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鼠疫F1-V重组融合蛋白抗原的制备及其免疫保护效果的研究
被引量：
5
1
作者
王栋
黄顺军
+5 位作者
邢丽
郭习勤
韩岳
罗德炎
李敏
王希良
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2006年第3期287-291,共5页
为制备鼠疫耶尔森氏菌F1-V重组融合蛋白抗原,观察其免疫原性和免疫保护效果,通过疏水层析、阴离子交换层析、凝胶过滤层析纯化鼠疫F1-V重组融合蛋白抗原.用氢氧化铝凝胶吸附制备试验性鼠疫F1-V重组融合蛋白抗原,皮下接种健康BALB/c小鼠,...
为制备鼠疫耶尔森氏菌F1-V重组融合蛋白抗原,观察其免疫原性和免疫保护效果,通过疏水层析、阴离子交换层析、凝胶过滤层析纯化鼠疫F1-V重组融合蛋白抗原.用氢氧化铝凝胶吸附制备试验性鼠疫F1-V重组融合蛋白抗原,皮下接种健康BALB/c小鼠,ELISA检测血清F1-V抗体效价、MTT法测定淋巴细胞增殖能力,进一步用400LD50鼠疫耶尔森氏菌141标准毒株皮下攻毒,观察动物的存活情况.通过三步柱层析纯化获得的鼠疫F1-V重组融合蛋白抗原纯度达到90%以上.氢氧化铝凝胶吸附的鼠疫F1-V重组融合蛋白抗原免疫BALB/c小鼠三次,血清抗F1-V抗体效价为1∶(51200±800),对耶尔森氏菌141强毒株攻击的保护率是90%.上述结果表明,制备的鼠疫F1-V重组融合蛋白抗原具有良好的免疫原性和免疫保护效果,为研制鼠疫F1-V重组融合蛋白疫苗奠定了基础.
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关键词
鼠疫耶尔森氏菌
F1-V
重组
融合
蛋白
抗原
免疫保护效果
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职称材料
HCMV重组嵌合抗原表达质粒构建及免疫反应的初步鉴定
2
作者
曾宪聪
汪小五
+1 位作者
陈伟
王林定
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2014年第6期752-756,共5页
目的选用人巨细胞病毒(HCMV)抗原性强且亲水性较高片段构建融合抗原表达质粒,诱导其表达,纯化目的蛋白;并初步鉴定其免疫反应性。方法通过Protean软件分析了HCMV UL32、UL44、UL83序列,设计合理引物;各基因片段用Overlap方法连接,并引入...
目的选用人巨细胞病毒(HCMV)抗原性强且亲水性较高片段构建融合抗原表达质粒,诱导其表达,纯化目的蛋白;并初步鉴定其免疫反应性。方法通过Protean软件分析了HCMV UL32、UL44、UL83序列,设计合理引物;各基因片段用Overlap方法连接,并引入BglⅡ、BamHⅠ酶切位点,使之可通过酶切与质粒pQE-80L连接。重组质粒转化入感受态BL21(DE3)菌株,经PCR、酶切鉴定目的基因后再诱导、表达、纯化,获得目的蛋白,采用Western blot法检测免疫反应性。结果诱导后的重组菌pQE80-L-UL32-UL44-UL83经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)证实蛋白表达在包涵体。纯化后获得大小约为52 ku的目的蛋白,采用Western blot法检测证实重组嵌合抗原能与HCMV阳性血清有反应。结论构建了重组嵌合抗原表达质粒,并诱导、表达、纯化获得目的蛋白。Western blot法鉴定嵌合抗原是HCMV特异性抗原且有免疫反应性。
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关键词
人巨细胞病毒
重组融合抗原
免疫反应性
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职称材料
题名
鼠疫F1-V重组融合蛋白抗原的制备及其免疫保护效果的研究
被引量：
5
1
作者
王栋
黄顺军
邢丽
郭习勤
韩岳
罗德炎
李敏
王希良
机构
军事医学科学院微生物流行病研究所免疫学研究室
青海省地方病研究所鼠疫科
出处
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2006年第3期287-291,共5页
文摘
为制备鼠疫耶尔森氏菌F1-V重组融合蛋白抗原,观察其免疫原性和免疫保护效果,通过疏水层析、阴离子交换层析、凝胶过滤层析纯化鼠疫F1-V重组融合蛋白抗原.用氢氧化铝凝胶吸附制备试验性鼠疫F1-V重组融合蛋白抗原,皮下接种健康BALB/c小鼠,ELISA检测血清F1-V抗体效价、MTT法测定淋巴细胞增殖能力,进一步用400LD50鼠疫耶尔森氏菌141标准毒株皮下攻毒,观察动物的存活情况.通过三步柱层析纯化获得的鼠疫F1-V重组融合蛋白抗原纯度达到90%以上.氢氧化铝凝胶吸附的鼠疫F1-V重组融合蛋白抗原免疫BALB/c小鼠三次,血清抗F1-V抗体效价为1∶(51200±800),对耶尔森氏菌141强毒株攻击的保护率是90%.上述结果表明,制备的鼠疫F1-V重组融合蛋白抗原具有良好的免疫原性和免疫保护效果,为研制鼠疫F1-V重组融合蛋白疫苗奠定了基础.
关键词
鼠疫耶尔森氏菌
F1-V
重组
融合
蛋白
抗原
免疫保护效果
Keywords
Yersinia pestis, recombinant F1-V fusion protein antigen, immuno-protection
分类号
R363 [医药卫生—病理学]
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职称材料
题名
HCMV重组嵌合抗原表达质粒构建及免疫反应的初步鉴定
2
作者
曾宪聪
汪小五
陈伟
王林定
机构
安徽医科大学微生物学教研室
安徽医科大学病原与免疫学实验室
出处
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2014年第6期752-756,共5页
基金
国家自然科学基金(编号:81271837)
安徽省教育厅自然科学基金(编号:KJ2012A161)
安徽医科大学博士科研经费资助项目(编号:XJ200914)
文摘
目的选用人巨细胞病毒(HCMV)抗原性强且亲水性较高片段构建融合抗原表达质粒,诱导其表达,纯化目的蛋白;并初步鉴定其免疫反应性。方法通过Protean软件分析了HCMV UL32、UL44、UL83序列,设计合理引物;各基因片段用Overlap方法连接,并引入BglⅡ、BamHⅠ酶切位点,使之可通过酶切与质粒pQE-80L连接。重组质粒转化入感受态BL21(DE3)菌株,经PCR、酶切鉴定目的基因后再诱导、表达、纯化,获得目的蛋白,采用Western blot法检测免疫反应性。结果诱导后的重组菌pQE80-L-UL32-UL44-UL83经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)证实蛋白表达在包涵体。纯化后获得大小约为52 ku的目的蛋白,采用Western blot法检测证实重组嵌合抗原能与HCMV阳性血清有反应。结论构建了重组嵌合抗原表达质粒,并诱导、表达、纯化获得目的蛋白。Western blot法鉴定嵌合抗原是HCMV特异性抗原且有免疫反应性。
关键词
人巨细胞病毒
重组融合抗原
免疫反应性
Keywords
HCMV
fusion antigen
immune reactivity
分类号
R373.4 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
鼠疫F1-V重组融合蛋白抗原的制备及其免疫保护效果的研究
王栋
黄顺军
邢丽
郭习勤
韩岳
罗德炎
李敏
王希良
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2006
5
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
HCMV重组嵌合抗原表达质粒构建及免疫反应的初步鉴定
曾宪聪
汪小五
陈伟
王林定
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2014
0
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职称材料
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