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抗鸡传染性喉气管炎重组鸡痘病毒基因工程疫苗同居感染试验 被引量：7
1
作者 王云峰 智海东 +6 位作者 王玫 孙永科 仇华吉 周艳君 田志军 张绍杰 童光志 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期51-54,共4页
疫苗的接触传播是疫苗免疫接种需要考虑的重要因素,为了检测重组鸡痘病毒载体疫苗水平传播的能力,对隔离条件下饲养的SPF鸡用重组鸡痘病毒基因工程疫苗接种,同时设立非免疫对照鸡,饲养期间特意延长清粪时间以增加感染的机会,1个月之后... 疫苗的接触传播是疫苗免疫接种需要考虑的重要因素,为了检测重组鸡痘病毒载体疫苗水平传播的能力,对隔离条件下饲养的SPF鸡用重组鸡痘病毒基因工程疫苗接种,同时设立非免疫对照鸡,饲养期间特意延长清粪时间以增加感染的机会,1个月之后攻击传染性喉气管炎WG株强毒和鸡痘102株强毒,疫苗免疫鸡全部获得保护,而非免疫鸡则全部发病。在试验动物饲养场的自然条件下,将免疫鸡和试验对照两组鸡饲养在同一个鸡舍内,让疫苗毒的传播更接近自然条件。在每个月的攻毒试验中,对照鸡都没有获得对鸡痘和传染性喉气管炎强毒的保护。在疫苗免疫期间进行连续5个月的跟踪检测,同居未免疫鸡没有检测到抗传染性喉气管炎病毒gB抗体。这些实验结果表明抗鸡传染性喉气管炎重组鸡痘病毒基因工程疫苗不能通过接触传播。 展开更多
关键词 传染性喉气管炎病毒 鸡痘病毒 抗鸡传染性喉气管炎重组鸡痘病毒基因工程疫苗 同居感染试验 免疫接种
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抗传染性喉气管炎重组鸡痘病毒基因工程疫苗 被引量：3
2
作者 王云峰 智海东 +4 位作者 王玫 仇华吉 周艳君 田志军 童光志 《畜牧兽医科技信息》 2003年第8期4-7,共4页
前言 1925年鸡传染性喉气管炎(Infectious Laryngotracheitis,ILT)首次发生于美国洛岛,是鸡的一种病毒性呼吸道传染病,该病可引起鸡死亡和产蛋下降,目前在多数国家仍有流行,对养禽业造成了严重的危害.疫苗接种是防制本病的一条切实可行... 前言 1925年鸡传染性喉气管炎(Infectious Laryngotracheitis,ILT)首次发生于美国洛岛,是鸡的一种病毒性呼吸道传染病,该病可引起鸡死亡和产蛋下降,目前在多数国家仍有流行,对养禽业造成了严重的危害.疫苗接种是防制本病的一条切实可行的措施.目前,国内外用于预防ILT的都是中强毒力的活疫苗,这些疫苗毒力普遍偏强,接种后反应大.这些疫苗与强毒株一样也能导致持续感染,在鸡体间传播可使毒力返强,使免疫鸡群有可能成为潜在的传染源.而且疫苗免疫后没有一个有效的诊断方法以区别免疫鸡和自然感染鸡,因此,这些疫苗只能限于在传染性喉气管炎流行地区使用. 展开更多
关键词 鸡 传染性喉气管炎 重组鸡痘病毒基因工程疫苗 母源抗体 免疫效力 保存期
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1日龄雏鸡免疫鸡传染性喉气管炎重组鸡痘病毒基因工程疫苗安全性及效力的研究 被引量：3
3
作者 高晓磊 韩明宝 +5 位作者 刘思桐 赵丽霞 朱秀同 刘浩 郁宏伟 谢康 《中国动物保健》 2019年第4期57-58,共2页
将鸡传染性喉气管炎重组鸡痘病毒基因工程疫苗以皮下注射和皮下刺种2种不同免疫途径免疫1日龄雏鸡,评价其安全性和效力。以10羽份/只剂量接种后,两组鸡均未观察到全身反应。以1羽份/只剂量接种后28d攻毒,两种免疫方式均可以使免疫鸡产... 将鸡传染性喉气管炎重组鸡痘病毒基因工程疫苗以皮下注射和皮下刺种2种不同免疫途径免疫1日龄雏鸡,评价其安全性和效力。以10羽份/只剂量接种后,两组鸡均未观察到全身反应。以1羽份/只剂量接种后28d攻毒,两种免疫方式均可以使免疫鸡产生较强免疫力,能够抵抗传染性喉气管炎病毒(ILTV)WG株强毒和鸡痘病毒(FPV)102株的攻击。以上结果显示,鸡传染性喉气管炎重组鸡痘病毒基因工程疫苗以皮下注射和皮下刺种2种不同途径免疫1日龄雏鸡,具有良好的安全性和有效性。 展开更多
关键词 1日龄雏鸡 鸡传染性喉气管炎重组鸡痘病毒基因工程疫苗 安全性 效力
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鸡传染性喉气管炎重组鸡痘病毒基因工程疫苗冻干工艺探索 被引量：1
4
作者 胡江锋 吕永钢 崔卓宇 《家禽科学》 2020年第12期43-46,共4页
为筛选出理想的鸡传染性喉气管炎重组鸡痘病毒基因工程疫苗的冻干工艺,保证疫苗产品质量及免疫效果,更好地服务于畜牧业。本试验从冻干保护剂配方与冻干曲线入手,将含有0.8%、1.0%、1.2%、1.5%的明胶5%蔗糖保护剂分别与表达鸡传染性喉... 为筛选出理想的鸡传染性喉气管炎重组鸡痘病毒基因工程疫苗的冻干工艺,保证疫苗产品质量及免疫效果,更好地服务于畜牧业。本试验从冻干保护剂配方与冻干曲线入手,将含有0.8%、1.0%、1.2%、1.5%的明胶5%蔗糖保护剂分别与表达鸡传染性喉气管炎病毒gB基因的重组鸡痘病毒(rFPV_ILTVgB)抗原按规定配比,分别在21、24.5、28 h的冻干曲线下完成冻干,并对冻干后的制品检测其效价、真空度、剩余水分及物理性状。结果表明,有1.0%明胶5%蔗糖保护剂24.5 h或28 h冻干曲线和1.2%明胶5%蔗糖保护剂28 h的冻干曲线三种冻干工艺,其制品效价、真空度、剩余水分、物理性状均符合标准。因而采用1.0%明胶5%蔗糖的保护剂配方及24.5 h的冻干曲线是该制品较为理想的冻干工艺。 展开更多
关键词 鸡传染性喉气管炎重组鸡痘病毒基因工程疫苗 保护剂配方 冻干曲线
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单表达和共表达NDVF和HN基因重组鸡痘病毒活疫苗的免疫效力比较试验 被引量：6
5
作者 甘军纪 田志鹏 +3 位作者 陶鸽 陈素娟 彭大新 刘秀梵 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期790-794,共5页
为评价母源抗体对抗新城疫病毒(NDV)重组鸡痘病毒(rFPV)活疫苗免疫效力的影响,本研究用单表达、共表达NDV基因VII型病毒ZJ1株F、HN基因的rFPV活疫苗rFPV-12LSF、rFPV-12LSHN、rFPV-12LSFHN和油乳剂灭活疫苗分别免疫14日龄商品蛋鸡,rFPV... 为评价母源抗体对抗新城疫病毒(NDV)重组鸡痘病毒(rFPV)活疫苗免疫效力的影响,本研究用单表达、共表达NDV基因VII型病毒ZJ1株F、HN基因的rFPV活疫苗rFPV-12LSF、rFPV-12LSHN、rFPV-12LSFHN和油乳剂灭活疫苗分别免疫14日龄商品蛋鸡,rFPV疫苗的免疫剂量均为2×104pfu,免疫后21d分别用106ELD50NDV不同强毒株攻毒。其中F48E8株攻毒的免疫保护率分别为30.3%、73.2%、41.1%;而ZJ1株攻毒的免疫保护率分别为89.3%和35.8%、67.9%、78.6%、100%。用表达鸡IL-2基因的rFPV-12LSIL-2与rFPV-12LSHN联合免疫没有提高rFPV-12LSHN疫苗的免疫保护力。试验结果表明,单表达NDV HN基因的rFPV-12LSHN可作为NDV活疫苗候选株,为NDV重组鸡痘病毒活疫苗的进一步应用性开发奠定了基础。 展开更多
关键词 重组鸡痘病毒 F基因 HN基因 疫苗 新城疫
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表达传染性喉气管炎病毒gB基因重组鸡痘病毒疫苗的遗传稳定性评价 被引量：14
6
作者 王云峰 智海东 +5 位作者 王玫 仇华吉 周艳君 田志军 张绍杰 童光志 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期426-429,共4页
为了检测表达鸡传染性喉气管炎病毒糖蛋白gB基因重组鸡痘病毒 (rFPV -ILTVgB)的稳定性 ,我们对重组病毒进行 6代和 16代克隆纯化 ,对纯化后的病毒通过转瓶连续培养传 2 0代。结果发现第 6代纯化病毒 (rFPV -ILTVgB -C6)在传代过程中有... 为了检测表达鸡传染性喉气管炎病毒糖蛋白gB基因重组鸡痘病毒 (rFPV -ILTVgB)的稳定性 ,我们对重组病毒进行 6代和 16代克隆纯化 ,对纯化后的病毒通过转瓶连续培养传 2 0代。结果发现第 6代纯化病毒 (rFPV -ILTVgB -C6)在传代过程中有白斑出现 ,说明病毒纯度不够 ;经过 16代纯化的病毒 (rFPV -ILTVgB -C16)对细胞的嗜性加强 ,病毒的效价进一步升高 ,2 0代传代后蓝斑率仍然为 10 0 % ,PCR的检测进一步证明插入的外源基因能在病毒的长期传代过程中稳定地遗传。抽取病毒细胞传代过程中的第 5 ,10 ,15 ,2 0代次的病毒翅膀内侧无血管处皮下接种 2周龄SPF鸡 ,2 0天后分为两组 ,分别用传染性喉气管炎病毒WG株和鸡痘病毒 10 2株攻击 ,结果不同代次的重组病毒均可以使免疫鸡抵抗传染性喉气管炎病毒和鸡痘病毒强毒的攻击。鸡体内病毒传代试验表明 ,重组病毒在接种部位仅存在 6天 ,之后就检测不到病毒 ,重组病毒通过SPF鸡连续传代 ,不存在病毒返祖的可能。由此可以得出一个结论 ,rFPV -ILTVgB在结构上和免疫原性上是稳定的 ,无论是在体外传代 ,还是在体内均可以稳定遗传 ,不存在因为接种重组疫苗而给免疫鸡群带来安全威胁的可能 ,完全可以作为疫苗毒株进行商品化开发。 展开更多
关键词 传染性喉气管炎病毒 鸡痘 重组鸡痘病毒疫苗 遗传稳定性
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表达传染性喉气管炎病毒gB基因重组鸡痘病毒疫苗的安全性试验与最小免疫剂量测定 被引量：12
7
作者 王云峰 智海东 +5 位作者 王玫 仇华吉 周艳君 田志军 张绍杰 童光志 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期441-444,共4页
将表达鸡传染性喉气管炎病毒糖蛋白gB基因的重组鸡痘病毒 (rFPV_ILTVgB)通过鸡胚成纤维细胞培养 ,加入适当的保护剂制成冻干疫苗。取 3批冻干疫苗 ,生理盐水稀释后分别经翅内侧无血管处皮下接种 14日龄和 5 0日龄SPF鸡 ,接种剂量为 5... 将表达鸡传染性喉气管炎病毒糖蛋白gB基因的重组鸡痘病毒 (rFPV_ILTVgB)通过鸡胚成纤维细胞培养 ,加入适当的保护剂制成冻干疫苗。取 3批冻干疫苗 ,生理盐水稀释后分别经翅内侧无血管处皮下接种 14日龄和 5 0日龄SPF鸡 ,接种剂量为 5× 10 6 PFU ,接种后 3天出现局部反应 ,5天局部肿胀达到最大 ,接种鸡无其它全身反应 ,精神、食欲以及发育等均不受影响 ,说明重组病毒对试验鸡是安全的。取其中的 2 0 0 0 0 3批疫苗 ,用生理盐水作 2 10 -2 ～ 2 10 -5稀释后 ,翅内侧无血管处皮下接种 4 0日龄SPF鸡 ,免疫后 4周分别攻击传染性喉气管炎病毒WG株和鸡痘病毒 10 2株 ,结果表明 ,重组病毒对试验鸡翅内侧皮下接种能产生良好的免疫力 ,在接种剂量为 2 10 -2 ～ 2 10 -40 .1ml/鸡的范围内可以使全部试验鸡产生局部反应 ,当接种剂量为 2 10 -50 .2ml/鸡时可以使部分试验鸡 ( 5 /15 )产生局部反应 ,鸡体对重组疫苗的最小反应剂量为 2 10 -40 .1ml(相当于 10 0 0PFU)。攻毒试验结果进一步证明 ,当接种剂量为 2 10 -40 .1ml(相当于 10 0 0PFU)时可以使免疫鸡产生可靠免疫力 ,抵抗传染性喉气管炎病毒WG株强毒和鸡痘病毒 10 2株的攻击 ,降低鸡群的发病率和病死率。这些结果说明 。 展开更多
关键词 传染性喉气管炎 鸡痘 重组鸡痘病毒疫苗 最小免疫剂量 安全性试验
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H7亚型禽流感病毒血凝素基因重组鸡痘病毒活载体疫苗免疫原性评估 被引量：7
8
作者 马文军 陈化兰 +3 位作者 于康震 张建林 田国彬 唐秀英 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期7-9,共3页
本研究以细胞感染＿转染技术构建了一株表达H7亚型禽流感病毒(AIV)血凝素(HA)基因的重组鸡痘病毒rFPV＿HA。以5×105PFU的rFPV＿HA经翅下刺种免疫8周龄SPF鸡,免疫后第3周用100CID50的HA基因同源AIVA/ArfiStar/Eng＿Q/983/79(H7N1)... 本研究以细胞感染＿转染技术构建了一株表达H7亚型禽流感病毒(AIV)血凝素(HA)基因的重组鸡痘病毒rFPV＿HA。以5×105PFU的rFPV＿HA经翅下刺种免疫8周龄SPF鸡,免疫后第3周用100CID50的HA基因同源AIVA/ArfiStar/Eng＿Q/983/79(H7N1)进行人工感染,1周后采集泄殖腔棉拭子进行病毒分离。免疫后第三周及攻毒后第1、2周对所有动物进行静脉采血,检测血凝抑制(HI)抗体和免疫沉淀(AGP)抗体。结果,攻毒前部分rFPV＿HA免疫鸡可检测到HI抗体,但检测不到AGP抗体,野生型病毒(F017)接种组和空白对照组HI抗体和AGP抗体均为阴性。攻毒后rFPV＿HA免疫组的HI抗体上升速度明显高于野生型病毒接种组和空白对照组。rFPV＿HA免疫组有6/8的鸡为流感病毒分离阴性,野生型病毒接种组和空白对照组的试验鸡病毒分离全部为阳性。结果表明rFPV＿HA可诱导鸡产生有效的免疫保护反应,阻止或降低消化道病毒排泄。rFPV＿HA的成功构建为研制开发H7亚型禽流感活载体疫苗奠定了良好的基础。 展开更多
关键词 禽流感病毒 H7亚型 血凝素基因 重组鸡痘病毒 疫苗 免疫原性评估 免疫保护反应
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表达新城疫病毒F HN基因重组鸡痘病毒疫苗的遗传稳定性和免疫效力试验 被引量：5
9
作者 丁炜东 曹丽萍 +3 位作者 张体银 刘秀梵 张如宽 吴艳涛 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2005年第2期10-14,共5页
关键词 遗传稳定性 免疫效力试验 鸡痘病毒 新城疫病毒 疫苗 NDV HN基因 表达 基因重组 免疫保护作用
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表达马立克氏病病毒CVI988/Rispens株糖蛋白B基因的重组鸡痘病毒疫苗的免疫保护研究 被引量：2
10
作者 彭大新 刘秀梵 +8 位作者 吴长新 吴艳涛 文其乙 高崧 张如宽 吴晓丰 邢力 朱爱华 詹爱军 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期139-145,共7页
用鸡痘病毒载体表达马立克氏病病毒 (MDV)糖蛋白B(gB)基因构建成重组鸡痘病毒 (rF PV)。以MDVGA或Md5和RBIB混合攻毒 ,在不同品种的鸡中评价rFPV -gB/R单价苗和与火鸡疱疹病毒 (HVT)组成的二价苗的免疫保护效力。试验结果表明 ,MDV疫苗... 用鸡痘病毒载体表达马立克氏病病毒 (MDV)糖蛋白B(gB)基因构建成重组鸡痘病毒 (rF PV)。以MDVGA或Md5和RBIB混合攻毒 ,在不同品种的鸡中评价rFPV -gB/R单价苗和与火鸡疱疹病毒 (HVT)组成的二价苗的免疫保护效力。试验结果表明 ,MDV疫苗和FPV母源抗体阴性的SPF鸡和母源抗体阳性的商品鸡中 ,rFDV - gB/R均能提供免疫保护作用 ,且其中一种商品蛋鸡中rFPV - gB/R与HVT液氮苗或HVT冻干苗结合使用 ,均有显著的免疫协同保护作用。免疫学研究指出 ,rFPV -gB/R与常规疫苗一样 ,可显著地降低疫苗免疫攻毒鸡的病毒血症和羽囊排毒。 展开更多
关键词 重组鸡痘病毒 糖蛋白B基因 马立克氏病毒 疫苗 免疫保护
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表达口蹄疫病毒复合多表位基因的重组鸡痘病毒以及DNA疫苗在豚鼠中的免疫原性研究 被引量：1
11
作者 郑敏 金宁一 +5 位作者 尹革芬 夏志平 刘棋 田明尧 贾雷立 李昌 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2005年第11期931-935,共5页
目的评价本课题组构建的共表达FMDV复合多表位基因以及猪白细胞介素18基因的非复制型重组鸡痘病毒活载体疫苗vUTA2-OAT以及DNA疫苗pVRI-OAT诱导FMDV模型动物豚鼠产生特异性体液免疫和细胞免疫的能力。方法将上述2种重组疫苗分别单独或... 目的评价本课题组构建的共表达FMDV复合多表位基因以及猪白细胞介素18基因的非复制型重组鸡痘病毒活载体疫苗vUTA2-OAT以及DNA疫苗pVRI-OAT诱导FMDV模型动物豚鼠产生特异性体液免疫和细胞免疫的能力。方法将上述2种重组疫苗分别单独或联合接种豚鼠,然后测定FMDV特异性结合抗体、中和抗体和T淋巴细胞增殖反应,并用250ID50的FMDV进行攻击,观察其保护效果。结果这2种重组疫苗均能诱导豚鼠产生特异性的体液免疫及细胞免疫应答。其中以pVRI-OAT/vUTA2-OAT的联合免疫方式的效果最好,其诱导的抗体水平接近于常规灭活疫苗,而细胞免疫水平则比后者高得多。攻击保护结果显示3个重组疫苗组均有一定保护效果,完全保护率和部分保护率分别为1/4和2/4。而PBS对照组发病率为4/4。结论证实了这2种重组疫苗在豚鼠体内具有良好的免疫原性。上述研究结果为FMDV基因工程疫苗的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒(FMDV) 重组鸡痘病毒(rFPV) DNA疫苗 免疫应答
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表达鸡马立克氏病病毒糖蛋白B基因重组鸡痘病毒毒种的纯净性检验及冻干疫苗的保存期测定 被引量：1
12
作者 卢军 胡传伟 +3 位作者 金乔 刘武杰 彭大新 刘秀梵 《中国兽药杂志》 2010年第9期1-3,共3页
为了检测高效表达鸡马立克氏病病毒gB基因的重组鸡痘病毒(rFPV-gB/R)的纯净性,对纯化后的0代重组病毒毒种进行了细菌和支原体检验;并对中间试制的冻干疫苗在-20℃保存期进行了测定。结果表明,重组病毒毒种高度纯净,没有污染任何细菌或... 为了检测高效表达鸡马立克氏病病毒gB基因的重组鸡痘病毒(rFPV-gB/R)的纯净性,对纯化后的0代重组病毒毒种进行了细菌和支原体检验;并对中间试制的冻干疫苗在-20℃保存期进行了测定。结果表明,重组病毒毒种高度纯净,没有污染任何细菌或支原体,符合新制品制造和检验规程申报的要求;中试冻干疫苗在-20℃保存了12个月,病毒含量始终大于109PFU/mL,疫苗保存期可达12个月。 展开更多
关键词 鸡马立克氏病 GB基因 重组鸡痘病毒 纯净性检验 保存期
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鸡痘病毒载体多价基因工程疫苗及禽流感等亚单位疫苗研制
13
作者 王云峰 《中国农村科技》 2006年第8期56-56,共1页
关键词 禽流感病毒 疫苗研制 鸡痘病毒 基因工程疫苗 病毒载体 亚单位 传染性支气管炎病毒 传染性喉气管炎病毒 多价 免疫保护效果
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鸡新城疫病毒F基因和鸡IL-2重组DNA疫苗的构建 被引量：53
14
作者 姜永厚 陈奖励 +3 位作者 宋秀龙 童光志 孔宪刚 刘忠贵 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期81-84,共4页
利用已克隆到的新城疫D2 6株F基因和鸡IL_2基因 ,经过载体改建 ,将他们共同克隆于真核表达质粒pCDNA3上 ,经酶切分析、PCR鉴定证实成功构建了共表达鸡新城疫病毒F基因和鸡IL_2的重组质粒 。
关键词 新城疫 F基因 鸡IL-2 重组DNA疫苗
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共表达鸡IL-6和H5亚型禽流感病毒HA基因重组鸡痘病毒免疫抗体消长规律及免疫效力研究 被引量：4
15
作者 陈素娟 丁彦红 +3 位作者 钱程 柴茂 彭大新 刘秀梵 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期596-601,共6页
为评价共表达鸡IL-6和H5亚型禽流感病毒HA基因重组鸡痘病毒(rFPV-AIH5AIL6)的免疫抗体消长规律及免疫效力,将重组病毒通过颈部皮下注射和翅部皮下注射2种不同的免疫途径来免疫鸡群,结果发现,2种免疫途径中,重组鸡痘病毒对鸡体质量增加... 为评价共表达鸡IL-6和H5亚型禽流感病毒HA基因重组鸡痘病毒(rFPV-AIH5AIL6)的免疫抗体消长规律及免疫效力,将重组病毒通过颈部皮下注射和翅部皮下注射2种不同的免疫途径来免疫鸡群,结果发现,2种免疫途径中,重组鸡痘病毒对鸡体质量增加均无影响,而野生型鸡痘病毒均可抑制鸡体质量增加。翅部皮下注射疫苗组能够产生较高的血凝抑制(HI)抗体水平,免疫21d后抗体水平达到高峰,28d后开始下降,49d时仍保持在一定的水平。免疫SPF鸡21d后攻毒,表明该重组病毒能使经滴鼻攻毒的SPF鸡抵抗H5亚型AIV的致死性攻击,保护率为95%,与油苗组相同,与单表达H5亚型禽流感病毒HA基因重组鸡痘病毒组(40%)差异显著;攻毒后3、5、7d采集喉头、泄殖腔棉拭子检测排毒情况,结果发现第3天排毒率最高,其中rFPV-AIH5AIL6免疫组排毒率为最低,显示IL-6在rFPV-AIH5IL6免疫过程中起到了免疫佐剂的作用,这为研制新型的禽流感重组鸡痘病毒疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 禽流感病毒 HA基因 鸡IL-6 重组鸡痘病毒 佐剂
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口蹄疫病毒重组鸡痘病毒活载体疫苗和DNA疫苗免疫牛的试验研究 被引量：4
16
作者 郑敏 金宁一 +6 位作者 秦晓冰 金扩世 刘棋 田明尧 郭建顺 徐敬龙 李昌 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期158-162,共5页
将本课题组构建的共表达FMDV衣壳蛋白前体P1-2A基因以及蛋白酶3C基因的重组鸡痘病毒活载体疫苗vUTAL3CP1以及共表达P1-2A和猪白介素18基因的重组DNA疫苗(pVIRIL18P1),分别以单独及混合的共3种方式接种牛,然后通过间接ELISA、中和试验和... 将本课题组构建的共表达FMDV衣壳蛋白前体P1-2A基因以及蛋白酶3C基因的重组鸡痘病毒活载体疫苗vUTAL3CP1以及共表达P1-2A和猪白介素18基因的重组DNA疫苗(pVIRIL18P1),分别以单独及混合的共3种方式接种牛,然后通过间接ELISA、中和试验和T淋巴细胞增殖试验评价其诱导的特异性体液和细胞免疫水平。结果表明这2种基因工程疫苗均能诱导牛产生特异性的体液及细胞免疫应答。其中重组鸡痘病毒vUTAL3CP1免疫组以及联合免疫组(vUTAL3CP1/pVIRIL18P1,pVIRIL18P1/vUTAL3CP1)诱导的中和抗体滴度分别达到1∶64、1∶64和1∶54,已接近于常规灭活疫苗水平(1∶90),而特异性的T淋巴细胞增殖反应则比后者高得多(P<0.01)。该研究结果为进一步进行免疫攻毒试验,并最终筛选出最佳疫苗和免疫程序奠定了基础。 展开更多
关键词 口蹄疫 重组鸡痘病毒 DNA疫苗 体液免疫 细胞免疫
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共表达FMDV P1-2A和3C重组鸡痘病毒疫苗与核酸疫苗的实验免疫研究 被引量：4
17
作者 张洪勇 金宁一 +4 位作者 葛淑敏 尹革芬 郑敏 李子健 江文正 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2004年第8期20-23,共4页
将口蹄疫病毒(FMDV)衣壳蛋白前体P1-2A基因和蛋白酶3C基因分别插入到鸡痘病毒表达载体质粒pUTA-16Lac Z的复合启动子和单一启动子的下游，构建共表达重组鸡痘病毒转移载体质粒pUTAL3CP1，与282E4株FPV共转染鸡胚成纤维细胞，经RT-PCR、... 将口蹄疫病毒(FMDV)衣壳蛋白前体P1-2A基因和蛋白酶3C基因分别插入到鸡痘病毒表达载体质粒pUTA-16Lac Z的复合启动子和单一启动子的下游，构建共表达重组鸡痘病毒转移载体质粒pUTAL3CP1，与282E4株FPV共转染鸡胚成纤维细胞，经RT-PCR、IFA及Western blotting检测，成功获得能正确表达目的蛋白的重组鸡痘病毒株vU-TAL3CP1。并与FMDV重组核酸疫苗免疫小鼠实验表明，各实验免疫组均能诱导小鼠产生特异性的细胞免疫和体液免疫反应，其中以重组鸡痘病毒与核酸疫苗联合免疫效果好于其它实验各组。 展开更多
关键词 FMDV 重组鸡痘病毒疫苗 重组核酸疫苗 免疫原性 口蹄疫病毒
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表达新城疫病毒HN基因重组鸡痘病毒的构建及其抑瘤作用 被引量：5
18
作者 李雪梅 金宁一 +4 位作者 李霄 连海 管国芳 孙丽丽 陈立刚 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2006年第2期112-115,共4页
目的：构建表达新城疫病毒(newcastle disease virus,NDV)HN基因的重组鸡痘病毒vFVHN,探讨vFVHN对体外培养人肝癌细胞SMMC7721的抑制作用和对小鼠荷肝癌模型的体内抑瘤效果。方法：以野生型鸡痘病毒(fowl poxvirus,FPV)282 E4株为载体,... 目的：构建表达新城疫病毒(newcastle disease virus,NDV)HN基因的重组鸡痘病毒vFVHN,探讨vFVHN对体外培养人肝癌细胞SMMC7721的抑制作用和对小鼠荷肝癌模型的体内抑瘤效果。方法：以野生型鸡痘病毒(fowl poxvirus,FPV)282 E4株为载体,构建表达新城疫病毒HN基因的重组鸡痘病毒vFVHN。采用5-溴-2-脱氧尿苷(5-bromo-2-deoxyribouri- dine,BrdU)加压法筛选重组体,并通过RT-PCR和Western blot等方法对其进行鉴定。采用噻唑蓝(methylthiazoletetrazolium,MTT)染色法检测vFVHN对人肝癌细胞SMMC7721的杀伤率,并通过检测抑瘤率观察其在C57BL/6小鼠荷肝癌模型的抑瘤效果。结果：成功构建重组鸡痘病毒vFVHN,其对SMMC7721细胞的杀伤率为43．37%,对C57BL/6小鼠肝癌模型的抑瘤率为20．65%。结论：重组鸡痘病毒vFVHN可有效杀伤体外培养的人肝癌细胞SMMC7721,并对C57BL/6小鼠荷肝癌模型体内的实体肿瘤有一定抑制作用。 展开更多
关键词 重组鸡痘病毒 HN基因 肝癌细胞SMMC7721
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表达新城疫病毒F基因重组鸡痘病毒的遗传稳定性 被引量：6
19
作者 张体银 孙蕾 +1 位作者 刘武杰 刘秀梵 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期405-407,共3页
本实验为了评价表达新城疫病毒F基因重组鸡痘病毒(rFPV282E4-SF,rFPVLp-SF)的遗传稳定性,将其在鸡胚成纤维细胞连续培养20代。通过蓝斑来鉴定重组鸡痘病毒纯度,结果所有蚀斑100%变蓝。通过对第0、10和20代F基因扩增并进行序列测定,所有... 本实验为了评价表达新城疫病毒F基因重组鸡痘病毒(rFPV282E4-SF,rFPVLp-SF)的遗传稳定性,将其在鸡胚成纤维细胞连续培养20代。通过蓝斑来鉴定重组鸡痘病毒纯度,结果所有蚀斑100%变蓝。通过对第0、10和20代F基因扩增并进行序列测定,所有碱基和氨基酸序列均和原始转移载体序列完全一致,没有发生任何改变。随后又通过间接免疫荧光证实rFPV282E4-FS和rFPVLP-FS各个代次F基因的特异表达。所有结果均显示了上述重组鸡痘病毒具有良好的遗传稳定性,满足兽医生物制品的遗传稳定性要求。 展开更多
关键词 新城疫病毒 F基因 重组鸡痘病毒 遗传稳定性
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表达鸡马立克氏病病毒gB基因重组鸡痘病毒的遗传稳定性及生物安全性评价 被引量：4
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作者 卢军 胡传伟 +5 位作者 金乔 彭大新 刘文博 高崧 张如宽 刘秀梵 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期327-331,共5页
为了评价表达鸡马立克氏病病毒gB基因重组鸡痘病毒(rFPV-gB/R)的遗传稳定性,我们将纯化后的重组病毒在CEF单层上连续传30代,引起细胞病变的速度和形态均未发生明显变化;覆盖含X-Gal的琼脂引起的空斑均为蓝色;间接免疫荧光实验证明rFPV-g... 为了评价表达鸡马立克氏病病毒gB基因重组鸡痘病毒(rFPV-gB/R)的遗传稳定性,我们将纯化后的重组病毒在CEF单层上连续传30代,引起细胞病变的速度和形态均未发生明显变化;覆盖含X-Gal的琼脂引起的空斑均为蓝色;间接免疫荧光实验证明rFPV-gB/R中的gB基因始终能稳定表达;序列测定结果表明,重组病毒在细胞上连续传30代、在SPF鸡上连续传5代后,gB基因序列没有发生任何变化;以0、10、20、30代重组病毒制成冻干疫苗进行的实验室免疫效力实验表明,细胞连续传代后rFPV-gB/R仍然保持了原有的免疫原性。可见重组鸡痘病毒gB基因的结构和免疫原性都是高度稳定的。为了评价rFPV-gB/R的生物安全性,我们将rFPV-gB/R通过SPF鸡连续传5代,检测病毒在鸡体的存在部位及其消长、生长繁殖性能和毒力变化;将rFPV-gB/R免疫鸡与未免疫鸡同笼饲养,攻击FPV-102E6强毒,以检测rFPV-gB/R感染鸡的接触传染性。结果显示,rFPV-gB/R在鸡体的存在时间大约为7d,在体内仅存在于接种部位;鸡体传代后痘病毒毒力有一定程度下降,gB基因核苷酸序列未发生任何变化;同居未免疫SPF鸡在痘病毒强毒攻击后全部发痘,可见重组病毒免疫鸡没有接触传染性,能在鸡体内稳定地传代,rFPV-gB/R具有高度的生物安全性。 展开更多
关键词 鸡马立克氏病 重组鸡痘病毒 GB基因 遗传稳定性 生物安全性
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