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日本血吸虫谷胱甘肽硫转移酶原核表达载体的构建及序列分析
被引量：
1
1
作者
方桂杰
乔宪凤
《江西农业学报》
CAS
2010年第11期8-10,14,共4页
为构建带有组氨酸标签(his-tag)的日本血吸虫谷胱甘肽硫转移酶(sjGST)表达载体。以载有sjGST基因的载体PGEX-KG为模板,PCR扩增sjGST基因,并在进行酶切和基因测序后将其克隆到pET28a载体上。运用生物学软件与具有代表性的血吸虫GST基因...
为构建带有组氨酸标签(his-tag)的日本血吸虫谷胱甘肽硫转移酶(sjGST)表达载体。以载有sjGST基因的载体PGEX-KG为模板,PCR扩增sjGST基因,并在进行酶切和基因测序后将其克隆到pET28a载体上。运用生物学软件与具有代表性的血吸虫GST基因进行比对并对可能的表达产物进行分析。结果表明,PCR产物与3种sjGST基因有99%的同源性。重组载体构建成功。
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关键词
日本血吸虫
谷胱甘肽硫转移酶
原核
表达
载体
的
构建
序列分析
SCHISTOSOMA
JAPONICUM
Sequence
Analysis
基因测序
重组载体构建
组氨酸标签
生物学软件
表达产物
PCR产物
HIS-TAG
GST基因
同源性
代表性
pET28a
模板
酶切
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职称材料
大肠杆菌LTKA63突变体的构建及重组LTKA63免疫佐剂活性机理的研究
2
作者
全胜
夏肖萍
胡伟航
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第2期107-110,共4页
目的 构建大肠杆菌不耐热肠毒素A亚单位（heat-labile enterotoxin subunitA，LTA）基因减毒突变体LTKA63及其原核表达系统，探讨重组LTKA63（rLTKA63）粘膜免疫佐剂活性的机制。方法采用高保真PCR从大肠杆菌44815株基因组DNA中扩增LTA...
目的 构建大肠杆菌不耐热肠毒素A亚单位（heat-labile enterotoxin subunitA，LTA）基因减毒突变体LTKA63及其原核表达系统，探讨重组LTKA63（rLTKA63）粘膜免疫佐剂活性的机制。方法采用高保真PCR从大肠杆菌44815株基因组DNA中扩增LTA基因，利用定位突变技术构建LTKA63突变体，T-A克隆后测序。采用无His-tag的原核表达载体pET-15b。构建LTKA63原核表达系统，通过SDS-PAGE鉴定表达产物。采用三色流式细胞术确定rLTKA63激活T细胞途径。结果从大肠杆菌44815株DNA模板中扩增获得预期大小的LTA基因条带。与报道的LTA序列比较，所克隆的LTA基因核苷酸和氨基酸序列相似性分别为99．03％～99．61％和98．33％～99．22％。LTA基因定位突变后获得序列正确的LT-KA63突变体。rLTKA63表达量占细菌总蛋白的15％左右。rLTKA63作用后Th1和Th2细胞较阴性对照组分别增加21．9％和36．2％。结论本文成功地构建了LTKA63原核表达系统，所表达的rLTKA能同时激活Th1和Th2细胞。
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关键词
大肠杆菌
LTKA63基因
克隆/表达
载体
构建
重组
蛋白/表达
粘膜免疫/佐剂活性
TH1/TH2
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职称材料
金针菇免疫调节蛋白FIP-fve在毕赤酵母中的表达研究
3
作者
杜婉嘉
陈香利
+3 位作者
毛雪
马银鹏
孔祥辉
林火松
《食药用菌》
2024年第3期176-181,共6页
金针菇免疫调节蛋白FIP-fve是隶属于真菌免疫调节蛋白家族的小分子功能蛋白质,在生物医学研究和功能食品应用中有重要价值,但天然蛋白产量较低。本文构建了真核表达载体pPIC9K-FIP-fve后转入毕赤酵母GS115。结果:甲醇诱导获得高效分泌...
金针菇免疫调节蛋白FIP-fve是隶属于真菌免疫调节蛋白家族的小分子功能蛋白质,在生物医学研究和功能食品应用中有重要价值,但天然蛋白产量较低。本文构建了真核表达载体pPIC9K-FIP-fve后转入毕赤酵母GS115。结果:甲醇诱导获得高效分泌表达的可溶性蛋白,表达率40%以上,经纯化,蛋白产率为121.6 mg/L。本研究为FIP-fve重组蛋白应用奠定了基础。
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关键词
金针菇免疫调节蛋白
真核
重组载体构建
与表达
纯化
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职称材料
题名
日本血吸虫谷胱甘肽硫转移酶原核表达载体的构建及序列分析
被引量：
1
1
作者
方桂杰
乔宪凤
机构
湖北工业大学生物工程学院发酵工程省部共建教育部重点实验室
湖北省农业科学院畜牧兽医研究所动物胚胎工程与分子育种湖北省重点实验室
出处
《江西农业学报》
CAS
2010年第11期8-10,14,共4页
基金
湖北工业大学博士启动基金(32700224)
文摘
为构建带有组氨酸标签(his-tag)的日本血吸虫谷胱甘肽硫转移酶(sjGST)表达载体。以载有sjGST基因的载体PGEX-KG为模板,PCR扩增sjGST基因,并在进行酶切和基因测序后将其克隆到pET28a载体上。运用生物学软件与具有代表性的血吸虫GST基因进行比对并对可能的表达产物进行分析。结果表明,PCR产物与3种sjGST基因有99%的同源性。重组载体构建成功。
关键词
日本血吸虫
谷胱甘肽硫转移酶
原核
表达
载体
的
构建
序列分析
SCHISTOSOMA
JAPONICUM
Sequence
Analysis
基因测序
重组载体构建
组氨酸标签
生物学软件
表达产物
PCR产物
HIS-TAG
GST基因
同源性
代表性
pET28a
模板
酶切
Keywords
Glutathlone S-transferase
S.japonicum
Gene amplification
Sequence analysis
Bioinformatic technique
分类号
S [农业科学]
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职称材料
题名
大肠杆菌LTKA63突变体的构建及重组LTKA63免疫佐剂活性机理的研究
2
作者
全胜
夏肖萍
胡伟航
机构
浙江大学邵逸夫临床医学研究所胃肠疾病实验室在读研究生
浙江大学附属邵逸夫医院检验科
杭州市第一人民医院急诊科
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第2期107-110,共4页
文摘
目的 构建大肠杆菌不耐热肠毒素A亚单位（heat-labile enterotoxin subunitA，LTA）基因减毒突变体LTKA63及其原核表达系统，探讨重组LTKA63（rLTKA63）粘膜免疫佐剂活性的机制。方法采用高保真PCR从大肠杆菌44815株基因组DNA中扩增LTA基因，利用定位突变技术构建LTKA63突变体，T-A克隆后测序。采用无His-tag的原核表达载体pET-15b。构建LTKA63原核表达系统，通过SDS-PAGE鉴定表达产物。采用三色流式细胞术确定rLTKA63激活T细胞途径。结果从大肠杆菌44815株DNA模板中扩增获得预期大小的LTA基因条带。与报道的LTA序列比较，所克隆的LTA基因核苷酸和氨基酸序列相似性分别为99．03％～99．61％和98．33％～99．22％。LTA基因定位突变后获得序列正确的LT-KA63突变体。rLTKA63表达量占细菌总蛋白的15％左右。rLTKA63作用后Th1和Th2细胞较阴性对照组分别增加21．9％和36．2％。结论本文成功地构建了LTKA63原核表达系统，所表达的rLTKA能同时激活Th1和Th2细胞。
关键词
大肠杆菌
LTKA63基因
克隆/表达
载体
构建
重组
蛋白/表达
粘膜免疫/佐剂活性
TH1/TH2
Keywords
Escherichia coli
LTKA63 gene
cloning/expression vector construction
recombinant protein / expression
Mucosal immunity/ Adjuvant activity
Th1/Th2
分类号
R378.2 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
金针菇免疫调节蛋白FIP-fve在毕赤酵母中的表达研究
3
作者
杜婉嘉
陈香利
毛雪
马银鹏
孔祥辉
林火松
机构
黑龙江省科学院微生物研究所
龙泉市农业农村局经济作物服务站
出处
《食药用菌》
2024年第3期176-181,共6页
基金
黑龙江省科学院院长基金项目(YZ2023sw01)。
文摘
金针菇免疫调节蛋白FIP-fve是隶属于真菌免疫调节蛋白家族的小分子功能蛋白质,在生物医学研究和功能食品应用中有重要价值,但天然蛋白产量较低。本文构建了真核表达载体pPIC9K-FIP-fve后转入毕赤酵母GS115。结果:甲醇诱导获得高效分泌表达的可溶性蛋白,表达率40%以上,经纯化,蛋白产率为121.6 mg/L。本研究为FIP-fve重组蛋白应用奠定了基础。
关键词
金针菇免疫调节蛋白
真核
重组载体构建
与表达
纯化
Keywords
Flammulina velutipes immunomodulatory protein
construction and expression
purification
分类号
S646 [农业科学—蔬菜学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
日本血吸虫谷胱甘肽硫转移酶原核表达载体的构建及序列分析
方桂杰
乔宪凤
《江西农业学报》
CAS
2010
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
大肠杆菌LTKA63突变体的构建及重组LTKA63免疫佐剂活性机理的研究
全胜
夏肖萍
胡伟航
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
金针菇免疫调节蛋白FIP-fve在毕赤酵母中的表达研究
杜婉嘉
陈香利
毛雪
马银鹏
孔祥辉
林火松
《食药用菌》
2024
0
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职称材料
已选择
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