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用于重组药物蛋白生产的人源化细胞系研究进展 被引量：2
1
作者 李琴 王天云 +2 位作者 王小引 郭潇 林艳 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期1274-1277,1281,共5页
哺乳动物细胞表达系统由于存在翻译后加工修饰(PTMs)机制,能够产生分子量大、结构复杂的蛋白,是重组药物蛋白生产的优选系统。虽然非人源化的哺乳动物细胞系的PTMs与人源化细胞类似,但仍能进行人源化细胞不存在的其他PTMs,表达药物蛋白... 哺乳动物细胞表达系统由于存在翻译后加工修饰(PTMs)机制,能够产生分子量大、结构复杂的蛋白,是重组药物蛋白生产的优选系统。虽然非人源化的哺乳动物细胞系的PTMs与人源化细胞类似,但仍能进行人源化细胞不存在的其他PTMs,表达药物蛋白存在免疫原性、改变药物代谢动力学等缺点。近年来,人源化的细胞系已经用于治疗重组药物蛋白的生产,此类细胞系的优点在于具备和人源细胞完全一致的PTMs,表达的蛋白活性高、疗效好。目前用于重组药物蛋白生产及临床前研究的人源细胞系主要有HEK293、HT-1080、PER.C6等。本文综述了人源化细胞用于重组药物蛋白的最新进展。 展开更多
关键词 表达系统 重组药物蛋白 人源化细胞 翻译后加工修饰
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转基因植物生产重组药物蛋白的研究进展 被引量：2
2
作者 秦宏伟 《生物技术通报》 CAS CSCD 2007年第3期6-8,15,共4页
转基因植物作为一种新型生物反应器,可以安全、经济、有效的生产各种重组蛋白,以此作为大规模的重组药物生产平台备受瞩目。但是表达量低、下游处理复杂、糖基化结构改变是植物反应器中经常遇到的困难,这些困难限制了植物表达重组药物... 转基因植物作为一种新型生物反应器,可以安全、经济、有效的生产各种重组蛋白,以此作为大规模的重组药物生产平台备受瞩目。但是表达量低、下游处理复杂、糖基化结构改变是植物反应器中经常遇到的困难,这些困难限制了植物表达重组药物蛋白的商业化发展。针对这些问题,人们分别采用不同的生物技术策略加以解决,对此做一简要综述。 展开更多
关键词 转基因植物 生物反应器 重组药物蛋白
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基于种子生产植物源重组药物蛋白研究进展 被引量：1
3
作者 蒋滢 杨静 +3 位作者 齐广勋 邢国杰 马莲菊 杨向东 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1597-1605,共9页
种子作为植物重要储藏器官之一,为高效表达外源重组药物蛋白提供了理想的载体。与其他植物生产系统相比,植物种子反应器具有多方面的优势,如表达水平较高,重组蛋白活性稳定,易于储藏和运输以及便于加工、分离和纯化等。在过去的20年中,... 种子作为植物重要储藏器官之一,为高效表达外源重组药物蛋白提供了理想的载体。与其他植物生产系统相比,植物种子反应器具有多方面的优势,如表达水平较高,重组蛋白活性稳定,易于储藏和运输以及便于加工、分离和纯化等。在过去的20年中,利用植物种子作为反应器表达了一系列重组药物蛋白,部分药物蛋白已进入商业化生产阶段。本文对种子生物反应器的特点及利用,就近年来基于种子生产植物源重组药物蛋白的研究进展进行了综述,并对植物种子生物反应器研究中的几个问题及未来的发展方向进行了探讨。 展开更多
关键词 植物源重组药物蛋白 种子 植物反应器 研究进展
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全柱成像毛细管等电聚焦电泳分析蛋白质药物电荷异质性 被引量：9
4
作者 孟晓光 甄里 +5 位作者 刘悦玫 侯利平 刘丹 李斌 欧阳伟民 魏开华 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期343-348,共6页
评价了cIEF-WCID检测多肽与蛋白质药物等电点的应用效果。测定标准多肽的等电点,验证了cIEF-WCID具有高的准确度和良好的重复性(相对标准偏差<0.50%)。人血红蛋白的4种主要异构体实现了基线分离;甘赖胰岛素的重复测试均只检出单一特... 评价了cIEF-WCID检测多肽与蛋白质药物等电点的应用效果。测定标准多肽的等电点,验证了cIEF-WCID具有高的准确度和良好的重复性(相对标准偏差<0.50%)。人血红蛋白的4种主要异构体实现了基线分离;甘赖胰岛素的重复测试均只检出单一特征峰(p I 5.95±0.01);比较重组人生长激素原液和成品,等电点特征峰比例差异明显,且成品有新特征峰出现;对比进口及国产贝伐单抗,发现厂家1、3与原研药基本一致,厂家1的主成分迁移规律与原研药高度一致,厂家2的重链C末端K缺失、N末端焦谷氨酸环化或脱酰胺修饰影响了电荷异质性;通过考察尿素浓度、电解质范围和聚焦时间,优化了检测重组人促卵泡素等电点条件:2 mol/L尿素,两性电解质pH 2.5~5.0与pH 3.0~10.0按1∶1混合,聚焦电压1 000 V(1 min)~1 800 V(4 min)~2 200 V(1 min)。cIEF-WCID可快速、准确测定具有电荷异质性的蛋白类药物等电点,分辨率和重复性好,尤其是可以跟踪聚焦过程中样本的迁移特征,特别适合蛋白类药物复杂电荷异质性的检测。 展开更多
关键词 全柱成像毛细管等电聚焦电泳 电荷异质性 重组蛋白质药物 抗体 药学研究
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不同批次的重组诱饵型受体创新药物RC28-E1与RC28-E2对视网膜新生血管的药效学比较及机制 被引量：3
5
作者 谷中秀 姜静 +6 位作者 黄敏 吴绵绵 郭芳 李慎军 房健民 赵少贞 张琰 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期581-589,共9页
目的探讨不同批次的重组诱饵型受体创新药物RC28-E1与RC28-E2对视网膜新生血管的药效学比较及作用机制。方法选取健康清洁级4日龄C57BL/6J幼鼠60只，应用随机数字表法随机分为正常对照组、血管内皮生长因子（VEGF）＋成纤维细胞生长因子... 目的探讨不同批次的重组诱饵型受体创新药物RC28-E1与RC28-E2对视网膜新生血管的药效学比较及作用机制。方法选取健康清洁级4日龄C57BL/6J幼鼠60只，应用随机数字表法随机分为正常对照组、血管内皮生长因子（VEGF）＋成纤维细胞生长因子2（FGF2）组、VEGF＋FGF2＋RC28-E1组、VEGF＋FGF2＋RC28-E2组、VEGF＋FGF2＋conbercept组、VEGF＋FGF2＋FGF trap组，每组10只。取各组视网膜组织块构建培养体系，加入用饥饿培养基配置的相应因子和药物刺激，正常对照组加饥饿培养基。将各组视网膜组织块进行植物凝集素（Isolectin B4）染色并拍照，计算各组单位血管长度下视网膜血管顶细胞分叉的数量。另选96只健康清洁级7日龄C57BL/6J幼鼠，应用随机数字表法随机分为正常对照组、氧诱导视网膜病变（OIR）模型对照组、OIR＋RC28-E1组、OIR＋RC28-E2组、OIR＋conbercept组和OIR＋FGF trap组，每组16只。正常对照组在常氧下饲养10 d，其余各组在高氧环境中饲养5 d后在常氧状态下再饲养5 d。各组取17日龄鼠视网膜进行Isolectin B4染色并拍照，用计算机软件分析视网膜相对无灌注区面积和新生血管像素。Western blot法检测OIR实验各组视网膜中VEGF和FGF2的蛋白水平。最后，在VEGF和FGF2刺激下的视网膜血管内皮细胞（RF/6A）中，检测给予RC28-E1、conbercept以及FGF trap处理后，细胞的MEK-细胞外调节蛋白激酶（Erk）、蛋白激酶C（PKC）以及蛋白激酶B（Akt）信号传导通路的活性变化。结果视网膜组织块研究结果显示，VEGF＋FGF2＋RC28-E1组、VEGF＋FGF2＋RC28-E2组、VEGF＋FGF2＋conbercept组和VEGF＋FGF2＋FGF trap组中单位血管长度的顶细胞分叉数目均明显少于VEGF＋FGF2组，差异均有统计学意义（均P〈0.001），其中RC28-E1组与RC28-E2组的血管顶细胞分叉数量相似，差异无统计学意义（P＝0.15），但均明显少于VEGF＋FGF2＋conbercept组和VEGF＋FGF2＋FGF trap组，差异均有统计学意义（均P〈0.001）。OIR模型对照组无灌注区相对面积明显大于各药物干预组，差异均有统计学意义（均P〈0.05），OIR＋RC28-E1组与OIR＋RC28-E2组视网膜无灌注区相对面积的比较，差异无统计学意义（P＝0.17），但二者明显小于OIR＋conbercept组和OIR＋FGF trap组，差异均有统计学意义（均P〈0.05）。各干预组新生血管的相对像素值明显低于OIR模型对照组，差异均有统计学意义（均P〈0.001），OIR＋RC28-E1组视网膜新生血管的相对像素值明显低于VEGF＋FGF2＋conbercept组和VEGF＋FGF2＋FGF trap组，差异均有统计学意义（均P〈0.05），但与OIR＋RC28-E2组相比，差异无统计学意义（P＝0.39）。Western blot结果显示，OIR小鼠视网膜中VEGF和FGF2的蛋白表达均较正常对照组显著上调，差异均有统计学意义（均P〈0.001），而RC28-E1和RC28-E2可使其降至正常水平。VEGF和FGF2可诱导RF/6A细胞中的MEK-Erk通路活性增强，而RC28-E1可显著抑制这一通路的过度激活。结论RC28-E1和RC28-E2可在初生小鼠视网膜组织块中抑制血管生成，并减少OIR小鼠模型中视网膜的无灌注区，减轻新生血管生成。药理批次和中试批次的RC28-E在体内外模型中的效果相当，稳定性可靠，且优于临床同类药物conbercept和FGF trap。RC28-E1可能是通过抑制视网膜血管内皮细胞中MEK-Erk通路的过度激活而达到抑制病理性新生血管生成的效果的。 展开更多
关键词 视网膜新生血管 诱饵型受体 碱性成纤维细胞生长因子 血管内皮生长因子 重组蛋白质药物
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应用MALDI-TOF-MS鉴定重组人粒/巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)的结构
6
作者 王红霞 张学敏 杨松成 《质谱学报》 EI CAS CSCD 2000年第3期69-70,共2页
关键词 RHGM-CSF 重组蛋白药物 结构鉴定 MALDI-TOF-MS
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利用转基因植物生产人乳蛋白 被引量：31
7
作者 刘德虎 《生物技术通报》 CAS CSCD 1999年第4期1-5,共5页
ＡｇｒｉｃｅｌＲｅｐｏｒｔ１９９９年３２卷第３期第２０页报道：在人乳和其他人分泌物中存在的铁离子结合糖蛋白乳铁蛋白（ｌａｃｔｏｆｅｒｉｎ）是胎儿防御体系中的重要成分，具有抗细菌、真菌和抗病毒活性及其他多种功能。法国的... ＡｇｒｉｃｅｌＲｅｐｏｒｔ１９９９年３２卷第３期第２０页报道：在人乳和其他人分泌物中存在的铁离子结合糖蛋白乳铁蛋白（ｌａｃｔｏｆｅｒｉｎ）是胎儿防御体系中的重要成分，具有抗细菌、真菌和抗病毒活性及其他多种功能。法国的Ｖ．Ｓａｌｍｏｎ，Ｇ．Ｓｐｉｋ（法... 展开更多
关键词 生物技术 转基因植物 重组药物蛋白
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生物技术药物:人类健康的未来保障
8
作者 田文志 《生物产业技术》 2013年第5期1-1,共1页
生物技术药物，顾名思义，是指通过生物技术（涉及DNA重组技术）所生产的用于治疗疾病的药物。从最早的疫苗、重组蛋白药物（如生长素、促红细胞生成素、白介素等）到近年来的单克隆抗体、干扰性核酸（siRNA）、纳米抗体（nanobodies）... 生物技术药物，顾名思义，是指通过生物技术（涉及DNA重组技术）所生产的用于治疗疾病的药物。从最早的疫苗、重组蛋白药物（如生长素、促红细胞生成素、白介素等）到近年来的单克隆抗体、干扰性核酸（siRNA）、纳米抗体（nanobodies）、基因治疗、干细胞（stemcells）等。这些药物的陆续问世，已经或正在为人类健康、防病治病、社会经济发展等发挥举足轻重的作用。而靶向药物的出现，更是生物技术药物领域的一朵奇葩，以其独特的疗效、极高的安全性、良好的耐受性，在重大疾病药物市场上脱颖而出，获得了包括患者及医生在内的广泛而高度的认可。 展开更多
关键词 生物技术药物 人类健康 DNA重组技术 促红细胞生成素 单克隆抗体 保障 重组蛋白药物 社会经济发展
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