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可与肝癌细胞系HepG2特异性结合的单链抗体的表达及其特性
被引量：
2
1
作者
余冰
倪明
+4 位作者
朱慧芬
张悦
杨静
邵静芳
沈关心
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第6期714-716,共3页
目的:在原核细胞中表达经噬菌体抗体库筛选可与HepG2细胞特异性结合的单链抗体(scFv),并对其特性进行鉴定。方法:采用正常肝细胞系L02和肝癌细胞系HepG2,从人源噬菌体抗体库中筛选可与HepG2细胞特异结合的scFv。对scFv DNA测序后,以其...
目的:在原核细胞中表达经噬菌体抗体库筛选可与HepG2细胞特异性结合的单链抗体(scFv),并对其特性进行鉴定。方法:采用正常肝细胞系L02和肝癌细胞系HepG2,从人源噬菌体抗体库中筛选可与HepG2细胞特异结合的scFv。对scFv DNA测序后,以其阳性噬菌体感染大肠杆菌HB2151,在IPTG诱导下表达scFv并以金属离子螯和层析(IMAC)进行纯化,用100g/L SDS-PAGE、Western blot及ELISA分析纯化的scFv。将纯化的scFv与HepG2细胞共孵育后,观察其对细胞生长的影响。结果:经筛选获得的2个相对特异性的scFv,分别命名为SLH04及SLH10。经IPTG诱导获得可溶性scFv的表达。Western blot分析证明,表达产物的相对分子质量(Mr)均为36000左右,与理论预期值相符。ELISA检测表明,纯化的scFv能与HepG2细胞特异性结合,并抑制HepG2细胞的生长。结论:从人源噬菌体抗体库中,筛选出能与HepG2细胞特异性结合的scFv,并在大肠杆菌中表达,有望用于肝癌生物治疗的实验研究。
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关键词
噬菌体抗体库
单链抗体
金属离子螯和层析
生物淘洗
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题名
可与肝癌细胞系HepG2特异性结合的单链抗体的表达及其特性
被引量：
2
1
作者
余冰
倪明
朱慧芬
张悦
杨静
邵静芳
沈关心
机构
华中科技大学同济医学院免疫学系
华中科技大学同济医学院同济医院感染科
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第6期714-716,共3页
基金
国家重点基础研究发展规划(973)资助(No.2002CB513109)
文摘
目的:在原核细胞中表达经噬菌体抗体库筛选可与HepG2细胞特异性结合的单链抗体(scFv),并对其特性进行鉴定。方法:采用正常肝细胞系L02和肝癌细胞系HepG2,从人源噬菌体抗体库中筛选可与HepG2细胞特异结合的scFv。对scFv DNA测序后,以其阳性噬菌体感染大肠杆菌HB2151,在IPTG诱导下表达scFv并以金属离子螯和层析(IMAC)进行纯化,用100g/L SDS-PAGE、Western blot及ELISA分析纯化的scFv。将纯化的scFv与HepG2细胞共孵育后,观察其对细胞生长的影响。结果:经筛选获得的2个相对特异性的scFv,分别命名为SLH04及SLH10。经IPTG诱导获得可溶性scFv的表达。Western blot分析证明,表达产物的相对分子质量(Mr)均为36000左右,与理论预期值相符。ELISA检测表明,纯化的scFv能与HepG2细胞特异性结合,并抑制HepG2细胞的生长。结论:从人源噬菌体抗体库中,筛选出能与HepG2细胞特异性结合的scFv,并在大肠杆菌中表达,有望用于肝癌生物治疗的实验研究。
关键词
噬菌体抗体库
单链抗体
金属离子螯和层析
生物淘洗
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
可与肝癌细胞系HepG2特异性结合的单链抗体的表达及其特性
余冰
倪明
朱慧芬
张悦
杨静
邵静芳
沈关心
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005
2
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