海湾扇贝(Argopecten irradians)金属硫蛋白基因的克隆与分析 被引量：19

1

作者 刘维青 倪多娇 +3 位作者 宋林生 吴龙涛 胥炜 孔晓瑜 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期444-449,共6页

金属硫蛋白是一种普遍存在于生物体内的低分子量、半胱氨酸含量丰富、易于被外界刺激诱导的金属结合蛋白。采用表达序列标签法,结合cDNA末端快速扩增技术,首次获得了海湾扇贝金属硫蛋白(AiMT)的全长cDNA序列。该序列全长787bp,5′UTR(Un... 金属硫蛋白是一种普遍存在于生物体内的低分子量、半胱氨酸含量丰富、易于被外界刺激诱导的金属结合蛋白。采用表达序列标签法,结合cDNA末端快速扩增技术,首次获得了海湾扇贝金属硫蛋白(AiMT)的全长cDNA序列。该序列全长787bp,5′UTR(UntranslatedRegion)为79bp,3′UTR为270bp,开放阅读框(OpenReadingFrame,ORF)长度为438bp,可编码145个氨基酸。在其编码的氨基酸序列中半胱氨酸含量丰富,甘氨酸含量也较高,芳香族氨基酸含量低,不含组氨酸,存在有无脊椎动物和软体动物金属硫蛋白的特征序列CKCXXX-CXCX,C-末端的氨基酸序列也符合软体动物金属硫蛋白标签序列C-x-C-x(3)-C-T-G-x(3)-C-x-C-x(3)-C-x-C-K。序列特征分析表明,该序列具备金属硫蛋白的典型特征,是金属硫蛋白家族的成员。 展开更多

关键词 海湾扇贝 金属硫蛋白基因 EST CDNA文库

在线阅读 下载PDF 职称材料

文蛤金属硫蛋白基因的克隆与分析 被引量：6

2

作者 高祥刚 赫崇波 +4 位作者 李云峰 王健 朱丹 刘卫东 鲍相渤 《水产学杂志》 CAS 2009年第4期8-11,共4页

金属硫蛋白是一种普遍存在于生物体内的低分子量、半胱氨酸含量丰富、易于被外界刺激诱导的金属结合蛋白。采用表达序列标签(EST)法,首次获得了文蛤金属硫蛋白(Mm-MT)的全长cDNA序列,序列全长657bp,开放阅读框长度为231bp,可以编码76个... 金属硫蛋白是一种普遍存在于生物体内的低分子量、半胱氨酸含量丰富、易于被外界刺激诱导的金属结合蛋白。采用表达序列标签(EST)法,首次获得了文蛤金属硫蛋白(Mm-MT)的全长cDNA序列,序列全长657bp,开放阅读框长度为231bp,可以编码76个氨基酸。编码的氨基酸中半胱氨酸含量丰富,达27.6%,含有软体动物等无脊椎动物金属硫蛋白的特征序列。序列特征分析表明,该序列具备金属硫蛋白的典型特征,是金属硫蛋白家族成员。 展开更多

关键词 文蛤 金属硫蛋白基因 EST CDNA文库

在线阅读 下载PDF 职称材料

镉胁迫对泥鳅金属硫蛋白基因表达的影响 被引量：8

3

作者 李彩娟 王磊 凌去非 《水生态学杂志》 北大核心 2014年第3期88-93,共6页

采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)分析了不同浓度Cd2+(0、0.25、2.5 mg/L)胁迫24、48、72 h对泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus)肝脏和鳃中金属硫蛋白(MT)基因相对表达水平的影响。结果表明,泥鳅肝脏和鳃MT基因的表达对外源Cd2+胁迫... 采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)分析了不同浓度Cd2+(0、0.25、2.5 mg/L)胁迫24、48、72 h对泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus)肝脏和鳃中金属硫蛋白(MT)基因相对表达水平的影响。结果表明,泥鳅肝脏和鳃MT基因的表达对外源Cd2+胁迫所表现出的反应存在差异,肝脏比鳃更为敏感;Cd2+浓度越高,胁迫时间越长,则肝脏和鳃中MT基因的相对表达水平越高。在受到Cd2+胁迫时,肝脏和鳃中大量表达MT,可降低Cd2+对机体造成的损伤。泥鳅MT基因可以作为监测水环境中镉污染的生物标志物之一。 展开更多

关键词 泥鳅 镉胁迫 金属硫蛋白基因

在线阅读 下载PDF 职称材料

转金属硫蛋白基因平菇对受辐照、衰老和铅中毒小鼠抗氧化能力的影响

4

作者 李汉臣 生吉萍 +3 位作者 徐培培 刘绍军 茹炳根 申琳 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第7期459-461,共3页

研究了转金属硫蛋白基因平菇对不同模型小鼠抗氧化能力的影响。结果表明:在小鼠饲料中掺入1%和3.16%的转金属硫蛋白基因平菇干粉(前者相当于50～60kg体重的人每日摄食鲜菇1kg),可明显增强受辐照小鼠血清SOD活性,降低其血清MDA含量;明显... 研究了转金属硫蛋白基因平菇对不同模型小鼠抗氧化能力的影响。结果表明:在小鼠饲料中掺入1%和3.16%的转金属硫蛋白基因平菇干粉(前者相当于50～60kg体重的人每日摄食鲜菇1kg),可明显增强受辐照小鼠血清SOD活性,降低其血清MDA含量;明显增强铅中毒小鼠血清SOD活性和抗活性氧能力;对衰老小鼠血清SOD活性的降低、MDA含量的升高无明显改善作用。结论:转金属硫蛋白基因平菇可提高受辐照和铅中毒小鼠的抗氧化能力,对增强D-半乳糖致衰老模型小鼠抗氧化能力无明显效果。 展开更多

关键词 转金属硫蛋白基因平菇 小鼠 抗氧化能力 丙二醛(MDA) 超氧化物岐化酶(SOD)

在线阅读 下载PDF 职称材料

重金属增强核因子与水稻金属硫蛋白基因启动子的结合(英文)

5

作者 李甜 徐佳雄 刘进元 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1110-1114,共5页

植物金属硫蛋白(metallothioneins,MT)被认为在植物应答重金属胁迫方面发挥了重要作用,但该基因的转录调控机制目前仍不清楚.我们以前的研究初步鉴定出位于-331/-194的水稻MT基因(ricMT)启动子区对于金属激活ricMT的表达是必需的.为了明... 植物金属硫蛋白(metallothioneins,MT)被认为在植物应答重金属胁迫方面发挥了重要作用,但该基因的转录调控机制目前仍不清楚.我们以前的研究初步鉴定出位于-331/-194的水稻MT基因(ricMT)启动子区对于金属激活ricMT的表达是必需的.为了明确-331/-194启动子序列在控制ricMT表达中的作用,本课题开展了该序列与核因子的结合特性研究.从2周龄水稻嫩叶中提取了几乎不含叶绿体污染的细胞核,并制备了核蛋白用于凝胶阻滞实验,发现核因子能够与-331/-194启动子序列特异结合.本研究还进一步考察了重金属对核因子结合活性的影响,发现在结合体系中去除重金属离子,核因子与-331/-194序列的结合能力会丧失,而在结合体系中加入重金属离子,结合能力则会随着外加的离子浓度提高而增强,证明这种结合确实依赖于重金属.这些证据结合以前的结果表明,某些金属响应的核因子可能通过结合-331/-194启动子区域来调控ricMT基因表达. 展开更多

关键词 水稻 金属硫蛋白基因启动子 金属响应 结合实验

在线阅读 下载PDF 职称材料

不结球白菜金属硫蛋白基因的克隆及表达分析 被引量：2

6

作者 刘东让 侯喜林 +1 位作者 张昌伟 肖栋 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期2207-2214,共8页

通过RACE技术,从不结球白菜抗病品种‘苏州青’叶片克隆到金属硫蛋白(metallothionein)基因的全长cDNA序列(BcMT2)。序列分析结果表明,BcMT2基因的cDNA全长为528bp,其中开放阅读框长度为243bp,共编码80个氨基酸,相对分子质量为8.02×... 通过RACE技术,从不结球白菜抗病品种‘苏州青’叶片克隆到金属硫蛋白(metallothionein)基因的全长cDNA序列(BcMT2)。序列分析结果表明,BcMT2基因的cDNA全长为528bp,其中开放阅读框长度为243bp,共编码80个氨基酸,相对分子质量为8.02×10^(3 )Da,理论等电点是4.61。氨基酸同源系统进化分析表明,不结球白菜BcMT2基因属于Ⅱ类植物MT2基因家族,且与同科植物的进化关系相近,其中与大白菜第5号染色体的基因(Bra029765)相似性最高(100%)。qRT-PCR分析表明,BcMT2基因在不结球白菜叶中表达最强;霜霉病菌诱导后,BcMT2基因在抗病品种‘苏州青’中的表达量于48h达到峰值,而在感病品种‘矮脚黄’中的表达量于72h达到峰值;盐处理条件下,BcMT2基因在抗病品种‘苏州青’中的表达量于12h达到峰值,而在感病品种‘矮脚黄’中的表达量于24h达到峰值;ABA处理下,‘苏州青’中其表达量于24h达到峰值,且在‘矮脚黄’中BcMT2基因的表达趋势与‘苏州青’类似;干旱处理条件下BcMT2基因的表达在两材料中均受到抑制。BcMT2原核表达分析发现,在37℃、1.0mmol·L^(-1)IPTG诱导2、4、6h后,均检测到了一条蛋白分子质量约为8×10^(3 )Da的表达特异条带,这与预期融合蛋白的相对分子质量的理论值8.02×10^(3 )Da相符。研究表明,不结球白菜BcMT2基因在受到生物胁迫和非生物胁迫等逆境条件下均发挥着重要作用,且BcMT2在大肠杆菌中成功实现融合表达,为进一步进行蛋白水平和转基因功能研究奠定了基础,也为选育高产、优质的不结球白菜新品种提供重要的理论依据。 展开更多

关键词 不结球白菜 金属硫蛋白基因 QRT-PCR 原核表达

在线阅读 下载PDF 职称材料

枣金属硫蛋白基因原核表达载体的构建 被引量：6

7

作者 韩彩云 曹秋芬 +1 位作者 马青兰 孟玉平 《太原理工大学学报》 CAS 北大核心 2009年第4期388-390,共3页

以从枣树生长早期结果枝cDNA小规模测序获得的含2型金属硫蛋白基因的重组质粒pSPORT1-MT为模板,用PCR方法扩增出MT基因241bp特异片段,将其亚克隆入pBlue-scriptⅡSK-T载体,用限制性内切酶BamHⅠ和HindⅢ分别酶切重组pBluescriptⅡSK-T... 以从枣树生长早期结果枝cDNA小规模测序获得的含2型金属硫蛋白基因的重组质粒pSPORT1-MT为模板,用PCR方法扩增出MT基因241bp特异片段,将其亚克隆入pBlue-scriptⅡSK-T载体,用限制性内切酶BamHⅠ和HindⅢ分别酶切重组pBluescriptⅡSK-T质粒和原核表达载体pET28a,然后将MT基因片段和表达载体pET28a通过T4DNA连接酶进行定向连接,用限制性内切酶BamHⅠ和HindⅢ酶切和PCR方法双重鉴定重组表达质粒。以pSPORT1-MT为模板扩增出大小为241 bp的片段,此片段与pBluescriptⅡSK-T载体连接后得到了亚克隆pBluescriptIⅡSK-MT载体,酶切回收了目的片段MT后,再次pET28a连接,得到了pET28a-MT原核表达载体。该重组表达载体经BamHⅠ和HindⅢ双酶切后,切出了235bp的目的片段,证明MT基因原核表达载体构建成功。 展开更多

关键词 金属硫蛋白基因 原核表达载体 构建

在线阅读 下载PDF 职称材料

水稻金属硫蛋白基因(rgMT)遗传转化的紫花苜蓿耐盐性分析 被引量：6

8

作者 徐畅 何好 +1 位作者 李国良 金淑梅 《草业科学》 CAS CSCD 2018年第4期829-838,共10页

采用根癌农杆菌介导法将从水稻(Oryza sativa)中克隆出的一个金属硫蛋白基因(rgMT)转化到紫花苜蓿(Medicago sativa)品种"农菁1号"中,经PCR和Northern blot技术对获得的抗性植株进行了检测,证明rgMT基因已整合到苜蓿基因组中... 采用根癌农杆菌介导法将从水稻(Oryza sativa)中克隆出的一个金属硫蛋白基因(rgMT)转化到紫花苜蓿(Medicago sativa)品种"农菁1号"中,经PCR和Northern blot技术对获得的抗性植株进行了检测,证明rgMT基因已整合到苜蓿基因组中并在转基因植株中转录表达。以野生型苜蓿为对照,对获得的转基因苜蓿株系在不同浓度NaCl、NaHCO3胁迫下的表型和生理指标测定发现,NaCl、NaHCO3胁迫处理后,野生型苜蓿受胁迫严重甚至死亡,转基因苜蓿受胁迫较轻。转基因苜蓿的脯氨酸含量和超氧化物歧化酶活性显著高于野生型(P<0.05),细胞膜透性显著低于野生型,野生型苜蓿叶片中积累的过氧化氢高于转基因苜蓿的叶片中积累的过氧化氢。研究结果表明,rgMT基因已在苜蓿中表达,并且提高了转基因苜蓿的耐盐性。 展开更多

关键词 水稻金属硫蛋白基因 紫花苜蓿 遗传转化 生理指标 耐盐性 过氧化氢

在线阅读 下载PDF 职称材料

黄河鲤金属硫蛋白基因的克隆及表达分析

9

作者 左鹏举 王春秀 高春生 《江西农业学报》 CAS 2016年第8期66-69,共4页

采用RT-PCR方法克隆获得黄河鲤（Cyprinus carpio）金属硫蛋白基因的编码区（CDS）序列,该序列长183bp,编码60个氨基酸,不含芳香族氨基酸,其中20个半胱氨酸（Cys）集中分布在肽链的N端和C端,具有MT典型的Cys-X（1～3个）-Cys结构,预测... 采用RT-PCR方法克隆获得黄河鲤（Cyprinus carpio）金属硫蛋白基因的编码区（CDS）序列,该序列长183bp,编码60个氨基酸,不含芳香族氨基酸,其中20个半胱氨酸（Cys）集中分布在肽链的N端和C端,具有MT典型的Cys-X（1～3个）-Cys结构,预测分子量为6013 D,理论等电点为8.38。经多序列比对,黄河鲤与高身鲫（Carassius cuvieri）的同源性最高,达94%。采用RT-q PCR进行黄河鲤MT的组织表达分析,结果表明：黄河鲤MT基因的表达存在组织性差异,其相对表达量表现为肝脏〉肾脏〉腮〉脑〉肌肉。 展开更多

关键词 金属硫蛋白基因 黄河鲤 实时荧光定量 表达分析

在线阅读 下载PDF 职称材料

人源类金属硫蛋白能促进番茄幼苗对锌的积累

10

作者 宋小梅 陈梦莹 +5 位作者 秦小冬 金新开 李金华 潘宇 苏承刚 张兴国 《西南大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期30-35,共6页

金属硫蛋白具有抗辐射、抗氧化和对重金属解毒等功能,对Zn^(2+)具有很强的结合能力,在医药、农业、环境和保健等诸多领域有潜在的应用价值.将花椰菜花叶病毒35S启动子控制的人源类金属硫蛋白基因HsMT1L导入番茄基因组,结果显示,转基因... 金属硫蛋白具有抗辐射、抗氧化和对重金属解毒等功能,对Zn^(2+)具有很强的结合能力,在医药、农业、环境和保健等诸多领域有潜在的应用价值.将花椰菜花叶病毒35S启动子控制的人源类金属硫蛋白基因HsMT1L导入番茄基因组,结果显示,转基因番茄幼苗比野生型材料对Zn^(2+)具有更强的耐受性,并能够富集更多的Zn^(2+)离子. 展开更多

关键词 人源类金属硫蛋白基因 番茄 幼苗 锌

在线阅读 下载PDF 职称材料

厚壳贻贝(Mytilus coruscus)金属硫蛋白MT-10:cDNA克隆、结构分析及铜离子胁迫下的表达 被引量：7

11

作者 王昊盛 宋鑫金 +5 位作者 董文强 吴斌 陈永霞 卢玮筱 祁鹏志 郭宝英 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期864-869,共6页

近年来我国沿海海域重金属污染日趋严重,软体动物尤其是双壳贝类响应重金属污染胁迫的研究发展成为目前的研究热点。金属硫蛋白是一类广泛存在于生物体内富含半胱氨酸(Cys)的小分子蛋白,具有结合金属离子的能力,能有效调节生物体细胞内... 近年来我国沿海海域重金属污染日趋严重,软体动物尤其是双壳贝类响应重金属污染胁迫的研究发展成为目前的研究热点。金属硫蛋白是一类广泛存在于生物体内富含半胱氨酸(Cys)的小分子蛋白,具有结合金属离子的能力,能有效调节生物体细胞内的金属离子平衡,具有清除自由基,重金属解毒的功能,关于厚壳贻贝MT蛋白的研究尚未见报道。本文首次利用RT-PCR和c DNA末端快速扩增技术克隆了厚壳贻贝MT-10蛋白c DNA全长(Mc-MT-10),其包含101bp的5′UTR区,108bp的3′UTR区以及222bp的ORF区,编码73个氨基酸。经比对发现Mc-MT-10富含Cys,且具有9个软体动物中常见的CXC结构以及CKCXXXCXCX结构,系统进化树中同科或属中MT-10聚合成一个分支,显示出高度保守性。采用Q-PCR技术分析了MT-10 mRNA在Cu^(2+)胁迫下厚壳贻贝外套膜及消化腺中表达变化,结果表明Mc-MT-10 mRNA在Cu^(2+)胁迫下两种组织中的表达量急剧升高,说明Cu^(2+)能够诱导Mc-MT-10 mRNA的表达,并且表现出诱导具有阈值性特点。研究结果可为深入研究厚壳贻贝MT蛋白的功能奠定基础,为厚壳贻贝抗重金属污染新品种选育提供数据支持。 展开更多

关键词 厚壳贻贝 金属硫蛋白基因 荧光定量PCR 铜胁迫

在线阅读 下载PDF 职称材料

牦牛MT-3基因生物信息学分析

12

作者 李洁 王建福 《甘肃农业科技》 2018年第2期58-62,共5页

利用生物基因组学数据库,对牦牛金属硫蛋白3基因进行生物信息学分析,从而预测MT-3基因编码产物的理化性质以及功能结构域,并构建MT-3同源基因的系统进化树。结果表明,牦牛MT-3基因含有1个513 bp的ORF,编码170个氨基酸。MT-3蛋白分子质... 利用生物基因组学数据库,对牦牛金属硫蛋白3基因进行生物信息学分析,从而预测MT-3基因编码产物的理化性质以及功能结构域,并构建MT-3同源基因的系统进化树。结果表明,牦牛MT-3基因含有1个513 bp的ORF,编码170个氨基酸。MT-3蛋白分子质量约为17 556.37 Da,理论等电点为5.68。MT-3编码产物的二级结构主要以β折叠和无规则卷曲为主,推测是非酶类蛋白质。MT-3具有神经生长抑制活性,通过清除自由基和NO,从而起到保护脑细胞的作用。 展开更多

关键词 牦牛 金属硫蛋白3基因 生物信息学分析

在线阅读 下载PDF 职称材料

应用HMG和FSH对山羊超排效果的分析 被引量：4

13

作者 胡伟 陈美珏 +1 位作者 黄英 黄淑帧 《上海畜牧兽医通讯》 2007年第6期30-31,共2页

关键词 超排效果 应用 山羊 FSH HMG 金属硫蛋白基因 转基因小鼠 生长激素

在线阅读 下载PDF 职称材料