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鲮生长激素cDNA的克隆及其重组表达产物的促生长活性
被引量：
6
1
作者
江世贵
张殿昌
+2 位作者
苏天凤
周发林
吕俊霖
《高技术通讯》
EI
CAS
CSCD
2004年第6期23-27,共5页
利用RT-PCR技术从鲮脑垂体组织中克隆出生长激素cDNA片段，克隆的mcGH全长567bp，编码由188个氨基酸残基组成的GH成熟肽。构建了表达载体pQE30-mcGH，转化大肠杆菌M15(pREP4)，在初步优化发酵条件的基础上实现了鲮mcGH在大肠杆菌中的高...
利用RT-PCR技术从鲮脑垂体组织中克隆出生长激素cDNA片段，克隆的mcGH全长567bp，编码由188个氨基酸残基组成的GH成熟肽。构建了表达载体pQE30-mcGH，转化大肠杆菌M15(pREP4)，在初步优化发酵条件的基础上实现了鲮mcGH在大肠杆菌中的高效表达，表达的重组蛋白占菌体总蛋白的32．13％，经westem blotting分析证实所表达的重组蛋白是mcGH。表达产物主要以包涵体的形式存在。重组蛋白变性、复性后，经Nichelating Sepharose亲和层析纯化，SDS-PAGE显示，纯化的mcGH纯度约为94％。纯化的mcGH腹腔注射莫桑比克罗非鱼(Oreochromis mossambicus)，经4周处理后，实验组1和2的体长增长率分别比对照组快9．38％和9．75％，体重增长率分别快23．42％和62．48％。经t检验统计分析表明，表达的重组mcGH具有显著的促罗非鱼生长作用(P<0．05)。
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关键词
鲮
生长激素
重组表达产物
RT-PCR
促生长活性
分子克隆
水产养殖
分子调控机制
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职称材料
应用GPV VP3基因重组原核表达产物建立检测抗体的ELISA方法研究
被引量：
16
2
作者
布日额
李宝臣
+2 位作者
马波
王君伟
Ulrich Neumann
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第2期199-203,共5页
利用鹅细小病毒（GPV）VP3基因的原核表达蛋白作为包被抗原建立了检测GPV抗体的间接ELISA及Dot-ELISA方法。经确定两种方法的抗原包被浓度为125μg／mL，其中间接-ELISA 100μL／孔、Dot-ELISA 5μL／点。间接-ELISA中HRP标记的兔抗鹅Ig...
利用鹅细小病毒（GPV）VP3基因的原核表达蛋白作为包被抗原建立了检测GPV抗体的间接ELISA及Dot-ELISA方法。经确定两种方法的抗原包被浓度为125μg／mL，其中间接-ELISA 100μL／孔、Dot-ELISA 5μL／点。间接-ELISA中HRP标记的兔抗鹅IgG的工作浓度是1：200，检测血清的最适稀释度是1：400，阳性判定标准为OD492≥0．20，且P／N≥2．0。用此方法检测弱毒疫苗免疫血清，其抗体滴度在1：400～1：51200。Dot-ELISA的结果与间接-ELISA的结果一致。
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关键词
鹅细小病毒
VP3基因
重组
原核
表达
产物
间接-ELISA
Dot—ELISA
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职称材料
题名
鲮生长激素cDNA的克隆及其重组表达产物的促生长活性
被引量：
6
1
作者
江世贵
张殿昌
苏天凤
周发林
吕俊霖
机构
《高技术通讯》联系人
中国水产科学研究院南海水产研究所
出处
《高技术通讯》
EI
CAS
CSCD
2004年第6期23-27,共5页
文摘
利用RT-PCR技术从鲮脑垂体组织中克隆出生长激素cDNA片段，克隆的mcGH全长567bp，编码由188个氨基酸残基组成的GH成熟肽。构建了表达载体pQE30-mcGH，转化大肠杆菌M15(pREP4)，在初步优化发酵条件的基础上实现了鲮mcGH在大肠杆菌中的高效表达，表达的重组蛋白占菌体总蛋白的32．13％，经westem blotting分析证实所表达的重组蛋白是mcGH。表达产物主要以包涵体的形式存在。重组蛋白变性、复性后，经Nichelating Sepharose亲和层析纯化，SDS-PAGE显示，纯化的mcGH纯度约为94％。纯化的mcGH腹腔注射莫桑比克罗非鱼(Oreochromis mossambicus)，经4周处理后，实验组1和2的体长增长率分别比对照组快9．38％和9．75％，体重增长率分别快23．42％和62．48％。经t检验统计分析表明，表达的重组mcGH具有显著的促罗非鱼生长作用(P<0．05)。
关键词
鲮
生长激素
重组表达产物
RT-PCR
促生长活性
分子克隆
水产养殖
分子调控机制
分类号
Q959.468 [生物学—动物学]
Q575.11 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
应用GPV VP3基因重组原核表达产物建立检测抗体的ELISA方法研究
被引量：
16
2
作者
布日额
李宝臣
马波
王君伟
Ulrich Neumann
机构
东北农业大学动物医学院
农业部青岛动植物检疫局
汉诺威兽医学院
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第2期199-203,共5页
基金
黑龙江省教育厅科学技术研究项目(重大项目10541z004)
文摘
利用鹅细小病毒（GPV）VP3基因的原核表达蛋白作为包被抗原建立了检测GPV抗体的间接ELISA及Dot-ELISA方法。经确定两种方法的抗原包被浓度为125μg／mL，其中间接-ELISA 100μL／孔、Dot-ELISA 5μL／点。间接-ELISA中HRP标记的兔抗鹅IgG的工作浓度是1：200，检测血清的最适稀释度是1：400，阳性判定标准为OD492≥0．20，且P／N≥2．0。用此方法检测弱毒疫苗免疫血清，其抗体滴度在1：400～1：51200。Dot-ELISA的结果与间接-ELISA的结果一致。
关键词
鹅细小病毒
VP3基因
重组
原核
表达
产物
间接-ELISA
Dot—ELISA
Keywords
goose parvovirus
recombinant VP3 gene prokaryotic expression product
indirect ELISA
Dot-ELISA
分类号
S854.43 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
鲮生长激素cDNA的克隆及其重组表达产物的促生长活性
江世贵
张殿昌
苏天凤
周发林
吕俊霖
《高技术通讯》
EI
CAS
CSCD
2004
6
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职称材料
2
应用GPV VP3基因重组原核表达产物建立检测抗体的ELISA方法研究
布日额
李宝臣
马波
王君伟
Ulrich Neumann
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006
16
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职称材料
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