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腺病毒载体介导肝细胞生长因子基因对冠状动脉再狭窄的预防作用
1
作者
刘本德
吴红军
曾秋棠
《华中科技大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第1期75-77,81,共4页
目的应用重组腺病毒载体介导的肝细胞生长因子(HGF)基因转染血管内皮细胞(VEC)及血管平滑肌细胞(VSMC),探讨HGF基因对其凋亡的诱导作用。方法以肝细胞中抽提的总RNA为模板,反转录cDNA,采用RT-PCR技术获得HGF基因,并引入酶切位点,转染大...
目的应用重组腺病毒载体介导的肝细胞生长因子(HGF)基因转染血管内皮细胞(VEC)及血管平滑肌细胞(VSMC),探讨HGF基因对其凋亡的诱导作用。方法以肝细胞中抽提的总RNA为模板,反转录cDNA,采用RT-PCR技术获得HGF基因,并引入酶切位点,转染大肠埃希菌,筛选阳性菌落,经酶切及测序证实后,转染腺病毒,制造病毒包涵体,经3轮扩増,制备高效表达HGF基因腺病毒载体(Ad-HGF)。以此感染VEC及VSMC,设为Ad-HGF组;再以人工合成HGF培养VEC及VSMC为阳性对照组(HGF组);以未感染Ad-HGF的细胞为阴性对照(对照组)。并采用流式细胞仪检测缺氧情况下各组细胞的凋亡率。结果VEC的Ad-HGF、HGF组细胞凋亡率均低于对照组,差异均有极显著性意义(均P<0.01),但VSMC的3组细胞凋亡率差异无显著性意义(P>0.05)。结论腺病毒载体介导HGF基因感染VEC后能在缺氧情况下有效地阻止VEC发生凋亡,但不能有效抑制VSMC凋亡,提示对冠状动脉再狭窄有预防作用。
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关键词
人
重组
腺
病毒
介导
肝
细胞
生长因子
基因
血管
内皮
细胞
血管
平滑肌
细胞
细胞
凋亡
缺氧
冠状动脉再狭窄
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职称材料
不同途径导入rAAV-VEGF_(165)基因对大鼠缺血性脑保护的比较研究
被引量：
3
2
作者
饶宜光
褚晓凡
+4 位作者
付学军
郑佩娥
马可夫
黄莲婵
邹良玉
《中国神经精神疾病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第4期213-219,共7页
目的比较不同途径(直接注射、脑脊液及静脉内)导入重组腺相关病毒介导的血管内皮细胞生长因子基因(recombinant adeno-associated virus mediated vascular endothelial growth factor165 gene,rAAV-VEGF165)治疗大鼠局灶性脑缺血的疗效...
目的比较不同途径(直接注射、脑脊液及静脉内)导入重组腺相关病毒介导的血管内皮细胞生长因子基因(recombinant adeno-associated virus mediated vascular endothelial growth factor165 gene,rAAV-VEGF165)治疗大鼠局灶性脑缺血的疗效,寻找出适合临床、安全、有效的基因导入方法。方法用线栓加环扎法建立SD大鼠大脑中动脉持续性闭塞(MCAO)模型。30只雄性SD大鼠随机分为直接注射组、脑脊液导入组、静脉导入组、MCAO组和假手术组,其中治疗组于术后24h内将rAAV-VEGF165基因从大鼠脑缺血边缘区、小脑延髓池或股静脉内注入。术后14d取脑,免疫组织化学染色检测脑缺血边缘区VEGF的表达和微血管的密度、HE染色观察脑组织坏死情况、4%TTC染色检测脑梗死体积。结果与单纯梗死组和假手术组相比较,治疗组脑缺血边缘区VEGF表达水平明显升高、微血管密度显著增高(P<0.01),脑组织坏死情况明显减轻,脑梗死体积明显缩小(P<0.05);其中以前2个指标在直接注射和脑脊液导入组比静脉导入组更为显著(P<0.05)。结论直接注射和脑脊液导入比静脉内导入rAAV-VEGF165基因转染到大鼠缺血脑组织的效果更优,而且通过脑脊液导入可能是较为合适有效的途径。
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关键词
脑缺血
重组腺相关病毒介导血管内皮细胞生长因子基因
血管
生成
基因
治疗
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职称材料
题名
腺病毒载体介导肝细胞生长因子基因对冠状动脉再狭窄的预防作用
1
作者
刘本德
吴红军
曾秋棠
机构
华中科技大学同济医学院附属协和医院急诊科
华中科技大学同济医学院附属协和医院心血管疾病研究所
出处
《华中科技大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第1期75-77,81,共4页
基金
湖北省自然科学基金资助项目(No.2004ABA222)
文摘
目的应用重组腺病毒载体介导的肝细胞生长因子(HGF)基因转染血管内皮细胞(VEC)及血管平滑肌细胞(VSMC),探讨HGF基因对其凋亡的诱导作用。方法以肝细胞中抽提的总RNA为模板,反转录cDNA,采用RT-PCR技术获得HGF基因,并引入酶切位点,转染大肠埃希菌,筛选阳性菌落,经酶切及测序证实后,转染腺病毒,制造病毒包涵体,经3轮扩増,制备高效表达HGF基因腺病毒载体(Ad-HGF)。以此感染VEC及VSMC,设为Ad-HGF组;再以人工合成HGF培养VEC及VSMC为阳性对照组(HGF组);以未感染Ad-HGF的细胞为阴性对照(对照组)。并采用流式细胞仪检测缺氧情况下各组细胞的凋亡率。结果VEC的Ad-HGF、HGF组细胞凋亡率均低于对照组,差异均有极显著性意义(均P<0.01),但VSMC的3组细胞凋亡率差异无显著性意义(P>0.05)。结论腺病毒载体介导HGF基因感染VEC后能在缺氧情况下有效地阻止VEC发生凋亡,但不能有效抑制VSMC凋亡,提示对冠状动脉再狭窄有预防作用。
关键词
人
重组
腺
病毒
介导
肝
细胞
生长因子
基因
血管
内皮
细胞
血管
平滑肌
细胞
细胞
凋亡
缺氧
冠状动脉再狭窄
Keywords
Ad-HGF gene
vascular endothelial cell
vascular smooth muscle cell
apoptosis
anoxia
coronary artery restenosis
分类号
R541 [医药卫生—心血管疾病]
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职称材料
题名
不同途径导入rAAV-VEGF_(165)基因对大鼠缺血性脑保护的比较研究
被引量：
3
2
作者
饶宜光
褚晓凡
付学军
郑佩娥
马可夫
黄莲婵
邹良玉
机构
暨南大学第二临床医学院深圳市人民医院神经内科
暨南大学医学院病理教研室
暨南大学第二临床医学院深圳市人民医院特诊科
出处
《中国神经精神疾病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第4期213-219,共7页
文摘
目的比较不同途径(直接注射、脑脊液及静脉内)导入重组腺相关病毒介导的血管内皮细胞生长因子基因(recombinant adeno-associated virus mediated vascular endothelial growth factor165 gene,rAAV-VEGF165)治疗大鼠局灶性脑缺血的疗效,寻找出适合临床、安全、有效的基因导入方法。方法用线栓加环扎法建立SD大鼠大脑中动脉持续性闭塞(MCAO)模型。30只雄性SD大鼠随机分为直接注射组、脑脊液导入组、静脉导入组、MCAO组和假手术组,其中治疗组于术后24h内将rAAV-VEGF165基因从大鼠脑缺血边缘区、小脑延髓池或股静脉内注入。术后14d取脑,免疫组织化学染色检测脑缺血边缘区VEGF的表达和微血管的密度、HE染色观察脑组织坏死情况、4%TTC染色检测脑梗死体积。结果与单纯梗死组和假手术组相比较,治疗组脑缺血边缘区VEGF表达水平明显升高、微血管密度显著增高(P<0.01),脑组织坏死情况明显减轻,脑梗死体积明显缩小(P<0.05);其中以前2个指标在直接注射和脑脊液导入组比静脉导入组更为显著(P<0.05)。结论直接注射和脑脊液导入比静脉内导入rAAV-VEGF165基因转染到大鼠缺血脑组织的效果更优,而且通过脑脊液导入可能是较为合适有效的途径。
关键词
脑缺血
重组腺相关病毒介导血管内皮细胞生长因子基因
血管
生成
基因
治疗
Keywords
Cerebral ischemia rAAV-VEGF165 gene Angiogenesis Gene therapy
分类号
R743.3 [医药卫生—神经病学与精神病学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
腺病毒载体介导肝细胞生长因子基因对冠状动脉再狭窄的预防作用
刘本德
吴红军
曾秋棠
《华中科技大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2007
0
在线阅读
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职称材料
2
不同途径导入rAAV-VEGF_(165)基因对大鼠缺血性脑保护的比较研究
饶宜光
褚晓凡
付学军
郑佩娥
马可夫
黄莲婵
邹良玉
《中国神经精神疾病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007
3
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