传统饲用抗生素在畜禽口粮中应用为畜牧业的快速发展起了重要的推动作用。但是，随着饲用抗生素的大量使用，饲用抗生素的耐药性与药残等负面影响也逐渐突出，寻找合适的活性物质来替代饲用抗生素已成为当前国内外研究的热点。防御素是...传统饲用抗生素在畜禽口粮中应用为畜牧业的快速发展起了重要的推动作用。但是，随着饲用抗生素的大量使用，饲用抗生素的耐药性与药残等负面影响也逐渐突出，寻找合适的活性物质来替代饲用抗生素已成为当前国内外研究的热点。防御素是生物机体特定基因编码产生的一类阳离子抗菌活性多肽，不仅对细菌、真菌、病毒、支原体、衣原体、螺旋体具有杀伤活性，同时还在免疫调节等方面起着重要作用（Lynnetal，2007；Lehrer et al,1999）。展开更多
目的:探讨重组腺病毒载体在真核细胞中稳定表达阳离子抗菌肽——β-防御素2的可行性。方法:采用RT-PCR方法扩增得到大鼠β-防御素2(rBD 2)基因片段,定向插入到腺病毒穿梭质粒pShuttle-CMV中,重组质粒pShuttle-CMV-rBD 2转化E.coli B J51...目的:探讨重组腺病毒载体在真核细胞中稳定表达阳离子抗菌肽——β-防御素2的可行性。方法:采用RT-PCR方法扩增得到大鼠β-防御素2(rBD 2)基因片段,定向插入到腺病毒穿梭质粒pShuttle-CMV中,重组质粒pShuttle-CMV-rBD 2转化E.coli B J5183-AD-1后,与腺病毒基因组质粒pA dE asy-1发生同源重组,重组质粒pA dE asy-rBD 2转染293细胞进行腺病毒表达载体的包装。将包装成功的腺病毒感染cos-7细胞,并建立SD大鼠腺病毒感染模型,进行β-防御素2多肽的体外和体内表达,采用W estern b lot与免疫组化方法检测其表达。结果:重组腺病毒表达载体构建成功,包含大鼠β-防御素2基因,滴度达到109PFU/m l,W estern b lot与免疫组化方法分别检测到β-防御素2在SD大鼠体外、体内的表达。结论:重组腺病毒载体能在真核细胞中稳定表达阳离子抗菌肽——β-防御素2。展开更多
文摘传统饲用抗生素在畜禽口粮中应用为畜牧业的快速发展起了重要的推动作用。但是，随着饲用抗生素的大量使用，饲用抗生素的耐药性与药残等负面影响也逐渐突出，寻找合适的活性物质来替代饲用抗生素已成为当前国内外研究的热点。防御素是生物机体特定基因编码产生的一类阳离子抗菌活性多肽，不仅对细菌、真菌、病毒、支原体、衣原体、螺旋体具有杀伤活性，同时还在免疫调节等方面起着重要作用（Lynnetal，2007；Lehrer et al,1999）。
文摘目的:探讨重组腺病毒载体在真核细胞中稳定表达阳离子抗菌肽——β-防御素2的可行性。方法:采用RT-PCR方法扩增得到大鼠β-防御素2(rBD 2)基因片段,定向插入到腺病毒穿梭质粒pShuttle-CMV中,重组质粒pShuttle-CMV-rBD 2转化E.coli B J5183-AD-1后,与腺病毒基因组质粒pA dE asy-1发生同源重组,重组质粒pA dE asy-rBD 2转染293细胞进行腺病毒表达载体的包装。将包装成功的腺病毒感染cos-7细胞,并建立SD大鼠腺病毒感染模型,进行β-防御素2多肽的体外和体内表达,采用W estern b lot与免疫组化方法检测其表达。结果:重组腺病毒表达载体构建成功,包含大鼠β-防御素2基因,滴度达到109PFU/m l,W estern b lot与免疫组化方法分别检测到β-防御素2在SD大鼠体外、体内的表达。结论:重组腺病毒载体能在真核细胞中稳定表达阳离子抗菌肽——β-防御素2。
