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产3-羟脯氨酸重组菌的构建及发酵优化
1
作者
姚雪娜
张震宇
+3 位作者
孙付保
陈昶
黄建华
沈松
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第3期243-251,共9页
顺式-3-羟基-L-脯氨酸(顺式-3-羟脯氨酸)可用于合成多种抗癌药物,具有重要的商业价值,目前大多通过添加IPTG来诱导表达脯氨酸-3-羟化酶,采用两步法生物合成顺式-3-羟脯氨酸。作者通过目的基因优化设计,引入强启动子色氨酸串联启动子(Ptr...
顺式-3-羟基-L-脯氨酸(顺式-3-羟脯氨酸)可用于合成多种抗癌药物,具有重要的商业价值,目前大多通过添加IPTG来诱导表达脯氨酸-3-羟化酶,采用两步法生物合成顺式-3-羟脯氨酸。作者通过目的基因优化设计,引入强启动子色氨酸串联启动子(Ptrp2)来避免异源表达时的诱导剂使用,构建重组质粒p ES-Ptrp2-P3H,成功构建了重组大肠杆菌BL21(DE3)/p ET21a-Ptrp2-P3H,优化后的脯氨酸-3-羟化酶基因(P3H)改变了168个碱基,GC含量由原来的64.83%降低到49.31%。该菌在初步优化培养基(葡萄糖1 g/d L,甘油0.125 g/d L,胰蛋白胨1.6 g/d L,(NH_4)_2SO_40.5 g/d L,K_2HPO_40.1 g/d L,NaCl 0.2 g/d L,FeSO_41 mmol/L,MgSO_40.5 g/d L,CaCl_20.015 g/d L,脯氨酸10 g/L,pH 7.5)上能一步法原位合成顺式-3-羟脯氨酸,摇瓶发酵24 h,产量0.8 g/L,比优化前提高一倍以上,为进一步开展顺-3-羟脯氨酸产业化提供了依据。
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关键词
脯氨酸-3-羟化酶
顺式-3-羟脯氨酸
密码子优化
重组菌构建
发酵优化
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职称材料
谷氨酸脱羧酶基因工程改造研究进展
被引量:
3
2
作者
靳春鹏
杨套伟
+2 位作者
徐美娟
张显
饶志明
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第12期227-233,共7页
γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)是一种具有重要生理功能的天然氨基酸,广泛应用在医药、食品、化工等行业。利用谷氨酸脱羧酶催化法合成GABA因其反应条件温、对环境友好和原料易得已成为当前研究的热点。该研究论述了催化合成G...
γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)是一种具有重要生理功能的天然氨基酸,广泛应用在医药、食品、化工等行业。利用谷氨酸脱羧酶催化法合成GABA因其反应条件温、对环境友好和原料易得已成为当前研究的热点。该研究论述了催化合成GABA关键酶谷氨酸脱羧酶的分子改造、基因工程菌构建等研究进展。
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关键词
谷氨酸脱羧酶
Γ-氨基丁酸
分子改造
重组菌构建
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职称材料
题名
产3-羟脯氨酸重组菌的构建及发酵优化
1
作者
姚雪娜
张震宇
孙付保
陈昶
黄建华
沈松
机构
江南大学生物工程学院
江南大学工业生物技术教育部重点实验室
江南大学糖化学与生物技术教育部重点实验室
出处
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第3期243-251,共9页
基金
国家自然科学基金项目(30800018
30970058)
+2 种基金
江苏省自然科学基金项目(BK2012554)
高等学校博士学科点专项科研基金项目(200802951036)
工业生物技术教育部重点实验室主任基金项目(KLIB-ZR200801)
文摘
顺式-3-羟基-L-脯氨酸(顺式-3-羟脯氨酸)可用于合成多种抗癌药物,具有重要的商业价值,目前大多通过添加IPTG来诱导表达脯氨酸-3-羟化酶,采用两步法生物合成顺式-3-羟脯氨酸。作者通过目的基因优化设计,引入强启动子色氨酸串联启动子(Ptrp2)来避免异源表达时的诱导剂使用,构建重组质粒p ES-Ptrp2-P3H,成功构建了重组大肠杆菌BL21(DE3)/p ET21a-Ptrp2-P3H,优化后的脯氨酸-3-羟化酶基因(P3H)改变了168个碱基,GC含量由原来的64.83%降低到49.31%。该菌在初步优化培养基(葡萄糖1 g/d L,甘油0.125 g/d L,胰蛋白胨1.6 g/d L,(NH_4)_2SO_40.5 g/d L,K_2HPO_40.1 g/d L,NaCl 0.2 g/d L,FeSO_41 mmol/L,MgSO_40.5 g/d L,CaCl_20.015 g/d L,脯氨酸10 g/L,pH 7.5)上能一步法原位合成顺式-3-羟脯氨酸,摇瓶发酵24 h,产量0.8 g/L,比优化前提高一倍以上,为进一步开展顺-3-羟脯氨酸产业化提供了依据。
关键词
脯氨酸-3-羟化酶
顺式-3-羟脯氨酸
密码子优化
重组菌构建
发酵优化
Keywords
proline-3-hydroxylase,cis-3-hydroxyproline, codon optimization,construction of recombinant Escherichia coli, fermentation optimize
分类号
TQ920.1 [轻工技术与工程—发酵工程]
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职称材料
题名
谷氨酸脱羧酶基因工程改造研究进展
被引量:
3
2
作者
靳春鹏
杨套伟
徐美娟
张显
饶志明
机构
国家知识产权局专利局专利审查协作北京中心
江南大学生物工程学院
江南大学(如皋)食品生物技术研究所
出处
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第12期227-233,共7页
基金
国家高技术研究发展计划(863计划)(2015AA021004)
江苏省杰出青年科学基金(BK20150002)
+1 种基金
江苏省自然科学基金(BK20161292)
江苏高校优势学科建设工程
文摘
γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)是一种具有重要生理功能的天然氨基酸,广泛应用在医药、食品、化工等行业。利用谷氨酸脱羧酶催化法合成GABA因其反应条件温、对环境友好和原料易得已成为当前研究的热点。该研究论述了催化合成GABA关键酶谷氨酸脱羧酶的分子改造、基因工程菌构建等研究进展。
关键词
谷氨酸脱羧酶
Γ-氨基丁酸
分子改造
重组菌构建
Keywords
glutamate decarboxylase
γ-aminobutyric acid
molecular modification
construction of recombinant strain
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
Q55 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
产3-羟脯氨酸重组菌的构建及发酵优化
姚雪娜
张震宇
孙付保
陈昶
黄建华
沈松
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017
0
在线阅读
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职称材料
2
谷氨酸脱羧酶基因工程改造研究进展
靳春鹏
杨套伟
徐美娟
张显
饶志明
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2016
3
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