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不同构建策略对D-氨基酸氧化酶表达的影响及发酵调节
1
作者
冯美卿
史训龙
+2 位作者
黄海
张金晨
周珮
《复旦学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第1期116-119,共4页
目的构建不含编码β-内酰胺酶编码基因的D-氨基酸氧化酶(D-amino acid oxidase,DAAO)工程菌,对不同构建策略构建的重组菌进行发酵调节研究。方法采用分子生物学手段,利用不同的策略、不同的毕赤酵母宿主菌,构建DAAO工程菌;利用微生物发...
目的构建不含编码β-内酰胺酶编码基因的D-氨基酸氧化酶(D-amino acid oxidase,DAAO)工程菌,对不同构建策略构建的重组菌进行发酵调节研究。方法采用分子生物学手段,利用不同的策略、不同的毕赤酵母宿主菌,构建DAAO工程菌;利用微生物发酵和调节手段,对工程菌的发酵条件进行优化。结果获得了表型不同的3株重组菌(Muts的PDK13和PDGA10,Mut+的PDG27),它们的最佳生长条件基本相似,诱导表达条件却不相同,在Basalsalts培养基内,当生长时间为36h,诱导培养基起始pH为6.0、甲醇浓度为0.5%时,最有利于DAAO表达。在菌体密度相同的条件下,Mut+表型(PDG27)甲醇代谢快,诱导24h,DAAO活力达到最高;Muts型(PDK13和PDGA10)甲醇代谢慢,诱导36h,DAAO活力达最高;通气量一定时,菌体密度增加,DAAO表达量增加,菌体增加到一定程度表达量反而下降,表明通气量应随菌体密度的增大而增加。结论Muts型重组菌对通气量要求低且更有利于高密度发酵。
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关键词
DAAO
重组菌表型
构建策略
表达
发酵调节
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职称材料
题名
不同构建策略对D-氨基酸氧化酶表达的影响及发酵调节
1
作者
冯美卿
史训龙
黄海
张金晨
周珮
机构
复旦大学药学院生物合成教研室
出处
《复旦学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第1期116-119,共4页
文摘
目的构建不含编码β-内酰胺酶编码基因的D-氨基酸氧化酶(D-amino acid oxidase,DAAO)工程菌,对不同构建策略构建的重组菌进行发酵调节研究。方法采用分子生物学手段,利用不同的策略、不同的毕赤酵母宿主菌,构建DAAO工程菌;利用微生物发酵和调节手段,对工程菌的发酵条件进行优化。结果获得了表型不同的3株重组菌(Muts的PDK13和PDGA10,Mut+的PDG27),它们的最佳生长条件基本相似,诱导表达条件却不相同,在Basalsalts培养基内,当生长时间为36h,诱导培养基起始pH为6.0、甲醇浓度为0.5%时,最有利于DAAO表达。在菌体密度相同的条件下,Mut+表型(PDG27)甲醇代谢快,诱导24h,DAAO活力达到最高;Muts型(PDK13和PDGA10)甲醇代谢慢,诱导36h,DAAO活力达最高;通气量一定时,菌体密度增加,DAAO表达量增加,菌体增加到一定程度表达量反而下降,表明通气量应随菌体密度的增大而增加。结论Muts型重组菌对通气量要求低且更有利于高密度发酵。
关键词
DAAO
重组菌表型
构建策略
表达
发酵调节
Keywords
D-amino acid oxidation
mentation regulation Construction Strategies
phenotype
expression
fer
分类号
Q814 [生物学—生物工程]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
不同构建策略对D-氨基酸氧化酶表达的影响及发酵调节
冯美卿
史训龙
黄海
张金晨
周珮
《复旦学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2008
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