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基于荧光生物传感技术检测牛奶中金黄色葡萄球菌肠毒素B 被引量：5
1
作者 王美玲 胡婷 +3 位作者 李昌哲 周焕英 高志贤 罗鹏 《食品安全质量检测学报》 CAS 2024年第1期57-64,共8页
目的利用纳米金粒子(gold nanoparticles,AuNPs)荧光猝灭性能和核酸适配体的高亲和力,构建一种简便、灵敏的纳米金“Turn-on”型荧光生物传感方法检测牛奶中金黄色葡萄球菌肠毒素B(staphylococcal enterotoxins B,SEB)的方法。方法以Au... 目的利用纳米金粒子(gold nanoparticles,AuNPs)荧光猝灭性能和核酸适配体的高亲和力,构建一种简便、灵敏的纳米金“Turn-on”型荧光生物传感方法检测牛奶中金黄色葡萄球菌肠毒素B(staphylococcal enterotoxins B,SEB)的方法。方法以AuNPs作为荧光体的能量受体(猝灭剂),荧光素-单链DNA(fluorescein-ssDNA,FAM-ssDNA)作为荧光能量供体,冷冻法制备AuNPs-SEB适配体复合物,基于AuNPsSEB适配体复合物/SEB/FAM-ssDNA的竞争性结合,构建纳米金“Turn-on”型荧光生物传感检测方法。对缓冲体系pH和反应时间等条件进行优化,以牛奶为代表对方法检测性能进行验证。结果在优化好的实验条件(pH 7.5、反应时间15 min和反应温度25℃)下,在10^(-1)~10^(4)ng/mL范围内,荧光强度与SEB质量浓度之间呈现良好的线性关系,其相关系数为0.995,检出限为0.062 ng/mL。应用于牛奶样品中SEB的测定,方法回收率为91.2%~108.0%,相对标准偏差在2.6%~5.2%范围之间。结论该纳米金“Turn-on”型荧光生物传感检测技术具有简便、灵敏和准确等优点,可为食品中污染物的检测提供一种可行的新方法。 展开更多
关键词 纳米金粒子 核酸适配体 荧光生物传感 金黄色葡萄球菌肠毒素b 牛奶
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乳品中金黄色葡萄球菌肠毒素B免疫传感检测方法的研究 被引量：6
2
作者 高博 孙秀兰 +1 位作者 张银志 顾小红 《分析科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期169-172,共4页
本文利用自制的金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)抗体构建了一种L-半胱氨酸和纳米金的双层自组装免疫传感器,采用循环伏安法及交流阻抗法对传感器进行表征与测定,并对各项相关条件进行优化,最终建立了SEB检测的标准曲线,线性范围分别在2～10 ... 本文利用自制的金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)抗体构建了一种L-半胱氨酸和纳米金的双层自组装免疫传感器,采用循环伏安法及交流阻抗法对传感器进行表征与测定,并对各项相关条件进行优化,最终建立了SEB检测的标准曲线,线性范围分别在2～10 ng/mL和10～100 ng/mL,相关系数分别为0.9939和0.9926,检出限(S/N=3)为0.667 ng/mL,乳品检测回收率在84.3%～93.2%之间。该传感器特异性良好,稳定性好,可再生使用,可应用于乳品中SEB的快速检测。 展开更多
关键词 免疫传感器 金黄色葡萄球菌肠毒素b L-半胱氨酸 纳米金 交流阻抗谱
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低温等离子体对金黄色葡萄球菌肠毒素B的灭活作用 被引量：2
3
作者 潘迪 张大革 +1 位作者 孙运金 马挺军 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2020年第10期192-195,202,共5页
采用金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)休克小鼠模型评价低温等离子体对SEB的灭活效果。实验设定为空白对照组、阳性组和3个处理组(等离子体降解处理SEB 10、20、30 min组),小鼠注射SEB后,观察120 h。记录各组小鼠存活时间和体重,并测定小鼠... 采用金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)休克小鼠模型评价低温等离子体对SEB的灭活效果。实验设定为空白对照组、阳性组和3个处理组(等离子体降解处理SEB 10、20、30 min组),小鼠注射SEB后,观察120 h。记录各组小鼠存活时间和体重,并测定小鼠肝脏中过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性。结果表明:SEB的含量随等离子体处理时间的延长而降低,在处理30 min时SEB的降解率最大为96%。与阳性组相比,处理SEB 10、20、30 min组小鼠平均生存时间均显著延长(P<0.05),分别为阳性组的2.50、3.33、5.00倍;处理SEB 30 min组小鼠平均体重显著高于阳性组(P<0.05);处理SEB 30 min组小鼠肝脏中CAT、SOD、GSH-Px的活性与阳性组相比显著提高(P<0.05),分别提高了69.33%、74.93%、47.92%。综上,低温等离子体处理可以降低SEB的含量,从而提高小鼠体内抗氧化酶活性,增强机体免疫力,延长存活时间,且其存活时间具有处理时间依赖性。 展开更多
关键词 低温等离子体 金黄色葡萄球菌肠毒素b 介质阻挡放电 灭活效果 抗氧化活性
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基于纳米抗体的酶联免疫吸附法检测食品中金黄色葡萄球菌肠毒素B 被引量：11
4
作者 郭鹏利 路云龙 +5 位作者 李想 李丽华 任孝茹 陈利莉 张敢为 季艳伟 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2019年第20期250-255,共6页
在前期已获得抗金黄色葡萄球菌肠毒素B(Staphylococcal enterotoxin B,SEB)纳米抗体的基础上,建立一种用于检测食品中SEB的酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA),为食品及农产品质量监管提供技术支持。优化表达条件... 在前期已获得抗金黄色葡萄球菌肠毒素B(Staphylococcal enterotoxin B,SEB)纳米抗体的基础上,建立一种用于检测食品中SEB的酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA),为食品及农产品质量监管提供技术支持。优化表达条件后,通过大肠杆菌原核表达获得抗SEB的纳米抗体B7;以纳米抗体B7作为捕获抗体,以噬菌体展示的抗SEB纳米抗体B6为检测识别元件,建立夹心ELISA方法;以牛奶、牛肉及西瓜汁为样本对其进行方法学评价。结果显示,纳米抗体B7在大肠杆菌中成功表达,表达量为6.2 mg/L;该方法在16~1 024 ng/mL具有良好的线性关系(R^2=0.990 4),最低检出限为(9.58±0.07)ng/mL;该方法与SEC有42.18%的交叉,与SEA及另外3株金黄色葡萄球菌无明显交叉;牛奶、牛肉和西瓜汁的加标回收率分别为87.26%~108.43%,79.36%~106.56%和83.81%~99.43%。该方法以纳米抗体作为识别元件,可应用于实际食品及农产品中的SEB高灵敏检测,具有广阔的应用前景。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌肠毒素b 纳米抗体 噬菌体 酶联免疫吸附法 高特异性
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金黄色葡萄球菌肠毒素B诱导兔急性上颌窦炎的实验研究 被引量：2
5
作者 卫红齐 王天友 +5 位作者 王秋萍 袁辉 朱政文 刘志勇 邬晓帆 曹忠胜 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2013年第6期577-580,共4页
目的金黄色葡萄球菌肠毒素B(staphylococcal enterotoxin B,SEB)作为超抗原(superantigen)目前被认为可能是导致鼻窦炎发生、发展并向慢性转化的主要因素之一。文中通过向兔上颌窦腔注入不同浓度SEB,明确其能否成功诱导急性上颌窦炎。方... 目的金黄色葡萄球菌肠毒素B(staphylococcal enterotoxin B,SEB)作为超抗原(superantigen)目前被认为可能是导致鼻窦炎发生、发展并向慢性转化的主要因素之一。文中通过向兔上颌窦腔注入不同浓度SEB,明确其能否成功诱导急性上颌窦炎。方法 45只兔随机分成3组,每组15只。每天分别向兔右上颌窦腔注入低浓度SEB(0.3 ng/ml,A组)、中等浓度SEB(3 ng/ml,B组)及高浓度SEB(30ng/ml,C组)各2ml,3组兔左上颌窦腔每天注入2ml等渗盐水作为对照侧。3d、7d及14 d后每组随机选取5只兔处死,取双上颌窦分泌物行普通细菌培养及鼻窦黏膜标本光镜下观察。结果 3 d后,3组兔右上颌窦分泌物普通细菌培养结果均为阴性;7d及14d后,A组右上颌窦分泌物普通细菌培养结果为阴性,B、C组右上颌窦分泌物普通细菌培养阳性率均为100%。光镜下黏膜病理半定量结果示:B、C组与A组比较,3 d后炎性细胞浸润差异有统计学意义(P<0.05),7d及14d后炎性细胞浸润及上皮溃疡形成差异均有统计学意义(P<0.05);C组与B组比较,7d及14d后上皮溃疡形成差异均有统计学意义(P<0.05)。3组兔左上颌窦细菌培养结果均为阴性,黏膜形态学未见明显改变。结论持续灌注中高浓度SEB 7 d可成功诱导急性鼻窦炎,且随着SEB浓度增加鼻窦黏膜形态学改变更加显著。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 肠毒素 鼻窦炎 黏膜 组织形态学
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金黄色葡萄球菌肠毒素B检测方法的研究进展 被引量：8
6
作者 霍冰洋 苑帅 +5 位作者 张曼 宁保安 彭媛 白家磊 徐艳阳 高志贤 《食品安全质量检测学报》 CAS 2018年第9期2049-2055,共7页
金黄色葡萄球菌分泌的肠毒素B(staphylococcal enterotoxin B,SEB)作为与食品中毒相关的重要毒素之一而被广泛报道。同时由于其具有热稳定性、易制备、高毒及易传播等特点引起科研人员的高度重视,因此,建立SEB高效的检测方法非常重要。... 金黄色葡萄球菌分泌的肠毒素B(staphylococcal enterotoxin B,SEB)作为与食品中毒相关的重要毒素之一而被广泛报道。同时由于其具有热稳定性、易制备、高毒及易传播等特点引起科研人员的高度重视,因此,建立SEB高效的检测方法非常重要。本文对SEB的检测方法进行了综述,主要讨论了生物学检测、免疫凝集实验、琼脂糖扩散法、酶联免疫检测技术、放射性免疫检测技术、免疫荧光检测技术、胶体金试纸条检测技术、基因探针、仪器分析、生物传感检测等检测方法的原理及相关国内外研究进展的应用和局限,这对提前预防金黄色葡萄球菌肠毒素B引起的食物中毒具有重要意义,同时也为今后开发新型检测方法提供理论参考和技术支持。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌肠毒素b 食源性致病菌 检测方法
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金黄色葡萄球菌肠毒素B的分离纯化 被引量：1
7
作者 朱俊友 李玉锋 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期136-138,共3页
为了分离纯化金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB),在离心、浓缩后,将浓缩液依次经羧甲基阳离子交换纤维素CM-32和葡聚糖凝胶G-75两步柱层析,再经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,获得了电泳纯的金黄色葡萄球菌肠毒素B。实验证明,该简化的二步柱层... 为了分离纯化金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB),在离心、浓缩后,将浓缩液依次经羧甲基阳离子交换纤维素CM-32和葡聚糖凝胶G-75两步柱层析,再经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,获得了电泳纯的金黄色葡萄球菌肠毒素B。实验证明,该简化的二步柱层析分离得到的SEB纯度高,方法简便易行,一般实验室均可采用。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 肠毒素b 分离纯化
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外周血指标对鼻息肉患者黏膜中IL-5和金黄色葡萄球菌肠毒素特异性免疫球蛋白E阳性表达的预测价值
8
作者 郑铭 司马宇彤 +3 位作者 普晓瑜 庄梦岩 王向东 张罗 《中国耳鼻咽喉头颈外科》 CSCD 2024年第7期440-445,共6页
目的借助外周血指标预测慢性鼻窦炎伴鼻息肉(CRSwNP)2型生物标志物。方法收集2020年6月~2022年5月在北京同仁医院鼻科住院的CRSwNP患者临床资料,检测外周血中嗜酸粒细胞百分比(Eos%)、Eos计数、骨膜蛋白和总IgE以及CRSwNP黏膜中白细胞介... 目的借助外周血指标预测慢性鼻窦炎伴鼻息肉(CRSwNP)2型生物标志物。方法收集2020年6月~2022年5月在北京同仁医院鼻科住院的CRSwNP患者临床资料,检测外周血中嗜酸粒细胞百分比(Eos%)、Eos计数、骨膜蛋白和总IgE以及CRSwNP黏膜中白细胞介素5(IL-5)和金黄色葡萄球菌肠毒素特异性免疫球蛋白E(Staphylococcus aureus enterotoxinimmunoglobulin E,SE-IgE)。应用受试者工作特征(ROC)曲线评估每个外周血指标对黏膜IL-5/SE-IgE阳性表达预测价值,利用Logistic回归筛选对黏膜IL-5/SE-IgE阳性有预测价值的外周血指标,构建诺模图模型。结果CRSwNP患者哮喘比例、血中Eos%、骨膜蛋白和总IgE在IL-5/SE-IgE阳性和阴性两组之间,均具有统计学差异。ROC曲线单因素分析显示血Eos%、Eos计数、骨膜蛋白和总IgE对黏膜IL-5和SE-IgE阳性预测的AUC分别波动在0.655~0.784和0.721~0.802,Logistic回归确认血中Eos%、总IgE和血中骨膜蛋白、总IgE可分别作为IL-5和SE-IgE阳性的独立预测因素。构建预测CRSwNP黏膜IL-5/SE-IgE阳性的诺模图模型,一致性指数(C-index)为0.804和0.81,提示具有很好的预测准确性。结论血中Eos%、总IgE和血中骨膜蛋白、总IgE分别构建的诺模图,对CRSwNP黏膜IL-5和SE-IgE阳性表达具有很好的预测价值,可以预判CRSwNP内型和表型严重性。 展开更多
关键词 鼻窦炎 鼻息肉 预测 白细胞介素5 金黄色葡萄球菌肠毒素特异性免疫球蛋白E 受试者工作特征 诺模图
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金黄色葡萄球菌B型肠毒素的培养产毒与柱层析纯化 被引量：7
9
作者 王小红 谢笔钧 +2 位作者 史贤明 孙科 李伟 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第5期88-91,共4页
本文采用玻璃纸覆盖琼脂平板法,在37℃培养金黄色葡萄球菌48h后,收集菌体,10000×g离心15min,上清液经聚乙二醇20000浓缩。浓缩液依次经羧甲基阳离子交换纤维素CM-32层析和葡聚糖凝胶SephadexG-75过滤纯化,获得电泳纯的金黄色葡萄球... 本文采用玻璃纸覆盖琼脂平板法,在37℃培养金黄色葡萄球菌48h后,收集菌体,10000×g离心15min,上清液经聚乙二醇20000浓缩。浓缩液依次经羧甲基阳离子交换纤维素CM-32层析和葡聚糖凝胶SephadexG-75过滤纯化,获得电泳纯的金黄色葡萄球菌B型肠毒素。实验证明,利用该简化的二步柱层析分离得到的金黄色葡萄球菌B型肠毒素完全能满足血清学检实验和鉴定的要求,方法简便易行,一般实验室均可使用。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 b型肠毒素 培养产毒 离子交换层析 凝胶过滤
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金黄色葡萄球菌肠毒素A、B、C在草莓中表达的研究 被引量：3
10
作者 代晓航 郭灵安 魏超 《食品安全质量检测学报》 CAS 2016年第9期3516-3520,共5页
目的研究金黄色葡萄球菌在草莓中生长情况及与3种肠毒素SEA、SEB、SEC产生的相关性。方法将实验菌株进行肠毒素分型确认后,分别制备10^4 CFU/g（高）、10^2CFU/g（低）两个浓度菌液,采用浸泡方式人工污染到草莓上,分别于8℃、25℃下贮存... 目的研究金黄色葡萄球菌在草莓中生长情况及与3种肠毒素SEA、SEB、SEC产生的相关性。方法将实验菌株进行肠毒素分型确认后,分别制备10^4 CFU/g（高）、10^2CFU/g（低）两个浓度菌液,采用浸泡方式人工污染到草莓上,分别于8℃、25℃下贮存,贮存过程中参照GB 4789对草莓进行金黄色葡萄球菌计数和金黄色葡萄球菌肠毒素（A-C）检测。结果适宜条件下,无论初始污染程度高低,金黄色葡萄球菌都能在草莓上正常生长代谢并产生肠毒素,特别是SEA的产生较SEB和SEC迅速。其中,25℃贮存条件下,金黄色葡萄球菌累计到10^4 CFU/g以上就可从样品中检测到SEA,累计到10^5 CFU/g以上可以检测到SEC,累计到10^7CFU/g以上可以检测到SEB;8℃贮存条件下,48 h内未检测到肠毒素。结论以草莓作为金黄色葡萄球菌培养基质,获得了金黄色葡萄球菌生长及与3种常见肠毒素产生的相关性,对草莓微生物风险评估及相关标准制订具有参考意义。 展开更多
关键词 草莓 金黄色葡萄球菌 肠毒素
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金黄色葡萄球菌B型肠毒素的酶联免疫检测 被引量：7
11
作者 段鸿斌 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第7期2617-2619,共3页
[目的]为细菌毒素的检测提供理论依据。[方法]以BALB/c小白鼠为免疫对象,以自制的高纯度金黄色葡萄球菌B型肠毒素（SEB）为免疫抗原,研究其抗体的产生过程和效价,并建立SEB的间接竞争ELISA检测方法。[结果]自制SEB纯度较高,能较好地刺... [目的]为细菌毒素的检测提供理论依据。[方法]以BALB/c小白鼠为免疫对象,以自制的高纯度金黄色葡萄球菌B型肠毒素（SEB）为免疫抗原,研究其抗体的产生过程和效价,并建立SEB的间接竞争ELISA检测方法。[结果]自制SEB纯度较高,能较好地刺激动物产生抗体。以自制SEB为免疫抗原注射BALB/c小白鼠,其最高效价为1∶100 000。SEB浓度在1-1 000 ng/ml范围内,竞争抑制率与SEB浓度的对数值呈显著线性关系。当SEB的浓度为5-500 ng/ml时,随样品中SEB浓度的增加,污染样品的回收率变异系数减小,检测准确度提高。[结论]对不同污染程度的牛奶样品,利用间接竞争ELISA法检测其SEB残留的灵敏度远远高于生化法。 展开更多
关键词 牛奶 金黄色葡萄球菌b型肠毒素 抗原 抗体 ELISA
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食品中金黄色葡萄球菌肠毒素研究进展
12
作者 安刚 《食品安全导刊》 2024年第33期141-143,共3页
金黄色葡萄球菌是一种重要的食源性致病菌,其产生的肠毒素在引发食物中毒方面发挥了关键作用。研究表明,这些毒素具有较强的耐热性,常规的烹饪方法难以完全去除,已成为食品安全监控的重点。本文概述了食品中金黄色葡萄球菌肠毒素的研究... 金黄色葡萄球菌是一种重要的食源性致病菌,其产生的肠毒素在引发食物中毒方面发挥了关键作用。研究表明,这些毒素具有较强的耐热性,常规的烹饪方法难以完全去除,已成为食品安全监控的重点。本文概述了食品中金黄色葡萄球菌肠毒素的研究进展,旨在为有效预防和控制肠毒素污染提供参考。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 肠毒素 食品安全 检测技术
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利用简并引物检测金黄色葡萄球菌肠毒素A、B基因 被引量：1
13
作者 刘继超 陈柏儒 +1 位作者 姜铁民 陈历俊 《食品与机械》 CSCD 北大核心 2015年第5期59-61,共3页
通过设计简并引物建立一种PCR技术同步快速检测金黄色葡萄球菌肠毒素A和B基因的方法。根据金黄色葡萄球菌肠毒素A、B基因编码序列,设计一对特异性简并引物SEAB来扩增靶基因片段,长度分别为105bp和135bp,通过对金黄色葡萄球菌肠毒素A、B... 通过设计简并引物建立一种PCR技术同步快速检测金黄色葡萄球菌肠毒素A和B基因的方法。根据金黄色葡萄球菌肠毒素A、B基因编码序列,设计一对特异性简并引物SEAB来扩增靶基因片段,长度分别为105bp和135bp,通过对金黄色葡萄球菌肠毒素A、B菌株和4株对照菌株进行PCR检测,评价该引物的特异性;对金黄色葡萄球菌肠毒素B的DNA系列10倍稀释,对其灵敏性进行PCR检测。结果显示,金黄色葡萄球菌肠毒素A和B菌株的DNA检测结果呈阳性,4株对照菌株的检测结果呈阴性,通过基因测序证实了PCR产物的特异性,SEB的DNA最低检测浓度为3.58ng,整个检测过程不超过20h。建立了一个特异、快速灵敏的在同一条件下,金黄色葡萄球菌肠毒素A、B基因的PCR检测方法。 展开更多
关键词 PCR 金黄色葡萄球菌 肠毒素 A、b基因
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金黄色葡萄球菌B型肠毒素的酶联免疫检测研究 被引量：1
14
作者 薛士鹏 《中国实用医药》 2015年第18期287-288,共2页
目的探讨金黄色葡萄球菌B型肠毒素的酶联免疫检测的临床应用价值。方法本次研究的对象是小白鼠,将本院自制的金黄色葡萄球菌B型肠毒素作为免疫抗体,研究这种抗体在产生过程中的作用,采用金黄色葡萄球菌B型肠毒素间接竞争酶联免疫吸附试... 目的探讨金黄色葡萄球菌B型肠毒素的酶联免疫检测的临床应用价值。方法本次研究的对象是小白鼠,将本院自制的金黄色葡萄球菌B型肠毒素作为免疫抗体,研究这种抗体在产生过程中的作用,采用金黄色葡萄球菌B型肠毒素间接竞争酶联免疫吸附试验（ELISA）检验方式对其进行检验,总结出金黄色葡萄球菌B型肠毒素的酶联免疫检测在细菌霉素中检测的理论依据。结果本院自制的金黄色葡萄球菌B型肠毒素纯度较高,能够与金黄色葡萄球菌B型肠毒素的浓度呈现出线性关系。在本次研究过程中,小白鼠最高效价为1：10000。从本次试验中发现,当金黄色葡萄球菌B型肠毒素的浓度在2～1000 ng/ml范围中时竞争性抑制率与金黄色葡萄球菌B型肠毒素浓度10～450 ng/ml时样品中的金黄色葡萄球菌B型肠毒素浓度会随之增加。结论采用金黄色葡萄球菌B型肠毒素的酶联免疫检测这种方式应用于检测中具有极强的价值,灵敏度较高,能够检测出样品中金黄色葡萄球菌B型肠毒素的残留情况。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌b型肠毒素 酶联免疫检测 临床应用价值 研究
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食源性金黄色葡萄球菌肠毒素及其检测方法 被引量：26
15
作者 李琼琼 范一灵 +2 位作者 宋明辉 施春雷 杨美成 《食品安全质量检测学报》 CAS 2016年第2期555-560,共6页
金黄色葡萄球菌是一种重要的食源性致病菌,在自然界中广泛分布,其引起的食物中毒是世界性的公共卫生问题。金黄色葡萄球菌肠毒素是引起金黄色葡萄球菌食物中毒的主要致病因子。目前共发现22种金黄色葡萄球菌肠毒素或类肠毒素(SEA-SEE、S... 金黄色葡萄球菌是一种重要的食源性致病菌,在自然界中广泛分布,其引起的食物中毒是世界性的公共卫生问题。金黄色葡萄球菌肠毒素是引起金黄色葡萄球菌食物中毒的主要致病因子。目前共发现22种金黄色葡萄球菌肠毒素或类肠毒素(SEA-SEE、SEG-SET、SElU、SElU_2和SElV),其中具有催吐活性的被定义为肠毒素,没有催吐活性或者尚待验证的被定义为类肠毒素(SEl)。传统肠毒素SEA^SEE被报道是引起金黄色葡萄球菌食物中毒的主要肠毒素类型,但是大多数新型肠毒素或类肠毒素与食物中毒的关系还没有被真正认识。本文对近几年关于金黄色葡萄球菌肠毒素与食物中毒的关系、肠毒素的表达调控以及肠毒素检测方法的研究进展进行了总结,以期更好地了解金黄色葡萄球菌新型肠毒素致病性,为今后金黄色葡萄球菌食物中毒的预防和控制提供依据。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 肠毒素 食物中毒 可移动基因元件
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6种食品防腐剂对金黄色葡萄球菌抑菌效果及肠毒素基因表达的影响 被引量：15
16
作者 王琼 唐俊妮 +1 位作者 汤承 陈娟 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第21期151-156,共6页
目的:探索6种食品防腐剂——亚硝酸盐、苯甲酸钠、ε-聚赖氨酸、壳聚糖、茶多酚、Nisin对1株引起食物中毒的金黄色葡萄球菌SA003的抑菌作用,以及对该菌株所含不同肠毒素基因在m RNA水平表达的影响。方法:按照GB 2760—2014《食品添加剂... 目的:探索6种食品防腐剂——亚硝酸盐、苯甲酸钠、ε-聚赖氨酸、壳聚糖、茶多酚、Nisin对1株引起食物中毒的金黄色葡萄球菌SA003的抑菌作用,以及对该菌株所含不同肠毒素基因在m RNA水平表达的影响。方法:按照GB 2760—2014《食品添加剂使用标准》限量标准的质量浓度,分别添加6种不同的防腐剂在金黄色葡萄球菌SA003初始接菌量约为105 CFU/m L的TSB液体培养基中,37℃培养24 h后进行菌落计数;同时收集菌体用于RNA提取,将提取的RNA进行反转录后,采用荧光定量聚合酶链式反应方法检测各肠毒素基因在m RNA水平上的相对表达量。结果:在国标最大限量条件下,不同添加剂对金黄色葡萄球菌SA003的抑菌作用强弱顺序分别为:Nisin>茶多酚>壳聚糖>ε-聚赖氨酸>苯甲酸钠>亚硝酸盐。6种防腐剂均能抑制肠毒素sea、sed、seg、sei、selj、selm、selr和selu基因在转录水平上的表达,但作用效果存在差异。结论:在TSB液体培养基中添加一定剂量的防腐剂不仅能抑制金黄色葡萄球菌的生长,还能够显著降低肠毒素基因的表达量。 展开更多
关键词 食品防腐剂 金黄色葡萄球菌 肠毒素基因 表达
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金黄色葡萄球菌新型肠毒素I双抗夹心-酶联免疫检测方法的建立 被引量：7
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作者 朱安妮 唐俊妮 +3 位作者 赵燕英 汤承 陈娟 刘骥 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第16期193-198,共6页
目的:建立简便、灵敏检测金黄色葡萄球菌肠毒素I(staphylococcal enterotoxin I,SEI)的双抗夹心酶联免疫吸附方法(double-antibody sandwich-enzyme linked immunosorbent assay,DAS-ELISA)。方法:利用DAS-ELISA检测程序确定单克隆抗体... 目的:建立简便、灵敏检测金黄色葡萄球菌肠毒素I(staphylococcal enterotoxin I,SEI)的双抗夹心酶联免疫吸附方法(double-antibody sandwich-enzyme linked immunosorbent assay,DAS-ELISA)。方法:利用DAS-ELISA检测程序确定单克隆抗体、抗血清、辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)标记的羊抗兔Ig G(Ig G/HRP)的最佳稀释度,再通过检测不同包被缓冲液、封闭时间、抗原包被时间、Ig G/HRP作用时间以及四甲基联苯胺(3,3’,5,5’-tetramethylbenzidine,TMB)显色时间条件下的OD450 nm值对实验条件进行优化,最后用灵敏度、批内变异、批间变异和加标回收率指标对方法进行评价。结果:抗SEI单克隆抗体的最佳稀释质量浓度为2.89 mg/L,抗SEI兔血清稀释度1∶2 000,酶标二抗稀释度1∶6 000;1×磷酸缓冲盐溶液(p H 7.4)为最佳包被缓冲液;最佳封闭时间、抗原孵育时间、酶标二抗孵育时间和TMB显色时间分别为60、90、30 min和15 min。该方法的回归方程为y=0.040 9x+0.042 9,R2=0.993 3;灵敏度为0.5μg/L,精密度批内变异低于10%,批间变异低于15%,除巴氏杀菌牛乳外,对生理盐水、熟牦牛肉糜、大米饭和超高温瞬时灭菌牛乳回收率达90%以上。结论:本研究建立了一种快速检测SEI的双抗夹心方法。 展开更多
关键词 双抗夹心酶联免疫吸附 金黄色葡萄球菌 金黄色葡萄球菌肠毒素I 检测方法
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金黄色葡萄球菌耐药性及肠毒素分型研究 被引量：8
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作者 史红 王娟 +7 位作者 郑增忍 单虎 王述柏 李玉清 黄秀梅 刘开成 韩艳 张鹏 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2012年第6期87-90,共4页
为了解从生鲜乳中分离得到的31株金黄色葡萄球菌的耐药性和肠毒素分布情况,用微量肉汤稀释法进行药敏试验,用PCR方法进行肠毒素的检测和分型。结果表明,31株金黄色葡萄球菌耐药率在50%以上的抗菌药有7种,药耐药率小于10%的有3种;敏感率... 为了解从生鲜乳中分离得到的31株金黄色葡萄球菌的耐药性和肠毒素分布情况,用微量肉汤稀释法进行药敏试验,用PCR方法进行肠毒素的检测和分型。结果表明,31株金黄色葡萄球菌耐药率在50%以上的抗菌药有7种,药耐药率小于10%的有3种;敏感率大于50%的抗菌药有6种,敏感率小于10%的有5种。31株金黄色葡萄球菌毒素基因携带率为93.5%,同时携带2种及以上毒素的菌株占67.7%,有SEA基因的占38.7%,含其他传统的毒素基因类型SEB、SEC、SED和SEE基因的菌株只占40.4%,携带新发现的毒素基因SEG、SHE、SEI和SEJ的菌株占67.7%。说明本次试验中的31株金黄色葡萄球菌对6类13种抗菌药都有不同程度的耐药性,且多重耐药现象比较严重。生鲜乳中分离的金黄色葡萄球菌带毒率高,且携带新发现的肠毒素基因较多。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 耐药性 肠毒素
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金黄色葡萄球菌新型肠毒素sek基因在3株食品分离菌株中的表达 被引量：7
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作者 王琼 唐俊妮 +3 位作者 汤承 陈娟 刘骥 蔡自建 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第13期140-146,共7页
目的：肠毒素sek基因在临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌菌株中较为流行,研究新型肠毒素sek基因的时序性表达可为食物中毒预防和疾病控制补充新的基础数据。方法：本研究针对实验室保存的食源性金黄色葡萄球菌菌株进行21种肠毒素基... 目的：肠毒素sek基因在临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌菌株中较为流行,研究新型肠毒素sek基因的时序性表达可为食物中毒预防和疾病控制补充新的基础数据。方法：本研究针对实验室保存的食源性金黄色葡萄球菌菌株进行21种肠毒素基因检测,筛选出3株含sek基因的菌株SA005、SA008和SAB0,针对3株菌株进行生长曲线测定,随后在培养不同时间段收集菌体提取RNA,利用实时荧光定量聚合酶链式反应（real time-polymerase chain reaction,real time-PCR）检测肠毒素sek基因在12~120 h的相对表达水平。结果：基因检测结果显示,菌株SA005含有16S、nuc、mec A、seb、sec、sek、sex基因,SA008含有16S、nuc、mec A、sea、sek、sex基因,SAB0含有16S、nuc、sek、sex基因。3株菌株在胰酪胨大豆肉汤培养基中的生长曲线趋势较相似,18 h左右出现折点,之后细菌进入生长稳定期。3株菌株的sek基因在12~120 h全程表达,SA005的sek基因在48 h时相对表达量最高,在84 h相对表达量最低;SA008在24 h时的相对表达量最高,在48 h相对表达量最低,在60~120 h表达量相对比较稳定;SAB0在12~120 h之间相对表达量呈现抛物线趋势,在60 h和72 h的表达量相对较高且差异不显著（P〉0.05）。结论：3株菌株sek表达水平存在明显差异,相同菌株sek基因不同时间点表达也存在差异性,菌株基因背景的影响可能是造成sek基因表达差异性的关键。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 新型肠毒素 sek基因 实时荧光定量聚合酶链式反应 时序性表达
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温度和接种量对搅打奶油中金黄色葡萄球菌生长及产肠毒素的影响 被引量：4
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作者 王彤 林露 +2 位作者 严维凌 欧杰 陈敏 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第23期210-214,共5页
目的:研究金黄色葡萄球菌在搅打奶油中的生长以及产毒特性。方法:将不同浓度的初始接种量的产A型肠毒素金黄色葡萄球菌菌液接种到奶油中并搅打成型,低接种量控制在2~3(lg(CFU/g)),高接种量控制在4(lg(CFU/g))以上。定时测量不同贮存温... 目的:研究金黄色葡萄球菌在搅打奶油中的生长以及产毒特性。方法:将不同浓度的初始接种量的产A型肠毒素金黄色葡萄球菌菌液接种到奶油中并搅打成型,低接种量控制在2~3(lg(CFU/g)),高接种量控制在4(lg(CFU/g))以上。定时测量不同贮存温度条件下奶油中的金黄色葡萄球菌的菌落总数以及产毒状况。结果:36℃条件下生长速率最快,其他温度条件下依次降低;低初接种量水平下,只有36℃条件下于27 h检测到产生毒素,其他温度条件下未检测到毒素产生;高初接种量水平条件下,在36℃于12 h、25℃于24 h、15℃于66 h检测到产生毒素,5℃条件下金黄色葡萄球菌既不生长,又不产毒。结论:随着温度的升高,金黄色葡萄球菌的生长速率随之升高,产肠毒素的时间也随之缩短,高初始接种量水平肠毒素产生的时间短于低初始接种量水平,肠毒素的产生时间为一般在对数期的中后期,此时金黄色葡萄球菌菌落总数≥6(lg(CFU/g))。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 肠毒素 搅打奶油
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