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猪附红细胞体ENO基因重组腺病毒穿梭质粒的构建及真核表达 被引量:3
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作者 王淼 倪婷婷 +4 位作者 伍生军 赵云 宋建臣 董亮 薛书江 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第8期2113-2118,共6页
为构建猪附红细胞体ENO基因重组腺病毒穿梭质粒,试验根据GenBank中登录的猪附红细胞体ENO基因序列(登录号:CP002525.1)设计特异性引物,对ENO基因进行PCR扩增,并将纯化后的PCR产物克隆到pMD19-T载体中。用KpnⅠ和XhoⅠ对pMD19T-ENO进行... 为构建猪附红细胞体ENO基因重组腺病毒穿梭质粒,试验根据GenBank中登录的猪附红细胞体ENO基因序列(登录号:CP002525.1)设计特异性引物,对ENO基因进行PCR扩增,并将纯化后的PCR产物克隆到pMD19-T载体中。用KpnⅠ和XhoⅠ对pMD19T-ENO进行双酶切后,将其亚克隆至腺病毒穿梭载体PCR^259中,构建PCR^259-ENO重组质粒,提取重组质粒进行鉴定。应用脂质体介导转染法将鉴定正确的PCR^259-ENO重组穿梭质粒转染293细胞,应用间接免疫荧光法(IFTA)检测ENO基因在293细胞中的表达。结果显示,试验克隆的ENO基因长为1 182bp,编码393个氨基酸,与GenBank中ENO基因序列(登录号:CP002525.1)同源性为99%。构建的重组腺病毒穿梭质粒PCR^259-ENO经PCR和酶切鉴定正确,并且能在293细胞中表达,表明ENO基因成功插入腺病毒穿梭质粒PCR^259中,重组腺病毒穿梭质粒PCR^259-ENO构建成功。 展开更多
关键词 猪附红细胞体 ENO基因 重组腺病毒穿梭质粒 表达
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结核CFP10/ESAT6抗原和人GM-CSF基因重组卡介苗的构建与免疫原性研究 被引量:1
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作者 杨晓玲 邓仪昊 +2 位作者 夏志扬 黄丹丹 鲍朗 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第A10期2030-2030,共1页
关键词 免疫原性研究 CFP10/ESAT6 基因重组 免疫反应 血清特异性 重组穿梭质粒 重组质粒 融合基因 定向克隆 周达
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