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黄单胞杆菌纤维素酶的原核表达及固定化研究
1
作者
王开胜
梁如冰
+2 位作者
刘喜朋
刘建华
邵志峰
《浙江农业学报》
CSCD
北大核心
2012年第2期290-294,共5页
从野油菜黄单胞杆菌(Xanthomonas campestris pv.Campestris)中PCR克隆得到删除信号肽的纤维素酶基因engXCAΔSP,并成功使用CPEC(circular polymerase extension cloning)方法构建了原核表达载体pET28a-engXCAΔSP;将该载体转入大肠杆菌...
从野油菜黄单胞杆菌(Xanthomonas campestris pv.Campestris)中PCR克隆得到删除信号肽的纤维素酶基因engXCAΔSP,并成功使用CPEC(circular polymerase extension cloning)方法构建了原核表达载体pET28a-engXCAΔSP;将该载体转入大肠杆菌rosetta(DE3)中,用IPTG诱导蛋白质的表达;通过Ni-NTA树脂非变性亲和纯化到了较纯的蛋白。SDS-PAGE电泳结果表明:engXCAΔSP基因编码出约50 kD的蛋白质ENGXCAΔSP。然后对该酶成功进行了固定化。该酶比活为60 U.mg-1,固定前后最适温度为53℃与62℃,最适pH为5.4与5.8,动力学常数分别为Vmax:411μmol.mL-1.h-1与383μmol.mL-1.h-1,Km:0.2500%与0.3125%。
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关键词
野油菜黄单胞杆菌
内切葡聚糖酶
原核表达系统
固定化酶
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职称材料
芒果细菌性黑斑病菌在不同场所的存活期
被引量：
3
2
作者
漆艳香
张贺
+5 位作者
喻群芳
谢艺贤
张欣
陆英
张辉强
蒲金基
《植物保护》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第5期140-144,共5页
选择芒果细菌性黑斑病菌（Xanthomonas campestris pv.mangiferaeindicae ,Xcm）抗利福平菌株 RifXcm,通过人工模拟接种试验,采用半选择性平板分离、菌落 PCR 和常规 PCR 方法,研究该病原细菌在芒果叶片、土壤和水中的存活期,并对其能...
选择芒果细菌性黑斑病菌（Xanthomonas campestris pv.mangiferaeindicae ,Xcm）抗利福平菌株 RifXcm,通过人工模拟接种试验,采用半选择性平板分离、菌落 PCR 和常规 PCR 方法,研究该病原细菌在芒果叶片、土壤和水中的存活期,并对其能否作为侵染源进行了评价。结果表明,芒果细菌性黑斑病菌在芒果叶片病斑内可存活5～6个月,是此病发生最主要的侵染源。病原菌在土壤和自然水中的存活期有限,其中以含芒果残体土壤中的病原菌存活期最长（49～63 d）,但也没有超过3个月,因此年前存在于这些场所的病原菌均不可能成为第2年的初侵染源。
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关键词
芒果细菌性黑斑病
野油菜黄单胞杆菌
芒果致病变种
存活期
侵染源
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职称材料
题名
黄单胞杆菌纤维素酶的原核表达及固定化研究
1
作者
王开胜
梁如冰
刘喜朋
刘建华
邵志峰
机构
上海交通大学系统生物医学研究院
上海交通大学生命科学技术学院
出处
《浙江农业学报》
CSCD
北大核心
2012年第2期290-294,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(30900010)
教育部新教师基金项目(20090073120066)
上海交通大学晨星青年学者奖励计划资助
文摘
从野油菜黄单胞杆菌(Xanthomonas campestris pv.Campestris)中PCR克隆得到删除信号肽的纤维素酶基因engXCAΔSP,并成功使用CPEC(circular polymerase extension cloning)方法构建了原核表达载体pET28a-engXCAΔSP;将该载体转入大肠杆菌rosetta(DE3)中,用IPTG诱导蛋白质的表达;通过Ni-NTA树脂非变性亲和纯化到了较纯的蛋白。SDS-PAGE电泳结果表明:engXCAΔSP基因编码出约50 kD的蛋白质ENGXCAΔSP。然后对该酶成功进行了固定化。该酶比活为60 U.mg-1,固定前后最适温度为53℃与62℃,最适pH为5.4与5.8,动力学常数分别为Vmax:411μmol.mL-1.h-1与383μmol.mL-1.h-1,Km:0.2500%与0.3125%。
关键词
野油菜黄单胞杆菌
内切葡聚糖酶
原核表达系统
固定化酶
Keywords
Xanthomonas campestris pv.Campestris
endo-β-1
4-D-glucanase EC 3.2.1.4
prokaryotic expression
immobilized enzyme
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
芒果细菌性黑斑病菌在不同场所的存活期
被引量：
3
2
作者
漆艳香
张贺
喻群芳
谢艺贤
张欣
陆英
张辉强
蒲金基
机构
中国热带农业科学院环境与植物保护研究所
出处
《植物保护》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第5期140-144,共5页
基金
海南省自然科学基金(313082)
中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金(2014hzs1J007-2)
文摘
选择芒果细菌性黑斑病菌（Xanthomonas campestris pv.mangiferaeindicae ,Xcm）抗利福平菌株 RifXcm,通过人工模拟接种试验,采用半选择性平板分离、菌落 PCR 和常规 PCR 方法,研究该病原细菌在芒果叶片、土壤和水中的存活期,并对其能否作为侵染源进行了评价。结果表明,芒果细菌性黑斑病菌在芒果叶片病斑内可存活5～6个月,是此病发生最主要的侵染源。病原菌在土壤和自然水中的存活期有限,其中以含芒果残体土壤中的病原菌存活期最长（49～63 d）,但也没有超过3个月,因此年前存在于这些场所的病原菌均不可能成为第2年的初侵染源。
关键词
芒果细菌性黑斑病
野油菜黄单胞杆菌
芒果致病变种
存活期
侵染源
Keywords
mango bacterial black spot
Xanthomonas campestris pv.mangiferaeindicae
survival period
in-fection source
分类号
S436.67 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
黄单胞杆菌纤维素酶的原核表达及固定化研究
王开胜
梁如冰
刘喜朋
刘建华
邵志峰
《浙江农业学报》
CSCD
北大核心
2012
0
在线阅读
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职称材料
2
芒果细菌性黑斑病菌在不同场所的存活期
漆艳香
张贺
喻群芳
谢艺贤
张欣
陆英
张辉强
蒲金基
《植物保护》
CAS
CSCD
北大核心
2015
3
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已选择
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