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抗犬瘟热病毒重组核衣壳蛋白单克隆抗体的制备及鉴定被引量：9: 1; 作者周洁姜骞 +6 位作者张洪英刘家森刘立奎陈洪岩韩凌霞司昌德曲连东《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期528-532,共5页; 以纯化的重组犬瘟热病毒（CDV）N蛋白免疫BALB/c小鼠,应用常规杂交瘤技术获得两株能稳定分泌特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞系,分别命名为A4C6C12和A5B8H7间接ELISA检测腹水效价分别为1：106、1：105;亚类鉴定结果分别为IgG2a、IgG2b,轻... 展开更多; 关键词犬瘟热病毒重组核衣壳蛋白单克隆抗体; 在线阅读下载PDF 职称材料

赤点石斑鱼神经坏死病毒主衣壳重组蛋白多克隆抗体的制备被引量：2: 2; 作者苏友禄郭志勋 +2 位作者冯娟闫云锋喻达辉《南方水产》 2010年第6期8-13,共6页; 把赤点石斑鱼(Epinephelus akaara)神经坏死病毒(RGNNV)主衣壳蛋白(MCP)基因的重组表达质粒载体pRSETA-MCP转化至大肠杆菌(Estherichia coli)BL21(DE3),经IPTG诱导表达,SDS-PAGE显示表达的重组蛋白主要以不可溶的包涵体形式存在,分子量... 展开更多; 关键词赤点石斑鱼神经坏死病毒主衣壳重组蛋白多克隆抗体免疫原性; 在线阅读下载PDF 职称材料

以汉坦病毒重组核衣壳蛋白为抗原进行ELISA血清分型的研究被引量：4: 3; 作者刘京梅李泉根 +4 位作者李新军张伶刘雪林李森林 ElghF. 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期269-270,共2页; 目的以汉坦病毒重组核衣壳蛋白(NP)为抗原,对陕西、河北两省部分地区HFRS患者的血清进行ELISA分型。方法用5种汉坦病毒NP为抗原,建立一种间接ELISA法,并检测上述地区患者血清中特异性IgG。结果陕西、河北两省部分地区汉坦病毒的感染以... 展开更多; 关键词汉坦病毒重组核衣壳蛋白抗原 ELISA DOB型感染; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪圆环病毒2型重组Cap蛋白在昆虫杆状病毒中的表达被引量：26: 4; 作者刘长明陆月华 +3 位作者张超范危艳武刘焕章童光志《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期479-482,共4页; 猪圆环病毒2型(PCV2)基因组包含2个开放阅读框架(ORFs),其中ORF1编码病毒复制相关蛋白(Rep),ORF2编码病毒衣壳蛋白(Cap)。为了在昆虫细胞表达Cap蛋白,本研究采用PCR扩增PCV2-ORF2编码基因,将PCR产物插入到昆虫杆状病毒转移载体上,经酶... 展开更多; 关键词猪圆环病毒2型重组衣壳蛋白杆状病毒表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪生殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白在昆虫细胞中的表达及其用作诊断抗原的研究被引量：5: 5; 作者杜文金刘卫 +3 位作者王志亮孙融冰宋翠平况慧星《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 2000年第S1期40-43,共4页; 对猪生殖与呼吸综合征病毒（ＰＲＲＳＶ）核衣壳蛋白（Ｎ）作为ＥＬＩＳＡ抗原进行了研究，将编码ＰＲＲＳＶＮ蛋白的基因０ＲＦ７ｃＤＮＡ插入杆状病毒表达载体ｐＢｌｕｅＢａｃＨｉｓ２Ａ，通过同源重组获得了重组杆状病毒ＯＲＦ７－... 展开更多; 关键词猪生殖和呼吸综合征病毒重组核衣壳蛋白酶联免疫吸附试验; 在线阅读下载PDF 职称材料

鹅圆环病毒抗体间接ELISA检测方法的建立被引量：4: 6; 作者姜轲冉胡东健 +6 位作者孙红霞于洪涛刘晓宁俞永裕余权法陈维虎余旭平《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期134-137,共4页; 为建立鹅圆环病毒(GoCV)抗体的检测方法,本研究通过原核表达重组核衣壳(Cap)蛋白,将纯化的该重组蛋白作为ELISA检测的包被抗原,利用交叉反应性,以羊抗鸡IgG(HRP-IgG)作为二抗,经反应条件的优化,建立了检测鹅血清GoCV抗体的间接ELISA方... 展开更多; 关键词鹅圆环病毒重组核衣壳蛋白间接ELISA; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名抗犬瘟热病毒重组核衣壳蛋白单克隆抗体的制备及鉴定被引量：9: 1; 作者周洁姜骞张洪英刘家森刘立奎陈洪岩韩凌霞司昌德曲连东; 机构中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部实验动物质量监督检验测试中心; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期528-532,共5页; 文摘以纯化的重组犬瘟热病毒（CDV）N蛋白免疫BALB/c小鼠,应用常规杂交瘤技术获得两株能稳定分泌特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞系,分别命名为A4C6C12和A5B8H7间接ELISA检测腹水效价分别为1：106、1：105;亚类鉴定结果分别为IgG2a、IgG2b,轻链均为K型;Western blot和ELISA分析结果显示2株单克隆抗体均能与重组N蛋白和CDV发生反应,而与犬细小病毒及犬腺病毒等无交叉反应;ELISA叠加试验的增值结果表明两株单克隆抗体识别的抗原位点不同.特异性抗CDV-rN的单克隆抗体的获得,为进一步用于临床诊断研究奠定了基础.; 关键词犬瘟热病毒重组核衣壳蛋白单克隆抗体; Keywords canine distemper virus recombinant nucleocapsid protein monoclonal antibodies; 分类号 S852.43 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名赤点石斑鱼神经坏死病毒主衣壳重组蛋白多克隆抗体的制备被引量：2: 2; 作者苏友禄郭志勋冯娟闫云锋喻达辉; 机构中国水产科学研究院南海水产研究所; 出处《南方水产》 2010年第6期8-13,共6页; 基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金(中国水产科学研究院南海水产研究所)资助项目(2008YD02 2008TS08) 广东省科技计划项目(2005B20301016); 文摘把赤点石斑鱼(Epinephelus akaara)神经坏死病毒(RGNNV)主衣壳蛋白(MCP)基因的重组表达质粒载体pRSETA-MCP转化至大肠杆菌(Estherichia coli)BL21(DE3),经IPTG诱导表达,SDS-PAGE显示表达的重组蛋白主要以不可溶的包涵体形式存在,分子量约44.5kD。通过Ni-NTA-Agarose亲和层析柱纯化,经分析纯度达90%,之后免疫新西兰兔制备抗血清,ELISA效价达1:12800以上。Western-blot分析结果显示,该血清与表达的重组蛋白有较强反应,说明通过原核表达的重组蛋白具有良好的免疫原性。; 关键词赤点石斑鱼神经坏死病毒主衣壳重组蛋白多克隆抗体免疫原性; Keywords red-spotted grouper nervous necrosis virus（RGNNV） major capsid recombinant protein polyclonal antibody immunogenicity; 分类号 S917 [农业科学—水产科学] S943 [农业科学—水产养殖]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名以汉坦病毒重组核衣壳蛋白为抗原进行ELISA血清分型的研究被引量：4: 3; 作者刘京梅李泉根李新军张伶刘雪林李森林 ElghF.; 机构总后勤部防疫队疾病监督监测中心 DepartmentofVirology 北京军区联勤部防疫队 DepartmentofMicrobiology DepartmentofVirology; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期269-270,共2页; 基金军队医药卫生科研基金资助 No.98M154; 文摘目的以汉坦病毒重组核衣壳蛋白(NP)为抗原,对陕西、河北两省部分地区HFRS患者的血清进行ELISA分型。方法用5种汉坦病毒NP为抗原,建立一种间接ELISA法,并检测上述地区患者血清中特异性IgG。结果陕西、河北两省部分地区汉坦病毒的感染以血清型HTN为主,其次为SEO型,并检测出2例疑似DOB型感染的血清。结论用汉坦病毒NP作抗原进行ELISA血清分型是可行的,并首次发现我国存在DOB血清型的免疫学证据。; 关键词汉坦病毒重组核衣壳蛋白抗原 ELISA DOB型感染; Keywords hantavirus recombinant nucleocapsid protein serotype DOB ELISA; 分类号 R373.32 [医药卫生—病原生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪圆环病毒2型重组Cap蛋白在昆虫杆状病毒中的表达被引量：26: 4; 作者刘长明陆月华张超范危艳武刘焕章童光志; 机构中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期479-482,共4页; 基金黑龙江省科技攻关资助项目; 文摘猪圆环病毒2型(PCV2)基因组包含2个开放阅读框架(ORFs),其中ORF1编码病毒复制相关蛋白(Rep),ORF2编码病毒衣壳蛋白(Cap)。为了在昆虫细胞表达Cap蛋白,本研究采用PCR扩增PCV2-ORF2编码基因,将PCR产物插入到昆虫杆状病毒转移载体上,经酶切反应及DNA序列分析得到验证。重组质粒与昆虫杆状病毒线性基因组混合,转染到昆虫细胞(Sf-21)进行基因重组,经3次病毒蚀斑克隆,获得高效表达Cap蛋白的重组杆状病毒,毒价可达1.28×108pfu/mL。采用SDS-PAGE凝胶电泳分析表明,重组Cap融合蛋白分子量为32.8 ku,占总蛋白含量的17.2%。免疫印迹试验分析表明,重组Cap蛋白与PCV2阳性血清产生特异性反应,证明该重组蛋白具有良好的免疫活性反应。本研究为进一步进行该病毒分子诊断、亚单位疫苗以及分子生物学等研究奠定了基础。; 关键词猪圆环病毒2型重组衣壳蛋白杆状病毒表达; Keywords porcine circovirus type 2 recombinant capsid protein baculovirus expression; 分类号 S852.659 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪生殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白在昆虫细胞中的表达及其用作诊断抗原的研究被引量：5: 5; 作者杜文金刘卫王志亮孙融冰宋翠平况慧星; 机构农业部动物检疫所核心生物技术实验室新加坡国立大学分子农业生物学院; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 2000年第S1期40-43,共4页; 文摘对猪生殖与呼吸综合征病毒（ＰＲＲＳＶ）核衣壳蛋白（Ｎ）作为ＥＬＩＳＡ抗原进行了研究，将编码ＰＲＲＳＶＮ蛋白的基因０ＲＦ７ｃＤＮＡ插入杆状病毒表达载体ｐＢｌｕｅＢａｃＨｉｓ２Ａ，通过同源重组获得了重组杆状病毒ＯＲＦ７－ＡｃＭＮＰＶ，感染昆虫细胞ＳＦ９表达了Ｎ蛋白，占细胞总蛋白的７．０７％，纯化后作为抗原建立了间接ＥＬＩＳＡ，与ＩＤＥＸＸ公司的ＥＬＩＳＡ诊断试剂盒有９６％的符合率，与ＩＦＡ有１００％的符合率。试验证实：ＰＲＲＳＶＮ蛋白在昆虫细胞中得到高效表达且是检测ＰＲＲＳＶ抗体的良好抗原。; 关键词猪生殖和呼吸综合征病毒重组核衣壳蛋白酶联免疫吸附试验; Keywords Porcine reproductive and respiratory syndrome virus Recombinant nucleocapsid protein ELISA; 分类号 S85 [农业科学—兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名鹅圆环病毒抗体间接ELISA检测方法的建立被引量：4: 6; 作者姜轲冉胡东健孙红霞于洪涛刘晓宁俞永裕余权法陈维虎余旭平; 机构浙江大学动物科学学院农业部动物病毒学重点实验室宁波市象山畜牧兽医局宁波市余姚畜牧兽医局宁波市畜牧兽医局; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期134-137,共4页; 基金国家自然科学基金(307716080) 浙江省重点科技项目(2007C22051 011102120); 文摘为建立鹅圆环病毒(GoCV)抗体的检测方法,本研究通过原核表达重组核衣壳(Cap)蛋白,将纯化的该重组蛋白作为ELISA检测的包被抗原,利用交叉反应性,以羊抗鸡IgG(HRP-IgG)作为二抗,经反应条件的优化,建立了检测鹅血清GoCV抗体的间接ELISA方法。确立的ELISA反应最适条件为:抗原包被浓度为2.05μg/mL,待检血清稀释度为1∶50,HRP-IgG稀释度为1∶2000,待测血清和二抗均于37℃反应1.5h,底物于室温显色10 min。经38份阴性血清检测确定阴阳性临界值为0.25。特异性试验结果显示,该方法与大肠杆菌、新城疫、禽流感H5和H9、小鹅瘟、鹅副粘病毒抗原阳性血清均无交叉反应;重复性试验结果显示,其批内和批间变异系数均小于10%。应用该方法检测了从4群GoCV PCR检测阳性种鹅群采集的血清,结果显示其血清阳性率在60.0%～90.9%。本实验建立的间接ELISA方法具有较好的特异性和重复性,为进一步开展GoCV流行病学调查提供了一种便捷可靠的手段。; 关键词鹅圆环病毒重组核衣壳蛋白间接ELISA; Keywords goose circovirus recombinant capsid protein indirect ELISA; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	抗犬瘟热病毒重组核衣壳蛋白单克隆抗体的制备及鉴定	周洁姜骞张洪英刘家森刘立奎陈洪岩韩凌霞司昌德曲连东	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2007	9	在线阅读下载PDF 职称材料
2	赤点石斑鱼神经坏死病毒主衣壳重组蛋白多克隆抗体的制备	苏友禄郭志勋冯娟闫云锋喻达辉	《南方水产》	2010	2	在线阅读下载PDF 职称材料
3	以汉坦病毒重组核衣壳蛋白为抗原进行ELISA血清分型的研究	刘京梅李泉根李新军张伶刘雪林李森林 ElghF.	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2001	4	在线阅读下载PDF 职称材料
4	猪圆环病毒2型重组Cap蛋白在昆虫杆状病毒中的表达	刘长明陆月华张超范危艳武刘焕章童光志	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2005	26	在线阅读下载PDF 职称材料
5	猪生殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白在昆虫细胞中的表达及其用作诊断抗原的研究	杜文金刘卫王志亮孙融冰宋翠平况慧星	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD	2000	5	在线阅读下载PDF 职称材料
6	鹅圆环病毒抗体间接ELISA检测方法的建立	姜轲冉胡东健孙红霞于洪涛刘晓宁俞永裕余权法陈维虎余旭平	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2013	4	在线阅读下载PDF 职称材料