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白蚁纤维素酶结构域重组研究 被引量:2
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作者 刘慧琳 曹以诚 +2 位作者 杨磊 黄昱阳 曾炳佳 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期152-154,共3页
对来源于白蚁Nasutitermes takasagoensis的纤维素酶NtEG和来源于Thermomonospora fusca的耐热性纤维素酶E4进行同源建模和序列比较,利用重组PCR技术将E4的结合域与NtEG的催化域进行结构域重组,形成重组纤维素酶。并将得到的重组体置于... 对来源于白蚁Nasutitermes takasagoensis的纤维素酶NtEG和来源于Thermomonospora fusca的耐热性纤维素酶E4进行同源建模和序列比较,利用重组PCR技术将E4的结合域与NtEG的催化域进行结构域重组,形成重组纤维素酶。并将得到的重组体置于毕氏酵母X33中表达并检测其催化效率。结果表明:重组纤维素酶的相对分子质量约为59 ku;用羧甲基纤维素法、滤纸法、微晶纤维素测得重组纤维素酶的活性分别为17.1、5.4、4.6 U/mL;重组纤维素酶可在毕赤酵母中成功表达。 展开更多
关键词 重组纤维素酶 催化域 结合域 重组PCR
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芽孢杆菌BSC6-1中纤维素酶基因的异源表达及酶学性质 被引量:2
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作者 林蒙蒙 张华青 +3 位作者 黄晓莉 韦鑫斐 杨江华 于岚 《贵州农业科学》 CAS 2015年第7期105-109,共5页
从土壤中筛选获得1株高产纤维素酶的芽孢杆菌BSC6-1,为了进一步研究其纤维素酶的性质,克隆表达来自BSC6-1的新的纤维素酶基因Celbsc6,并通过纯化后用于酶学性质的研究。结果表明:成功在大肠杆菌中异源表达,该基因的表达产物为50kDa的... 从土壤中筛选获得1株高产纤维素酶的芽孢杆菌BSC6-1,为了进一步研究其纤维素酶的性质,克隆表达来自BSC6-1的新的纤维素酶基因Celbsc6,并通过纯化后用于酶学性质的研究。结果表明:成功在大肠杆菌中异源表达,该基因的表达产物为50kDa的蛋白。在70℃条件下酶活力保持80%以上,当pH 7-8时内酶活力保持在94%以上。证明,重组纤维素酶Celbsc6具有良好的热稳定性和pH稳定性。最佳的酶促反应条件为55℃和pH 7.5,镁离子浓度10mmol/L。在该条件下Celbsc6的米氏常数,Km值为7.89×10-3 g/mL,最大反应速率Vmax为0.11μmol/(L·s)。 展开更多
关键词 芽孢杆菌 大肠杆菌 纤维素酶基因 重组纤维素酶 酶学性质
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