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重组里氏木霉液体深层发酵产中性内切-β-葡聚糖酶
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作者 顾斌涛 江守坤 夏黎明 《高校化学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第2期305-310,共6页
中性内切-β-葡聚糖酶在纺织、食品和造纸等领域中应用广泛。研究采用一株重组里氏木霉(Trichoderma reesei)生产中性内切-β-葡聚糖酶,发酵液经SDS-PAGE检测,显示了来自特异腐质霉(Humicola insolens)内切-β-葡聚糖酶的蛋白条带(... 中性内切-β-葡聚糖酶在纺织、食品和造纸等领域中应用广泛。研究采用一株重组里氏木霉(Trichoderma reesei)生产中性内切-β-葡聚糖酶,发酵液经SDS-PAGE检测,显示了来自特异腐质霉(Humicola insolens)内切-β-葡聚糖酶的蛋白条带(约52 kDa)。对重组里氏木霉的发酵性能进行了研究,表明碳源对内切-β-葡聚糖酶的形成有重要影响,当采用乳糖与微晶纤维素的复合碳源时,酶活力和产率都可明显提高。利用玉米浆粉作为氮源,其适宜浓度为12 g·L-1。培养基初始pH值对发酵酶活力及产率有一定影响,适宜的初始pH值为5.0。在2 m3的发酵罐进行产酶试验,发酵96 h酶活可高达8012 U·mL-1。酶学性质研究表明:该酶在50℃以下稳定,在45-55℃有明显的催化作用,其最适催化温度为50℃。在pH 5.0-7.0稳定性较好,并且有明显的催化作用,其最适催化pH值为6.0。生物整理实验结果显示重组里氏木霉所产酶液用于牛仔布水洗时反染较少,水洗效果良好。 展开更多
关键词 重组里氏木霉 内切-β-葡聚糖酶 液体深层发酵 生物整理
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利用重组里氏木霉高效降解秸秆的研究 被引量:3
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作者 秦雪丽 夏颖 +1 位作者 赵杰 夏黎明 《高校化学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2018年第6期1374-1381,共8页
秸秆还田对于减少化肥使用量、改善土壤生态环境等具有重要作用。本文采用重组里氏木霉对秸秆进行快速降解研究,结果表明,重组里氏木霉在固态发酵中对湿度(60%~75%)、温度(24~32℃)的适应范围较宽,10%氨水常温预处理可加速秸秆的降解... 秸秆还田对于减少化肥使用量、改善土壤生态环境等具有重要作用。本文采用重组里氏木霉对秸秆进行快速降解研究,结果表明,重组里氏木霉在固态发酵中对湿度(60%~75%)、温度(24~32℃)的适应范围较宽,10%氨水常温预处理可加速秸秆的降解进程。重组里氏木霉在秸秆基质中可迅速生长并分泌纤维素酶、漆酶和木聚糖酶,其中滤纸酶活力(即纤维素酶总活力)第8天开始趋于平稳,最终活力为132.26 IU?g^(-1);内切型-β-葡聚糖酶(CMC酶)、漆酶和木聚糖酶活力在第10天达到峰值,分别为1313.15、8.11和5504.10 IU?g^(-1)。接种后第10天,秸秆纤维素、半纤维素和木质素的降解率分别为77.93%、55.12%和31.52%。重组里氏木霉的秸秆降解率比出发菌株及枯草芽孢杆菌分别提高了45.40%和76.37%。本文的研究结果对于进一步提高秸秆快速降解还田技术,改善生态环境具有重要意义。 展开更多
关键词 重组里氏木霉 秸秆快速降解 纤维素酶 漆酶 聚糖酶
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外切-β-葡聚糖酶基因重组里氏木霉的筛选及其产酶性能 被引量:3
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作者 孔芹 方浩 夏黎明 《化工学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第8期3122-3127,共6页
外切-β-葡聚糖酶是纤维素酶的重要组分之一,提高该组分的活力是增强纤维素酶协同降解性能、降低纤维素水解成本的关键。分别采用微晶纤维素琼脂平板法和滤纸崩解法,对已有的基因重组转化子进行筛选试验,获得了6个优良转化子,其滤纸崩... 外切-β-葡聚糖酶是纤维素酶的重要组分之一,提高该组分的活力是增强纤维素酶协同降解性能、降低纤维素水解成本的关键。分别采用微晶纤维素琼脂平板法和滤纸崩解法,对已有的基因重组转化子进行筛选试验,获得了6个优良转化子,其滤纸崩解速率和微晶纤维素琼脂平板上的生长速率都较大。进一步在摇瓶条件下进行复筛试验,获得了外切-β-葡聚糖酶(C1)高产转化子Trichoderma reesei ZU-101,液体培养48 h,其C1酶活力可达18.24 U·ml-1,是出发菌株的2.16倍;分析结果表明:重组转化子的纤维素酶体系中内切-β-葡聚糖酶和纤维二糖酶的活力与出发菌株相比变化不大,但由于外切-β-葡聚糖酶活力得到了大幅度提高,纤维素酶的总活力(滤纸酶活力FPA)也提高了61.9%。采用纤维素酶对碱预处理玉米秸秆进行酶解试验,当酶用量为20 FPIU·(g底物)-1,水解48 h,重组转化子T.reesei ZU-101纤维素酶的酶解得率高达94.4%。本文的研究结果在可再生纤维素资源的生物转化与利用方面具有广阔的应用前景。 展开更多
关键词 重组里氏木霉 外切-β-葡聚糖酶 转化子筛选 玉米秸秆 酶水解
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重组里氏木霉产漆酶及其对染料金橙Ⅱ的脱色 被引量:2
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作者 陶亮亮 赵杰 夏黎明 《浙江大学学报(工学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1879-1883,1900,共6页
对已有的10个重组里氏木霉转化子进行产酶试验,从中筛选到一个高产转化子,摇瓶发酵96h,漆酶活力可以达到8.85IU/mL.SDS-PAGE结果表明:该重组漆酶的相对分子质量约为68 000.重组漆酶的最适温度为65℃,该酶具有较好的耐热性能,经70℃处理... 对已有的10个重组里氏木霉转化子进行产酶试验,从中筛选到一个高产转化子,摇瓶发酵96h,漆酶活力可以达到8.85IU/mL.SDS-PAGE结果表明:该重组漆酶的相对分子质量约为68 000.重组漆酶的最适温度为65℃,该酶具有较好的耐热性能,经70℃处理60min后残余相对酶活维持在70%以上;最适pH为2.2,在pH为2.6-4.2的条件下具有良好的稳定性.采用发酵粗酶液对100mg/L的偶氮染料金橙Ⅱ进行脱色试验,对影响脱色效果的主要因子进行研究.结果表明,在温度为50℃、pH为3.5、介体HOBT用量为2mmol/L、漆酶用量为0.2IU/mL的条件下作用5h,金橙Ⅱ的脱色率可以达到90.6%. 展开更多
关键词 重组里氏木霉 漆酶 发酵 偶氮染料 脱色
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