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重组酵母菌N6076代谢产物中红色组分的制备及其GC-MS检测 被引量:1
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作者 樊永红 金湘 毛培宏 《安徽农业科学》 CAS 2012年第29期14183-14184,14215,共3页
[目的]探讨重组异常汉逊酵母菌N6076次生代谢产物中红色组分的制备及其GC-MS检测方法。[方法]应用薄层层析色谱方法大量制备重组异常汉逊酵母菌N6076次生代谢产物中的红色组分,通过无水乙醇溶解、GC-MS检测以及化合物结构比对,分析其类... [目的]探讨重组异常汉逊酵母菌N6076次生代谢产物中红色组分的制备及其GC-MS检测方法。[方法]应用薄层层析色谱方法大量制备重组异常汉逊酵母菌N6076次生代谢产物中的红色组分,通过无水乙醇溶解、GC-MS检测以及化合物结构比对,分析其类别。[结果]该红色组分为醌类化合物,在WILEY、Nist和Nbs化合物库中均未发现与其结构完全相同的化合物。[结论]该研究为所得红色组分的NMR结构鉴定及结构与生物学效应关系的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 重组酵母菌 代谢产物 红色组分 薄层色谱 GC-MS
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重组酵母菌N6076的差异表达基因功能及甲羟戊酸代谢分析 被引量:1
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作者 王璇 欧科 +5 位作者 冯光文 陈福欣 王婷 买买提热夏提·买买提 钱卫东 毛培宏 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2020年第17期22-26,共5页
为了解重组酵母菌N6076不同发酵时间的差异表达基因信息及甲羟戊酸(mevalonate,MVA)代谢状况,以重组酵母菌N6076及其原始菌株Kh08为研究对象,基于转录组测序和MVA测定,分析和比较了两者在3个发酵时间点(0、48和96 h)的差异表达基因的功... 为了解重组酵母菌N6076不同发酵时间的差异表达基因信息及甲羟戊酸(mevalonate,MVA)代谢状况,以重组酵母菌N6076及其原始菌株Kh08为研究对象,基于转录组测序和MVA测定,分析和比较了两者在3个发酵时间点(0、48和96 h)的差异表达基因的功能。GO功能分析结果表明,重组菌株N6076新增了14项生物学过程、2项细胞组分和2项分子功能,涉及1140个差异表达基因。KEGG代谢分析结果表明,重组菌株N6076新增了13条代谢通路,涉及77个差异表达基因,其中新增的萜类骨架生物合成途径涉及5个差异表达基因。甲羟戊酸激酶(mevalonate kinase,MVK)基因表达与MVA的LC-MS/MS测定结果表明,在整个发酵过程中MVK基因表达量与MVA产量的变化趋势一致。该研究为进一步认识重组酵母菌N6076的基因表达与MVA代谢调控提供了依据。 展开更多
关键词 重组酵母菌 转录组 差异表达基因 甲羟戊酸 代谢
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离子束重组异常汉逊酵母菌Ar_Han0458的转录组学分析及谷胱甘肽代谢途径富集 被引量:3
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作者 张寒玉 唐朝 +2 位作者 冯光文 毛培宏 蔡长龙 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期10-15,共6页
研究可稳定遗传的重组异常汉逊酵母Ar_Han0458在发酵过程中的差异基因表达信息及与谷胱甘肽代谢相关基因的表达变化。利用生物信息学方法分析重组异常汉逊酵母Ar_Han0458的5个发酵时间点的RNA-seq数据。重组异常汉逊酵母Ar_Han0458各发... 研究可稳定遗传的重组异常汉逊酵母Ar_Han0458在发酵过程中的差异基因表达信息及与谷胱甘肽代谢相关基因的表达变化。利用生物信息学方法分析重组异常汉逊酵母Ar_Han0458的5个发酵时间点的RNA-seq数据。重组异常汉逊酵母Ar_Han0458各发酵时间与0 h相比,下调表达基因数量多于上调表达;除发酵96和72 h外,相邻时间点的差异表达基因数目均以下调为主;发酵48和72 h时的基因表达谱相近。各发酵时间点间差异表达基因显著富集的GO功能均以细胞过程、细胞和催化活性为主。KEGG富集分析显示,10个差异表达基因参与了谷胱甘肽的代谢,谷胱甘肽的合成速率分别在24和96 h达到峰值,与实验测得胞外GSH产量变化趋势一致。重组异常汉逊酵母Ar_Han0458在发酵96 h时差异表达基因数目以上调为主,且谷胱甘肽合成速率最快。该研究为重组异常汉逊酵母的代谢调控研究及其分子育种提供了理论依据。 展开更多
关键词 重组异常汉逊酵母菌 转录组 差异表达基因 谷胱甘肽 代谢
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代谢木糖和葡萄糖的重组酿酒酵母的构建 被引量:4
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作者 刘继开 田沈 +2 位作者 张亚珍 张金鑫 杨秀山 《可再生能源》 CAS 2007年第1期13-16,共4页
采用RT-PCR的方法克隆得到Candida shehatae木糖还原酶基因xyl1,将该基因插入到含有强启动子ADH1的穿梭质粒pACT2中,用同样的方法克隆得到Pichia stipitis的木糖醇脱氢酶基因xyl2,将该基因插入到含有强启动子PMA1的穿梭质粒pDR195中,两... 采用RT-PCR的方法克隆得到Candida shehatae木糖还原酶基因xyl1,将该基因插入到含有强启动子ADH1的穿梭质粒pACT2中,用同样的方法克隆得到Pichia stipitis的木糖醇脱氢酶基因xyl2,将该基因插入到含有强启动子PMA1的穿梭质粒pDR195中,两套外源基因连同各自的启动子和终止子将连接到酵母整合质粒YIp5-kanR中,并预期整合到酿酒酵母的基因组当中,从而构建代谢木糖和葡萄糖的重组酿酒酵母。 展开更多
关键词 重组酵母菌 乙醇 木糖 染色体整合 木糖还原酶基因 木糖醇脱氢酶基因
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分阶段温度控制策略提高重组葡萄酒酵母合成β-胡萝卜素的研究
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作者 雒焕华 苏海佳 燕国梁 《中国酿造》 CAS 2012年第10期22-25,共4页
利用农副产品为发酵底物,生产高附加值的生物产品具有良好的应用前景。本研究以模拟葡萄汁为培养基,在7L发酵罐水平上研究了不同发酵温度(25℃、27℃、30℃、33℃)重组葡萄酒酵母T73-63生长和合成外源β-胡萝卜素的情况。结果发现,重组... 利用农副产品为发酵底物,生产高附加值的生物产品具有良好的应用前景。本研究以模拟葡萄汁为培养基,在7L发酵罐水平上研究了不同发酵温度(25℃、27℃、30℃、33℃)重组葡萄酒酵母T73-63生长和合成外源β-胡萝卜素的情况。结果发现,重组葡萄酒酵母最适生长温度与β-胡萝卜素最适合成温度是不一致的:较高的发酵温度(30℃)有利于细胞的生长,能够获得较高的生物量;但较低的温度(25℃)却能够获得较高的比产物合成速率。根据细胞生长和产物合成动力学曲线,提出了两阶段温度控制策略:发酵前20h温度控制为30℃,20h后降低至25℃至发酵结束;在此调控策略下,最高β-胡萝卜素产量和β-胡萝卜素合成速率分别达到56.42mg/L和1.28mg(/L.h),与单一温度发酵模式的最高水平(30℃)相比分别提高了25.7%和14.3%。 展开更多
关键词 重组葡萄酒酵母菌 Β-胡萝卜素 分批发酵 温度控制策略
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一种基于PCR技术快速筛选低能离子注入重组菌株的方法
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作者 钱卫东 周颖欣 +1 位作者 吴启航 蔡长龙 《陕西科技大学学报(自然科学版)》 2016年第2期139-143,共5页
为拓展基于低能离子注入介导药用植物基因组DNA转化酵母、构建能生产天然产物的酵母重组菌的广泛应用,以目标产物龙胆苦苷生物合成途径中的关键酶基因(GGPPS,MECPS和MECT)为分子筛选标记,以基于低能离子注入随机转化重组菌DNA为模板进行... 为拓展基于低能离子注入介导药用植物基因组DNA转化酵母、构建能生产天然产物的酵母重组菌的广泛应用,以目标产物龙胆苦苷生物合成途径中的关键酶基因(GGPPS,MECPS和MECT)为分子筛选标记,以基于低能离子注入随机转化重组菌DNA为模板进行PCR扩增,实现对其高通量初筛,利用HPLC方法对初筛所得菌株发酵产物进行分析检测.结果,从1 072株转化酵母菌中初筛出12株候选酵母重组菌,经HPLC复筛后,其中5株重组酵母菌的发酵产物中检测出龙胆苦苷.研究表明,此PCR筛选方法,具有高效、简单、周期短、廉价、易于操作等优点,适用于低能离子注入介导基因组DNA大分子随机转化酵母,构建能生物合成天然产物的酵母重组菌的研究中. 展开更多
关键词 PCR快速筛选 低能离子注入 关键酶 重组酵母菌
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