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ADAM28 shRNA干扰载体对人牙周膜干细胞增殖、分化和凋亡的影响
1
作者
赵征
李杰
邱海燕
《实用口腔医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第5期619-624,共6页
目的:探讨金属蛋白酶解离素28(ADAM28)shRNA干扰载体对人牙周膜干细胞(HPDLSCs)增殖、分化和凋亡的影响及作用机制。方法:用ADAM28 shRNA干扰载体转染HPDLSCs 48 h后检测转染效率,CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术(FCM)检测细胞周期。酶...
目的:探讨金属蛋白酶解离素28(ADAM28)shRNA干扰载体对人牙周膜干细胞(HPDLSCs)增殖、分化和凋亡的影响及作用机制。方法:用ADAM28 shRNA干扰载体转染HPDLSCs 48 h后检测转染效率,CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术(FCM)检测细胞周期。酶动力学法检测碱性磷酸酶(ALP)活性,Western blot检测分化相关基因CAP、Pax9蛋白的表达。FCM测定HPDLSCs凋亡率,Western blot检测Bax、Bcl-2蛋白的表达差异。用SPSS 21.0软件包对数据进行统计学分析。结果:重组干扰载体PGPU6/GFP/Neo-ADAM28-shRNA可高效转染HPDLSCs,干扰载体组的细胞增殖活性显著下降,S期、G 2+M期的细胞比例和细胞增殖指数(PI=S+G 2M)明显降低,ALP值明显降低,CAP、Pax9蛋白的表达水平下降,凋亡率显著提高,Bcl-2、Bax蛋白的表达水平上调。结论:ADAM28 shRNA干扰载体抑制HPDLSCs的增殖、分化,诱导HPDLSCs凋亡。其机制可能是干扰载体抑制金属蛋白酶域和类解离素域的催化裂解和类EGF功能域的促细胞增殖作用,阻碍Notch信号传递并参与细胞凋亡负反馈调节机制。
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关键词
金属蛋白酶解离素28
shRNA干扰载体
人牙周膜干细胞
增殖
分化
凋亡
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职称材料
miR-134-3p通过靶向调节ADAM9/EGFR/AKT抑制结肠癌细胞的活性和迁移
被引量：
1
2
作者
付立芳
孙杰
《西安交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第5期653-659,共7页
目的探究miR-134-3p是否通过靶向调控ADAM9/EGFR/AKT通路影响结肠癌细胞的存活和迁移。方法实时定量PCR检测正常结肠上皮细胞NCM460和结肠癌细胞SW480,HCT116和RKO中miR-134-3p的表达,Western免疫印迹检测上述细胞中ADAM9、EGFR和AKT的...
目的探究miR-134-3p是否通过靶向调控ADAM9/EGFR/AKT通路影响结肠癌细胞的存活和迁移。方法实时定量PCR检测正常结肠上皮细胞NCM460和结肠癌细胞SW480,HCT116和RKO中miR-134-3p的表达,Western免疫印迹检测上述细胞中ADAM9、EGFR和AKT的蛋白表达;miR-134-3p mimic/miR-134-3p inhibitor转染SW480细胞后,CCK-8试剂盒、流式细胞术和Transwell迁移分析法分别用来检测各组细胞的增殖、凋亡、迁移能力;Western免疫印迹检测各组细胞ADAM9/EGFR/AKT通路蛋白表达和其磷酸化水平;荧光素酶报告分析实验用于验证miR-134-3p和ADAM9的靶向关系。结果与NCM460细胞系相比,miR-134-3p在3种人结肠癌细胞系中低表达,差异具有统计学意义(P<0.05),而ADAM9、EGFR和AKT在结肠癌细胞系中表达升高2~3倍(P<0.05)。miR-134-3p mimic转染后SW480细胞的增殖能力降低,迁移细胞数目减少。miR-134-3p mimic转染后细胞凋亡率升高至(15.0±1.1)%,与对照组(9.0±1.7)%相比差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,miR-134-3p mimic转染后ADAM9、p-EGFR/EGFR和p-AKT/AKT的水平降低,差异均具有统计学意义(P<0.05)。荧光素酶报告实验证实miR-134-3p可靶向结合ADAM9mRNA而抑制其表达;而SW480细胞转染miR-134-3p inhibitor则与miR-134-3p mimic作用相反。结论 miR-134-3p通过靶向调控ADAM9的表达而抑制EGFR/AKT通路,从而抑制结肠癌细胞的存活和迁移。
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关键词
结肠癌
miR-134-3p
金属
蛋白酶解
离素
9
细胞增殖
凋亡
迁移
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职称材料
题名
ADAM28 shRNA干扰载体对人牙周膜干细胞增殖、分化和凋亡的影响
1
作者
赵征
李杰
邱海燕
机构
青岛大学附属青岛市口腔医院老年口腔科
出处
《实用口腔医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第5期619-624,共6页
基金
青岛市医疗卫生重点学科建设项目资助(编号:2022-2024)
青岛市口腔疾病临床医学研究中心(编号:22-3-7-lczx-7-nsh)。
文摘
目的:探讨金属蛋白酶解离素28(ADAM28)shRNA干扰载体对人牙周膜干细胞(HPDLSCs)增殖、分化和凋亡的影响及作用机制。方法:用ADAM28 shRNA干扰载体转染HPDLSCs 48 h后检测转染效率,CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术(FCM)检测细胞周期。酶动力学法检测碱性磷酸酶(ALP)活性,Western blot检测分化相关基因CAP、Pax9蛋白的表达。FCM测定HPDLSCs凋亡率,Western blot检测Bax、Bcl-2蛋白的表达差异。用SPSS 21.0软件包对数据进行统计学分析。结果:重组干扰载体PGPU6/GFP/Neo-ADAM28-shRNA可高效转染HPDLSCs,干扰载体组的细胞增殖活性显著下降,S期、G 2+M期的细胞比例和细胞增殖指数(PI=S+G 2M)明显降低,ALP值明显降低,CAP、Pax9蛋白的表达水平下降,凋亡率显著提高,Bcl-2、Bax蛋白的表达水平上调。结论:ADAM28 shRNA干扰载体抑制HPDLSCs的增殖、分化,诱导HPDLSCs凋亡。其机制可能是干扰载体抑制金属蛋白酶域和类解离素域的催化裂解和类EGF功能域的促细胞增殖作用,阻碍Notch信号传递并参与细胞凋亡负反馈调节机制。
关键词
金属蛋白酶解离素28
shRNA干扰载体
人牙周膜干细胞
增殖
分化
凋亡
Keywords
ADAM
28
shRNA interference vector
HPDLSCs
Proliferation
Differentiation
Apoptosis
分类号
R781.4 [医药卫生—口腔医学]
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职称材料
题名
miR-134-3p通过靶向调节ADAM9/EGFR/AKT抑制结肠癌细胞的活性和迁移
被引量：
1
2
作者
付立芳
孙杰
机构
临沂市中医医院
山东医学高等专科学校中医学教研室
出处
《西安交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第5期653-659,共7页
基金
山东省教育厅课题资助项目(No.J13LK56)
山东省临沂市科技发展计划项目(No.201515053)~~
文摘
目的探究miR-134-3p是否通过靶向调控ADAM9/EGFR/AKT通路影响结肠癌细胞的存活和迁移。方法实时定量PCR检测正常结肠上皮细胞NCM460和结肠癌细胞SW480,HCT116和RKO中miR-134-3p的表达,Western免疫印迹检测上述细胞中ADAM9、EGFR和AKT的蛋白表达;miR-134-3p mimic/miR-134-3p inhibitor转染SW480细胞后,CCK-8试剂盒、流式细胞术和Transwell迁移分析法分别用来检测各组细胞的增殖、凋亡、迁移能力;Western免疫印迹检测各组细胞ADAM9/EGFR/AKT通路蛋白表达和其磷酸化水平;荧光素酶报告分析实验用于验证miR-134-3p和ADAM9的靶向关系。结果与NCM460细胞系相比,miR-134-3p在3种人结肠癌细胞系中低表达,差异具有统计学意义(P<0.05),而ADAM9、EGFR和AKT在结肠癌细胞系中表达升高2~3倍(P<0.05)。miR-134-3p mimic转染后SW480细胞的增殖能力降低,迁移细胞数目减少。miR-134-3p mimic转染后细胞凋亡率升高至(15.0±1.1)%,与对照组(9.0±1.7)%相比差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,miR-134-3p mimic转染后ADAM9、p-EGFR/EGFR和p-AKT/AKT的水平降低,差异均具有统计学意义(P<0.05)。荧光素酶报告实验证实miR-134-3p可靶向结合ADAM9mRNA而抑制其表达;而SW480细胞转染miR-134-3p inhibitor则与miR-134-3p mimic作用相反。结论 miR-134-3p通过靶向调控ADAM9的表达而抑制EGFR/AKT通路,从而抑制结肠癌细胞的存活和迁移。
关键词
结肠癌
miR-134-3p
金属
蛋白酶解
离素
9
细胞增殖
凋亡
迁移
Keywords
colon cancer
miR-134-3p
ADAM9
cell proliferation
apoptosis
migration
分类号
Q291 [生物学—细胞生物学]
R34 [医药卫生—基础医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
ADAM28 shRNA干扰载体对人牙周膜干细胞增殖、分化和凋亡的影响
赵征
李杰
邱海燕
《实用口腔医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2024
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
miR-134-3p通过靶向调节ADAM9/EGFR/AKT抑制结肠癌细胞的活性和迁移
付立芳
孙杰
《西安交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2018
1
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