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山羊支原体山羊肺炎亚种重组酶聚合酶扩增技术的建立
被引量:
4
1
作者
豆玲
周峰
+2 位作者
张莉
王志宇
康文彪
《动物医学进展》
北大核心
2023年第9期38-43,共6页
为检测山羊传染性胸膜肺炎,选择Mccp-arcA假基因作为靶基因,用Primer 3 plus设计筛选生物素标记的特异引物和荧光素标记的探针,将双标记扩增产物结合到核酸检测试纸条,通过优化反应温度和时间,建立了一种检测山羊支原体山羊肺炎亚种的...
为检测山羊传染性胸膜肺炎,选择Mccp-arcA假基因作为靶基因,用Primer 3 plus设计筛选生物素标记的特异引物和荧光素标记的探针,将双标记扩增产物结合到核酸检测试纸条,通过优化反应温度和时间,建立了一种检测山羊支原体山羊肺炎亚种的重组酶聚合酶扩增技术,对其灵敏度、重复性、准确性和特异性进行了试验,并初步用于临床样品的检测。结果显示,山羊传染性胸膜肺炎核酸阳性样品能够在核酸检测试纸条上显示阳性条带,阴性样品无条带。试验具有良好的重复性和敏感性(达到10 copies/μL)。用建立的重组酶聚合酶扩增技术与普通PCR方法同时检测疑似山羊传染性胸膜肺炎8份样品,结果均为3份阳性和5份阴性,符合率100%。该检测方法适用于山羊传染性胸膜肺炎的快速诊断,为Mccp的快速检测提供了新的技术。
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关键词
重组
酶
聚合
酶
扩增
方法
试纸条
山羊支原体山羊肺炎亚种
山羊传染性胸膜肺炎
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职称材料
猪伪狂犬病病原学检测诊断技术及应用
被引量:
1
2
作者
郭广君
吕素芳
+2 位作者
贾仰波
魏凤
杨新忠
《现代畜牧科技》
2025年第5期120-122,共3页
该文就猪伪狂犬病研究发展历史、近年新发变异毒株流行情况、临床特征、分子诊断技术、防控措施等研究进行重点论述,以期为推动PRV净化,促进产业持续健康发展提供理论支持。
关键词
猪伪狂犬病
分子诊断技术
重组酶聚合酶方法
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职称材料
甘薯薯瘟病菌RPA检测方法的建立及应用
被引量:
6
3
作者
李华伟
林志坚
+4 位作者
张鸿
刘中华
李国良
汤浩
邱思鑫
《福建农林大学学报(自然科学版)》
CSCD
北大核心
2020年第5期583-588,共6页
根据甘薯薯瘟病菌特异基因(orf428)序列设计重组酶聚合酶等温扩增(RPA)引物,通过特异性和灵敏性验证,建立了能够快速检测甘薯薯瘟病菌的RPA方法.该方法检测结果与PCR检测结果一致,且灵敏度高、特异性强,在39℃的恒温条件下反应20 min即...
根据甘薯薯瘟病菌特异基因(orf428)序列设计重组酶聚合酶等温扩增(RPA)引物,通过特异性和灵敏性验证,建立了能够快速检测甘薯薯瘟病菌的RPA方法.该方法检测结果与PCR检测结果一致,且灵敏度高、特异性强,在39℃的恒温条件下反应20 min即可完成核酸扩增,大大提高了检测效率.此外,该方法可用于检测甘薯发病组织、带菌土壤和水体中的薯瘟病菌.
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关键词
甘薯
薯瘟病
青枯菌
重组
酶
聚合
酶
等温扩增
方法
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职称材料
甘薯卷叶病毒的RPA检测方法的建立
被引量:
2
4
作者
许泳清
李华伟
+4 位作者
张鸿
李国良
林赵淼
邱永祥
邱思鑫
《福建农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第8期923-926,共4页
【目的】建立快速检测甘薯卷叶病毒重组酶聚合酶(RPA)等温扩增方法,为甘薯卷叶病毒(sweet potato leaf curl virus,SPLCV)提供快速、简便的检测方法。【方法】根据甘薯卷叶病毒AV1基因的保守区段设计RPA检测用引物,并对引物进行筛选,对...
【目的】建立快速检测甘薯卷叶病毒重组酶聚合酶(RPA)等温扩增方法,为甘薯卷叶病毒(sweet potato leaf curl virus,SPLCV)提供快速、简便的检测方法。【方法】根据甘薯卷叶病毒AV1基因的保守区段设计RPA检测用引物,并对引物进行筛选,对反应条件和反应体系进行优化,建立SPLCV的RPA检测方法。【结果】建立的甘薯卷叶病毒RPA方法快速简便,39℃反应20 min完成检测;灵敏度高,最低检测限为10 pg·μL^(−1);特异性强,与感染番茄黄化卷叶病毒(TYLCD),甘薯羽状斑驳病毒(SPFMV)、甘薯G病毒(SPVG)、甘薯退绿矮化病毒(SPCSV)等4种DNA病毒均无交叉反应。【结论】建立的RPA检测方法具有快速、灵敏、特异性强、不需要特殊仪器等优点,适合田间甘薯卷叶病毒样品的快速检测。
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关键词
甘薯
卷叶病毒(SPLCV)
重组
酶
聚合
酶
等温扩增
方法
检测
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职称材料
题名
山羊支原体山羊肺炎亚种重组酶聚合酶扩增技术的建立
被引量:
4
1
作者
豆玲
周峰
张莉
王志宇
康文彪
机构
甘肃省动物疫病预防控制中心
英科新创(苏州)生物科技有限公司
出处
《动物医学进展》
北大核心
2023年第9期38-43,共6页
基金
甘肃省农业农村厅科技项目(GNKJ-2021-24)。
文摘
为检测山羊传染性胸膜肺炎,选择Mccp-arcA假基因作为靶基因,用Primer 3 plus设计筛选生物素标记的特异引物和荧光素标记的探针,将双标记扩增产物结合到核酸检测试纸条,通过优化反应温度和时间,建立了一种检测山羊支原体山羊肺炎亚种的重组酶聚合酶扩增技术,对其灵敏度、重复性、准确性和特异性进行了试验,并初步用于临床样品的检测。结果显示,山羊传染性胸膜肺炎核酸阳性样品能够在核酸检测试纸条上显示阳性条带,阴性样品无条带。试验具有良好的重复性和敏感性(达到10 copies/μL)。用建立的重组酶聚合酶扩增技术与普通PCR方法同时检测疑似山羊传染性胸膜肺炎8份样品,结果均为3份阳性和5份阴性,符合率100%。该检测方法适用于山羊传染性胸膜肺炎的快速诊断,为Mccp的快速检测提供了新的技术。
关键词
重组
酶
聚合
酶
扩增
方法
试纸条
山羊支原体山羊肺炎亚种
山羊传染性胸膜肺炎
Keywords
recombinase polymerase amplification
test strip
Mycoplasma capricolum subsp.capripneumoniae
Contagious caprine pleuropneumonia
分类号
S852.62 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
猪伪狂犬病病原学检测诊断技术及应用
被引量:
1
2
作者
郭广君
吕素芳
贾仰波
魏凤
杨新忠
机构
山东省滨州畜牧兽医研究院
山东省博兴县畜牧兽医服务中心
滨州市滨城区畜牧兽医服务中心
出处
《现代畜牧科技》
2025年第5期120-122,共3页
基金
山东省生猪产业技术体系(SDAIT-08-13)。
文摘
该文就猪伪狂犬病研究发展历史、近年新发变异毒株流行情况、临床特征、分子诊断技术、防控措施等研究进行重点论述,以期为推动PRV净化,促进产业持续健康发展提供理论支持。
关键词
猪伪狂犬病
分子诊断技术
重组酶聚合酶方法
Keywords
swine pseudorabies
molecular diagnostic techniques
recombinase polymerase method(RPA)
分类号
S855.3 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
甘薯薯瘟病菌RPA检测方法的建立及应用
被引量:
6
3
作者
李华伟
林志坚
张鸿
刘中华
李国良
汤浩
邱思鑫
机构
福建省农业科学院作物研究所/农业部南方薯类科学观测实验站/福建省特色旱作物品种选育工程技术研究中心
出处
《福建农林大学学报(自然科学版)》
CSCD
北大核心
2020年第5期583-588,共6页
基金
福建省公益类科研专项(2017R1026-4)
现代农业产业技术体系(CARS-10-B14)
福建省农业科学院创新团队项目(STIT2017-2-3).
文摘
根据甘薯薯瘟病菌特异基因(orf428)序列设计重组酶聚合酶等温扩增(RPA)引物,通过特异性和灵敏性验证,建立了能够快速检测甘薯薯瘟病菌的RPA方法.该方法检测结果与PCR检测结果一致,且灵敏度高、特异性强,在39℃的恒温条件下反应20 min即可完成核酸扩增,大大提高了检测效率.此外,该方法可用于检测甘薯发病组织、带菌土壤和水体中的薯瘟病菌.
关键词
甘薯
薯瘟病
青枯菌
重组
酶
聚合
酶
等温扩增
方法
Keywords
sweet potato
bacterial wilt
Ralstonia solanacearum
RPA
分类号
S531 [农业科学—作物学]
S411 [农业科学—植物保护]
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职称材料
题名
甘薯卷叶病毒的RPA检测方法的建立
被引量:
2
4
作者
许泳清
李华伟
张鸿
李国良
林赵淼
邱永祥
邱思鑫
机构
福建省农业科学院作物研究所/农业农村部南方薯类科学观测实验站/福建省特色旱作物品种选育工程技术研究中心
出处
《福建农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第8期923-926,共4页
基金
福建省科技计划公益类专项(2020R1031008)
国家现代农业产业技术体系项目(CARS-10-B14)
+2 种基金
福建省种业创新与产业化工程项目(zycxny2021005)
农业高质量发展超越“5511”协调创新工程项目(KXXYJBG0039)
福建省农业科学院农业科技创新联盟专项(CXLM2021001)。
文摘
【目的】建立快速检测甘薯卷叶病毒重组酶聚合酶(RPA)等温扩增方法,为甘薯卷叶病毒(sweet potato leaf curl virus,SPLCV)提供快速、简便的检测方法。【方法】根据甘薯卷叶病毒AV1基因的保守区段设计RPA检测用引物,并对引物进行筛选,对反应条件和反应体系进行优化,建立SPLCV的RPA检测方法。【结果】建立的甘薯卷叶病毒RPA方法快速简便,39℃反应20 min完成检测;灵敏度高,最低检测限为10 pg·μL^(−1);特异性强,与感染番茄黄化卷叶病毒(TYLCD),甘薯羽状斑驳病毒(SPFMV)、甘薯G病毒(SPVG)、甘薯退绿矮化病毒(SPCSV)等4种DNA病毒均无交叉反应。【结论】建立的RPA检测方法具有快速、灵敏、特异性强、不需要特殊仪器等优点,适合田间甘薯卷叶病毒样品的快速检测。
关键词
甘薯
卷叶病毒(SPLCV)
重组
酶
聚合
酶
等温扩增
方法
检测
Keywords
Sweet potato
sweet potato leaf curl virus(SPLCV)
RPA
detection methodology
分类号
S435 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
山羊支原体山羊肺炎亚种重组酶聚合酶扩增技术的建立
豆玲
周峰
张莉
王志宇
康文彪
《动物医学进展》
北大核心
2023
4
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
猪伪狂犬病病原学检测诊断技术及应用
郭广君
吕素芳
贾仰波
魏凤
杨新忠
《现代畜牧科技》
2025
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
甘薯薯瘟病菌RPA检测方法的建立及应用
李华伟
林志坚
张鸿
刘中华
李国良
汤浩
邱思鑫
《福建农林大学学报(自然科学版)》
CSCD
北大核心
2020
6
在线阅读
下载PDF
职称材料
4
甘薯卷叶病毒的RPA检测方法的建立
许泳清
李华伟
张鸿
李国良
林赵淼
邱永祥
邱思鑫
《福建农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021
2
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