内因子(nuclear factor of activated T-cells,NFAT)作为细胞信号转导通路中的一类重要的转录因子参与细胞功能的调节.NFAT的活化主要是通过细胞内钙/钙调神经磷酸酶(Ca2+/calcineurin)的刺激启动,它脱磷酸后发生核转位并与DNA的特定序列结合,同时通过与其它转录因子的协同作用,调节目的基因的特定表达.NFAT在免疫系统中所调节的基因表达已经得到了充分的研究.近年实验研究发现,NFAT的转录因子家族在脊椎动物的神经系统中也发挥着非常重要的作用.本文综述了NFAT家族蛋白的分类、结构、磷酸酶与激酶对其出入核的调节及在神经系统中的研究进展,使得能够更加全面地认识calcineurin/NFAT信号通路的作用.此外,由于环孢菌素A(cyclosporin A)等药物在神经系统应用的局限性,对于NFAT调节深入研究,也将为筛选或者开发更为高效、低毒药物提供新的思路. 展开更多

关键词 活化的T细胞核内因子(NFAT) 钙调神经磷酸酶 核转位 神经系统 环孢菌素A

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偏侧咀嚼对大鼠咬肌的影响及IGF-1调节机制探究

9

作者 刘思琦 李颖辉 +2 位作者 刘子洋 王雯 马文盛 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2019年第11期1094-1099,共6页

目的:探究偏侧咀嚼对大鼠深层咬肌结构的影响以及胰岛素样生长因子-1(insulin like growth factor-1,IGF-1)在其中的作用。方法:4周龄雄性Wistar大鼠24只随机分为实验组和对照组,实验组应用单侧戴用咬合板的方法建立偏侧咀嚼模型,建模后... 目的:探究偏侧咀嚼对大鼠深层咬肌结构的影响以及胰岛素样生长因子-1(insulin like growth factor-1,IGF-1)在其中的作用。方法:4周龄雄性Wistar大鼠24只随机分为实验组和对照组,实验组应用单侧戴用咬合板的方法建立偏侧咀嚼模型,建模后1、2、3、4周处死;取深层咬肌,通过冰冻切片苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色、三磷酸腺苷酶(adenosine triphosphatase,ATPase)染色、辅酶Ⅰ-四氮唑还原酶(nicotinamide adenine dinucleotide,NADH-TR)染色观察深层咬肌结构变化,实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,Real-time PCR)检测IGF-1及钙调神经磷酸酶(calcineurin,CaN)mRNA表达变化,酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测IGF-1蛋白水平变化,Western blot检测CaN蛋白水平变化。结果:与同期对照组比较,建模2、3、4周时非偏侧咀嚼侧MHCⅡa型肌纤维比例增多,并高于偏侧咀嚼侧(P<0.05);且IGF-1和CaN的蛋白及mRNA水平在3、4周时高于偏侧咀嚼侧及对照组(P<0.05)。结论:长期偏侧咀嚼促使非偏侧咀嚼侧咬肌纤维类型由MHCⅡb型向MHCⅡa型转换,这可能与IGF-1及CaN的分泌增多有关。 展开更多

关键词 偏侧咀嚼 咬肌 胰岛素样生长因子-1 钙调神经磷酸酶

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AT_1R-CaN信号通路在乳鼠肥大心室肌细胞Nav1.5蛋白表达调控中的作用 被引量：9

10

作者 邓娜 夏桂玲 +4 位作者 杨龙 何炯红 李隽 田银 杨英 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期221-226,共6页

目的:探讨血管紧张素Ⅱ1型受体(AT_1R)调神经磷酸酶(CaN)信号通路在乳鼠肥大心室肌细胞Nav1.5 mRNA和蛋白表达调控中的作用。方法:分离1日龄SD乳大鼠心室获心室肌细胞,分为对照(control)组、苯肾上腺素(PE)组、氯沙坦(Los)+PE组和环孢素... 目的:探讨血管紧张素Ⅱ1型受体(AT_1R)调神经磷酸酶(CaN)信号通路在乳鼠肥大心室肌细胞Nav1.5 mRNA和蛋白表达调控中的作用。方法:分离1日龄SD乳大鼠心室获心室肌细胞,分为对照(control)组、苯肾上腺素(PE)组、氯沙坦(Los)+PE组和环孢素A(CsA)+PE组;重组腺病毒shRNA干扰载体介导CaN A亚基β亚型(CnAβ)基因沉默分为腺病毒空载体(Ad-Null)组、Ad-Null+PE组、重组腺病毒CnAβshRNA1(AdCnAβshRNA1)组和Ad-CnAβshRNA1+PE组。实时荧光定量逆转录PCR检测脑钠尿肽(BNP)、β-肌球蛋白重链(β-MHC)和Nav1.5的mRNA表达。Western blot法检测全细胞提取蛋白CnAβ和Nav1.5的表达。结果:PE干预24 h明显增加心室肌细胞蛋白/DNA比值、细胞BNP和β-MHC的mRNA表达以及细胞面积;上调CnAβ蛋白表达,下调Nav1.5蛋白表达。CsA和Los干预明显抑制PE干预的上述效应。PE下调Nav1.5的mRNA表达,但Los和CsA不能抑制此种效应。Ad-CnAβshRNA1沉默乳鼠心室肌细胞CnAβ基因抑制了PE对BNP mRNA的上调作用,抑制了PE对Nav1.5蛋白表达的下调作用。结论:AT_1R-CaN信号通路参与调控培养的乳鼠肥大心室肌细胞Nav1.5蛋白表达的调控。 展开更多

关键词 心肌肥大 室性心律失常 钠离子通道 血管紧张素Ⅱ1型受体 钙调神经磷酸酶

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miR-494-3p靶向调控RCAN1对高糖诱导的足细胞损伤的影响 被引量：1

11

作者 郭晓莉 杜燕 +1 位作者 李莎莎 袁二磊 《中国医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第8期711-717,共7页

目的 探讨miR-494-3p对高糖(HG)诱导的小鼠肾足细胞(MPC5)损伤的影响及其对钙调磷酸酶调节蛋白1 (RCAN1)的调控作用。方法 HG诱导MPC5细胞建立细胞损伤模型,随机分为NC组、HG组、HG+anti-miR-NC组、HG+anti-miR-494-3p组、HG+pcDNA组、H... 目的 探讨miR-494-3p对高糖(HG)诱导的小鼠肾足细胞(MPC5)损伤的影响及其对钙调磷酸酶调节蛋白1 (RCAN1)的调控作用。方法 HG诱导MPC5细胞建立细胞损伤模型,随机分为NC组、HG组、HG+anti-miR-NC组、HG+anti-miR-494-3p组、HG+pcDNA组、HG+RCAN1组、HG+anti-miR-494-3p+si-NC组、HG+anti-miR-494-3p+si-RCAN1组。采用实时PCR (qRT-PCR)检测miR-494-3p、RCAN1 mRNA表达量;流式细胞术检测细胞凋亡;ELISA法检测白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子-α (TNF-α)水平;双荧光素酶报告实验检测miR-494-3p mimic对Wt-RCAN1荧光素酶活性的影响;Western blotting检测RCAN1蛋白表达量。结果与NC组比较,HG组miR-494-3p表达量升高,凋亡率、IL-1β、TNF-α水平升高,RCAN1 mRNA及蛋白水平降低(P <0.05);与HG+anti-miR-NC组比较,HG+anti-miR-494-3p组凋亡率、IL-1β、TNF-α水平降低(P <0.05);miR-494-3p mimic可降低Wt-RCAN1荧光素酶活性(P <0.05);与HG+pcDNA组比较,HG+RCAN1组凋亡率、IL-1β、TNF-α水平降低(P <0.05);与HG+anti-mi R-NC+si-NC组比较,HG+anti-miR-494-3p+si-RCAN1组凋亡率、IL-1β、TNF-α水平升高(P <0.05)。结论 沉默miR-494-3p可通过促进RCAN1表达抑制MPC5细胞凋亡、炎症反应,从而减轻HG诱导的MPC5细胞损伤。 展开更多

关键词 miR-494-3p 钙调磷酸酶调节蛋白1 足细胞 炎症 细胞凋亡

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钙离子/钙调蛋白依赖性蛋白激酶ⅡδRNA干扰对下游基因表达及破骨细胞分化的影响 被引量：8

12

作者 刘娟娟 董伟 +3 位作者 戚孟春 冯晓洁 李任 孙红 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期22-27,共6页

目的研究钙离子/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱδ(Ca2+/Calmodulin dependent kinaseⅡδ,Ca MKⅡδ)RNA干扰对下游基因表达及破骨细胞分化的影响,以证实其在破骨细胞分化中的作用。方法应用慢病毒构建Ca MKⅡδRNA干扰载体,并确定最佳感染... 目的研究钙离子/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱδ(Ca2+/Calmodulin dependent kinaseⅡδ,Ca MKⅡδ)RNA干扰对下游基因表达及破骨细胞分化的影响,以证实其在破骨细胞分化中的作用。方法应用慢病毒构建Ca MKⅡδRNA干扰载体,并确定最佳感染复数(multiplicity of infection,MOI)值及转染效率。小鼠RAW264.7细胞分为对照组、空白载体组和干扰组。转染5 d后收获细胞,确定干扰效率;并检测RNA干扰对活化T细胞核因子蛋白c1(NFATc1)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)、非受体酪氨酸激酶(c-Src)基因表达及破骨细胞分化的影响。结果成功构建了Ca MKⅡδRNA干扰载体,最佳转染MOI值为30,转染效率可达78%(P<0.05)。重组病毒对Ca MKⅡδ的干扰效率在mRNA水平超过78%,在蛋白水平超过70%(P<0.01)。Ca MKⅡδRNA干扰显著降低NFATc1、TRAP和c-Src基因,与对照组、空白载体组比较,其mRNA水平下降分别超过了47.8%、43.3%和48.5%(P<0.05,P<0.01),蛋白相对水平分别超过了61.1%、48.2%和39.6%%(P<0.01);免疫荧光细胞化学检测也得到相似结果。Ca MKⅡδRNA干扰也显著降低了破骨细胞生成及骨吸收功能;与其他两组比较,干扰组破骨细胞数、牙本质吸收陷窝数目和面积下降分别超过了49.8%、47.6%和61.3%(P<0.01)。结论 Ca MKⅡδRNA干扰可显著下调其下游NFATc1、TRAP、c-Src基因表达并抑制破骨细胞分化;Ca MKⅡδ在破骨细胞分化中可能发挥关键调控作用。 展开更多

关键词 破骨细胞 钙离子/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱδ RNA干扰 活化T细胞核因子蛋白c1 抗酒石酸酸性磷酸酶 非受体酪氨酸激酶

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CREB和ERK1/2在CaMKⅡδ调控破骨细胞分化中的作用 被引量：2

13

作者 王红美 董伟 +4 位作者 戚孟春 冯晓洁 陆大壮 李任 孙红 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期91-95,共5页

目的探索c AMP反应原件结合蛋白(CREB)、细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)在钙调蛋白依赖性激酶Ⅱ(Ca MKⅡ)δ调控破骨细胞分化中的作用及分子机制。方法构建Ca MKⅡδR NA干扰载体并转染小鼠R AW264.7细胞,确定其干扰效率。病毒转染细胞... 目的探索c AMP反应原件结合蛋白(CREB)、细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)在钙调蛋白依赖性激酶Ⅱ(Ca MKⅡ)δ调控破骨细胞分化中的作用及分子机制。方法构建Ca MKⅡδR NA干扰载体并转染小鼠R AW264.7细胞,确定其干扰效率。病毒转染细胞后,用50ng/ml核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)诱导,于不同时间点检测CREB、ERK1/2蛋白磷酸化水平。应用ERK1/2信号阻断剂PD98059处理细胞,检测ERK1/2信号阻断对活化T细胞核因子c1(NFATc1)基因表达及破骨细胞分化的影响。结果 Ca MKⅡδ干扰载体在m RNA和蛋白水平的干扰效率分别为77.2%和70.2%。Ca MKⅡδ干扰可明显降低CREB、ERK1/2蛋白磷酸化水平,下调幅度分别为21%~55%和55%~64%。此外,ERK1/2信号阻断明显下调了NFATc1蛋白表达,使破骨细胞数目、骨吸收陷窝数目及面积分别下降了39.3%、50.0%和52.3%。结论 Ca MKⅡδRNA干扰可明显抑制CREB和ERK1/2蛋白磷酸化;CREB和ERK1/2参与了Ca MKⅡδ对破骨细胞分化的调控。 展开更多

关键词 破骨细胞 钙调蛋白依赖性激酶Ⅱδ RNA干扰 cAMP反应原件结合蛋白 细胞外信号调节激酶1/2 活化T细胞核因子c1

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RCAN1及CnA在下肢闭塞性动脉硬化支架术后再狭窄组织中的表达及意义 被引量：13

14

作者 谢锐 冯洋洋 +1 位作者 温跃桃 任为 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期298-304,共7页

目的·观察钙调神经磷酸酶调节因子1(RCAN1)、钙调神经磷酸酶A(Cn A)在下肢闭塞性动脉硬化介入术后支架内再狭窄组织中的表达,探讨其与支架内再狭窄的相关性。方法·收集2013年9月至2016年6月重庆医科大学附属第一医院血管外科... 目的·观察钙调神经磷酸酶调节因子1(RCAN1)、钙调神经磷酸酶A(Cn A)在下肢闭塞性动脉硬化介入术后支架内再狭窄组织中的表达,探讨其与支架内再狭窄的相关性。方法·收集2013年9月至2016年6月重庆医科大学附属第一医院血管外科中心下肢闭塞性动脉硬化股浅动脉支架内再狭窄血管标本15例,取支架狭窄段、支架近端、支架远端血管组织,采用H-E及Masson染色观察组织形态学变化;Western blotting检测RCAN1、Cn A、增殖细胞核抗原(PCNA)的表达;免疫组化及免疫荧光检测RCAN1、Cn A蛋白的表达及分布;免疫共沉淀检测RCAN1蛋白和Cn A蛋白的相互作用。结果·RCAN1在支架远端组织的表达水平显著高于在支架近端组织和支架狭窄段组织的表达水平(P<0.05),RCAN1在支架近端组织的表达水平显著高于在支架狭窄段组织的表达水平(P<0.05);Cn A和PCNA在支架狭窄段组织的表达水平显著高于在支架近端组织、支架远端组织的表达水平(P<0.05);免疫组化及免疫荧光染色结果显示RCAN1和Cn A主要在血管平滑肌细胞质中表达;免疫共沉淀结果显示RCAN1与Cn A在血管组织中存在相互作用。结论·RCAN1的低水平表达与Cn A的表达水平增高可能与支架内再狭窄发生有关。 展开更多

关键词 闭塞性动脉硬化 支架内再狭窄 钙调神经磷酸酶调节因子1 钙调神经磷酸酶A

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人参皂苷Rg_1治疗性给药的抗心肌肥厚作用 被引量：8

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作者 邓江 黄燮南 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2008年第3期271-275,共5页

目的:观察人参皂苷Rg1治疗性给药对缩窄腹主动脉所致大鼠左心室肥厚的影响。方法:SD大鼠随机分为假手术组、模型组、Rg1(3.75,15mg/kg)组以及左旋精氨酸(L-arg)200mg/kg组。后4组用腹主动脉缩窄术(AAC)造模,手术3周后腹腔注射给药共4周... 目的:观察人参皂苷Rg1治疗性给药对缩窄腹主动脉所致大鼠左心室肥厚的影响。方法:SD大鼠随机分为假手术组、模型组、Rg1(3.75,15mg/kg)组以及左旋精氨酸(L-arg)200mg/kg组。后4组用腹主动脉缩窄术(AAC)造模,手术3周后腹腔注射给药共4周。给药末监测大鼠血流动力学,称心脏质量以计算左室肥厚指标(即左室肥厚指数,LVHI=左室重/体重)和左室重/右室重(LVW/RVW),用实时荧光定量PCR(Real-TimePCR)法检测心房利钠因子(ANF)和钙调神经磷酸酶(CaN)mRNA的表达。结果:与假手术组比较,模型组的血压、左室内收缩压、左室舒张期末压、LVHI和LVW/RVW均显著升高,±dp/dtmax降低,ANF和CaN mRNA表达明显上调。Rg1和L-arg给药不影响血压及左室内收缩压,但显著降低左心室舒张期末压(LVEDP)而增加±dp/dtmax,并使LVHI和LVW/RVW减低,ANF和CaN mRNA表达下调。结论:Rg1具有抗压力超负荷所致左心室肥厚作用,并可能与其抑制CaN信息通路有关。 展开更多

关键词 人参皂苷RG1 左心室肥厚 腹主动脉缩窄 钙调神经磷酸酶 大鼠

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白芍提取物对PMS肝气郁证大鼠下丘脑Cav1.2介导的CaM/CaMK Ⅱ/BDNF信号通路的影响 被引量：9

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作者 宋春红 王杰琼 +5 位作者 李芳 李自发 魏盛 王美艳 薛玲 姜运良 《世界科学技术-中医药现代化》 2016年第10期1794-1800,共7页

目的:本文主要探讨白芍提取物对PMS肝气郁证大鼠下丘脑Cav1.2钙通道关键蛋白CACNA1C及其下游信号通路中CaM、BDNF蛋白表达和对CaMKⅡ磷酸化的影响,从而明确白芍提取物治疗肝气郁结证的分子作用靶点。方法:利用慢性束缚应激法制备PMS肝... 目的:本文主要探讨白芍提取物对PMS肝气郁证大鼠下丘脑Cav1.2钙通道关键蛋白CACNA1C及其下游信号通路中CaM、BDNF蛋白表达和对CaMKⅡ磷酸化的影响,从而明确白芍提取物治疗肝气郁结证的分子作用靶点。方法:利用慢性束缚应激法制备PMS肝气郁证大鼠模型,使用白芍提取物进行药物干预。模型制备成功后检测下丘脑CACNA1C蛋白表达,以及下游信号通路中CaM、BDNF蛋白表达和CaMKⅡ的磷酸化水平。离体培养海马原代神经元,通过KCl激活L型钙通道,检测白芍提取物中的有效成分单体芍药苷对细胞内钙超载的影响。结果:PMS肝气郁证大鼠下丘脑CACNA1C蛋白表达增加,CaMKⅡ磷酸化水平提高,BDNF表达减少,说明白芍提取物可显著改善上述蛋白表达异常的现象,抑制KCl激活的L型钙通道引起的细胞内钙离子浓度的增加。结论:白芍提取物可能是通过调控细胞内Cav1.2,抑制其下游CaM/CaMKⅡ信号通路的活化发挥治疗PMS肝气郁证的作用。 展开更多

关键词 PMS肝气郁证 白芍提取物 L型钙通道α1C亚基基因 钙调蛋白依赖的蛋白激酶Ⅱ 脑源性神经营养因子

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环孢酶素A对缺氧大鼠右心室心肌CaN活性及血浆NO、一氧化氮合酶、内皮素-1水平的影响 被引量：3

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作者 谭建新 刘郴州 +2 位作者 揭育丽 王优 黄宇戈 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2004年第6期656-658,共3页

目的通过研究钙调神经磷酸酶(CaN)抑制剂对缺氧大鼠右心室心肌CaN活性及血浆一氧化氮合酶(iNOS)、NO、内皮素-1(ET-1)水平的影响,探讨CaN在慢性缺氧性右心室心肌肥厚中的作用。方法将大鼠置于氧浓度为(10.0±0.5)%的大型玻璃舱中,每... 目的通过研究钙调神经磷酸酶(CaN)抑制剂对缺氧大鼠右心室心肌CaN活性及血浆一氧化氮合酶(iNOS)、NO、内皮素-1(ET-1)水平的影响,探讨CaN在慢性缺氧性右心室心肌肥厚中的作用。方法将大鼠置于氧浓度为(10.0±0.5)%的大型玻璃舱中,每天24 h缺氧,持续7 d,建立大鼠慢性缺氧模型。实验大鼠分3组,即正常组、缺氧组、环孢酶素(CsA)处理组,每组各8只。缺氧组持续缺氧14 d,处理组在缺氧的同时腹腔内注射CsA(20 mg/kg·d)。第14天处死大鼠,取血,测NO、ET-1、iNOS水平,分离心脏称质量,并留右心室测CaN活性水平。结果(1)缺氧组右室与左室加室间隔的质量比、右室质量/体质量均明显高于正常组和CsA处理组(P<0.01)。(2)缺氧组右心室心肌CaN活性明显高于正常组(P<0.01),而CsA处理组则明显低于缺氧组(P<0.01)。(3)缺氧组血浆NO、iNOS水平明显低于正常组(P<0.01),ET-1水平则明显高于正常组(P<0.01);而CsA处理后血浆NO、iNOS水平明显高于缺氧组(P<0.01),ET-1水平则明显低于缺氧组(P<0.01),与正常组之间差别无统计学意义(P>0.05)。结论CaN抑制剂CsA对心肌肥厚的抑制作用可能与抑制CaN活性,调节血NO、iNOS和ET-1水平,改善肺动脉压力等有关。 展开更多

关键词 缺氧 心肌肥厚 钙调神经磷酸酶 一氧化氮合酶 一氧化氮 内皮素-1 环孢酶素A

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淫羊藿苷联合地塞米松对阿霉素诱导足细胞损伤的保护作用

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作者 白俊嫄 戴恩来 +1 位作者 蒲晓薇 张云霞 《世界中医药》 北大核心 2025年第9期1506-1512,1519,共8页

目的:探讨淫羊藿苷联合地塞米松对阿霉素诱导足细胞损伤的保护作用,及对无翅型MMTV整合位点家族成员1(Wnt1)、β-连环蛋白(β-catenin)、瞬时受体电位阳离子通道6蛋白(TRPC6)、钙调蛋白(CAM)、钙调神经磷酸酶(CAN)、活化T细胞核因子(NF... 目的:探讨淫羊藿苷联合地塞米松对阿霉素诱导足细胞损伤的保护作用,及对无翅型MMTV整合位点家族成员1(Wnt1)、β-连环蛋白(β-catenin)、瞬时受体电位阳离子通道6蛋白(TRPC6)、钙调蛋白(CAM)、钙调神经磷酸酶(CAN)、活化T细胞核因子(NFAT)、F-肌动蛋白(F-actin)及肌球蛋白重链9(MYH9)表达的影响。方法:采用阿霉素诱导大鼠肾足细胞建立足细胞损伤模型,分为空白组、模型组、地塞米松组、淫羊藿苷组、联合组。通过检测足细胞活力、凋亡率、细胞内钙离子浓度,观察足细胞骨架结构和损伤超微结构,分析Wnt/β-catenin/TRPC6/CaN通路相关转接分子表达规律。结果:与空白组比较,模型组足细胞存活率显著降低(P<0.01),总凋亡率显著升高(P<0.01),[Ca^(2+)]i浓度增强(P<0.01),足细胞骨架排列紊乱、重组且降解,足突广泛融合,足细胞Wnt、β-catenin、TRPC6、CaM、CaN以及NFAT基因和蛋白表达均显著升高(P<0.01),F-actin和MYH9表达均显著降低(P<0.01)。与模型组比较,联合组足细胞存活率升高(P<0.01),总凋亡率下降(P<0.01),[Ca^(2+)]i浓度显著降低(P<0.01),足细胞骨架紊乱好转,足细胞微观结构趋于正常,足细胞Wnt、β-catenin、TRPC6、CaM、CaN、NFAT基因和蛋白表达显著低于模型组(P<0.01),F-actin和MYH9表达显著高于模型组(P<0.01)。结论:淫羊藿苷联合地塞米松可能通过干预Wnt/β-catenin/TRPC6/CaN信号通路的过度激活而抑制钙离子内流,改善足细胞骨架蛋白结构、保护足细胞功能,进而发挥激素增敏作用。 展开更多

关键词 激素抵抗型肾病综合征 局灶节段性肾小球硬化 足细胞 细胞骨架 阿霉素足细胞损伤 淫羊藿苷 地塞米松 无翅型MMTV整合位点家族成员1/β-连环蛋白/瞬时受体电位阳离子通道6/钙调神经磷酸酶通路

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rcan1-1l基因的克隆和表达

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作者 刘海朋 杨薇 +2 位作者 涂玲辉 魏群 骆静 《北京师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期181-184,共4页

从小鼠脑组织中通过总mRNA的提取、RT-PCR方法,利用pEASY-T1载体克隆出了鼠源rcan1-1l基因,并构建出了重组有rcan1-1l基因的PET21a原核表达质粒,进行了表达条件的初步摸索,这为今后研究rcan1-1l基因以及蛋白的结构与功能打下了前期实验... 从小鼠脑组织中通过总mRNA的提取、RT-PCR方法,利用pEASY-T1载体克隆出了鼠源rcan1-1l基因,并构建出了重组有rcan1-1l基因的PET21a原核表达质粒,进行了表达条件的初步摸索,这为今后研究rcan1-1l基因以及蛋白的结构与功能打下了前期实验基础. 展开更多

关键词 钙调神经磷酸酶 rcan1-1l基因 pEASY-T1载体 克隆 表达

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姜黄素影响N2a/APP695swe细胞中ABCA1表达的机制研究 被引量：3

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作者 许可 向月 +2 位作者 孙洁芸 张雄 李昱 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期677-681,共5页

目的:研究姜黄素(Curcumin)对N2a/APP695swe细胞钙调神经磷酸酶(Calcineurin,CaN)活性和三磷酸腺苷结合转运子A1(ATP-binding cassette transporter A1,ABCA1)表达的影响;探讨Curcumin影响N2a/APP695swe细胞中ABCA1表达的可能机制。方法... 目的:研究姜黄素(Curcumin)对N2a/APP695swe细胞钙调神经磷酸酶(Calcineurin,CaN)活性和三磷酸腺苷结合转运子A1(ATP-binding cassette transporter A1,ABCA1)表达的影响;探讨Curcumin影响N2a/APP695swe细胞中ABCA1表达的可能机制。方法:MTT法分别检测1、5、10、20、40μmol/L Curcumin或0.1、0.5、1、2、4μmol/L CaN活性抑制剂环孢素A(Cyclosporin A,Cs A)对N2a/APP695swe细胞存活率的影响;依据MTT筛选结果,分为正常对照组、模型组、Curcumin组:5μmol/L Curcumin处理24 h的N2a/APP695swe细胞、Cs A组:0.5μmol/L Cs A处理48 h的N2a/APP695swe细胞。酶底物显色法检测CaN活性,real-time PCR、Western blot检测ABCA1表达水平的变化。结果:与未处理组比较,5μmol/L Curcumin组细胞存活率[(110.495±4.005)%]最高(P=0.023);0.1、0.5、1、2、4μmol/L Cs A组细胞存活率依次为(105.532±4.292)%、(115.211±4.826)%、(76.317±4.475)%、(69.177±5.267)%、(54.687±3.912)%,与未处理组比较,0.5、1、2、4μmol/L Cs A组差异均有统计学意义(P值依次为0.001、0.000、0.000、0.000);酶底物显色法显示与正常对照组[(18.519±1.664)nmol/mg]比较,模型组CaN活性[(24.488±3.041)nmol/mg]增加(P=0.007),Curcumin组[(16.717±2.055)nmol/mg]、Cs A组[(4.928±1.232)nmol/mg]CaN活性明显受到抑制(P值依次为0.002、0.000);real-time PCR和Western blot显示Curcumin组ABCA1表达量(real-time PCR:1.988±0.355;Western blot:0.294±0.015)高于模型组(real-time PCR:1.000±0.000;Western blot:0.175±0.008),差异有统计学意义(real-time PCR:P=0.009;Western blot:P=0.000);与模型组比较,Cs A组(real-time PCR:4.000±0.464;Western blot:0.470±0.016)的ABCA1表达水平增加(real-time PCR:P=0.000;Western blot:P=0.000)。结论:Curcumin能上调N2a/APP695swe细胞中ABCA1的表达,其机理可能与抑制CaN活性有关。 展开更多

关键词 阿尔茨海默病 钙调神经磷酸酶 三磷酸腺苷结合盒转运子A1 姜黄素 环孢素A

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