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重组白细胞介素13对成纤维细胞增殖的影响
被引量：
1
1
作者
肖莉
李振华
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第6期574-576,F0002,共4页
目的:观察重组白细胞介素13(rIL-13)对NIH3T3细胞增殖作用的影响,探讨肺纤维化的发病机制。方法:NIH3T3细胞分为rIL-13组和不含rIL-13的对照组r,IL-13组加入不同浓度的rIL-13,作用24及48h。透射电镜观察3T3细胞的超微结构,Hoechst试剂...
目的:观察重组白细胞介素13(rIL-13)对NIH3T3细胞增殖作用的影响,探讨肺纤维化的发病机制。方法:NIH3T3细胞分为rIL-13组和不含rIL-13的对照组r,IL-13组加入不同浓度的rIL-13,作用24及48h。透射电镜观察3T3细胞的超微结构,Hoechst试剂盒观察细胞DNA形态变化,噻唑蓝比色试验(MTT法)测定细胞增殖率。结果r:IL-13呈剂量依赖方式刺激3T3细胞细胞生长。经rIL-13 80 ng/ml孵育的细胞DNA合成增加,细胞核增大,细胞质中可见较多核糖体及线粒体。rIL-13组细胞增殖率增加,与对照组比较有显著性差异(P<0.05)。结论r:IL-13可能通过促进成纤维细胞增殖,在肺纤维化的发病机制中发挥重要作用。
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关键词
重组白细胞介素13
NIH
3T3
细胞
细胞
增殖
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职称材料
重组人白细胞介素-13在大肠杆菌中的表达纯化及鉴定
被引量：
1
2
作者
林辉煌
刘春凤
+2 位作者
尹凤红
丁玉梅
陈清西
《厦门大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第6期836-841,共6页
采用大肠杆菌(Escherichia coli)作为宿主,通过300L发酵罐进行中试发酵表达重组人白细胞介素-13(rhIL-13)融合蛋白;经异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导,离心发酵液收集菌体,菌体经溶解、变性、稀释复性及亲和层析捕获,获得融合蛋...
采用大肠杆菌(Escherichia coli)作为宿主,通过300L发酵罐进行中试发酵表达重组人白细胞介素-13(rhIL-13)融合蛋白;经异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导,离心发酵液收集菌体,菌体经溶解、变性、稀释复性及亲和层析捕获,获得融合蛋白;融合蛋白经肠激酶酶切后,再经亲和层析分离和分子筛精细纯化等步骤,获得高纯度rhIL-13原液.每升发酵液可获得高纯度的rhIL-13原液约30mg.通过本纯化工艺获得的rhIL-13原液经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)法检测,纯度大于98.75%;经高效液相色谱分子排阻(HPLC-SEC)法检测,纯度为100%;质谱(MS)法测定rhIL-13分子质量为12 348u,与理论值基本一致;采用噻唑蓝(MTT)法进行比活性检测,比活大于8.0×106 IU/mg;采用HPLC-SEC法和MS法对rhIL-13二硫键数目和位置进行分析,结果显示二硫键数目和位置与理论一致.此操作方法可获得高纯度、高活性的rhIL-13原液,并且操作简单,易于放大,可实现工业化规模生产.
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关键词
重组
人
白细胞
介素
-
13
(rhIL-
13
)
表达
纯化
鉴定
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职称材料
人重组白细胞介素-13在毕氏酵母中的表达及其体外诱导DC分化作用的研究
3
作者
江阳
时宏珍
+3 位作者
黄伟达
谢炜
赵文宝
张学光
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第2期82-87,共6页
目的:在毕氏酵母中表达重组人IL-13并探讨其对DC的诱导作用。方法:用基因工程的方法人工合成IL-13的全长片段,并转化至毕氏酵母菌株GS115中,筛选后获得表达量相对较高且分泌稳定的rhIL-13基因工程菌株,用rhIL-13来替代IL-4体外诱导DC。...
目的:在毕氏酵母中表达重组人IL-13并探讨其对DC的诱导作用。方法:用基因工程的方法人工合成IL-13的全长片段,并转化至毕氏酵母菌株GS115中,筛选后获得表达量相对较高且分泌稳定的rhIL-13基因工程菌株,用rhIL-13来替代IL-4体外诱导DC。结果:得到表达量达25 mg/L且分泌稳定的rhIL-13基因工程菌株;rhIL-13具有rhIL-4同样的体外诱导外周血单核细胞向DC增殖分化的作用,MHCII、CD1α、CD80、CD83、CD86等DC表型分析和混合淋巴细胞反应刺激T细胞增殖的作用与IL-4诱导得到的成熟DC并无显著差别,其所诱导的未成熟DC具有很强的摄取抗原能力。结论:获得表达量相对较高且分泌稳定的rhIL-13基因工程菌株,rhIL-13在体外可有效地诱导外周血单核细胞向DC分化。
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关键词
人
重组
白细胞
介素
-
13
毕氏酵母
外周血单核
细胞
DC分化
基因表达
基因工程
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职称材料
题名
重组白细胞介素13对成纤维细胞增殖的影响
被引量：
1
1
作者
肖莉
李振华
机构
中国医科大学附属第二医院急诊科
中国医科大学附属第一医院呼吸疾病研究所
出处
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第6期574-576,F0002,共4页
基金
辽宁省博士启动基金资助项目(20061036)
文摘
目的:观察重组白细胞介素13(rIL-13)对NIH3T3细胞增殖作用的影响,探讨肺纤维化的发病机制。方法:NIH3T3细胞分为rIL-13组和不含rIL-13的对照组r,IL-13组加入不同浓度的rIL-13,作用24及48h。透射电镜观察3T3细胞的超微结构,Hoechst试剂盒观察细胞DNA形态变化,噻唑蓝比色试验(MTT法)测定细胞增殖率。结果r:IL-13呈剂量依赖方式刺激3T3细胞细胞生长。经rIL-13 80 ng/ml孵育的细胞DNA合成增加,细胞核增大,细胞质中可见较多核糖体及线粒体。rIL-13组细胞增殖率增加,与对照组比较有显著性差异(P<0.05)。结论r:IL-13可能通过促进成纤维细胞增殖,在肺纤维化的发病机制中发挥重要作用。
关键词
重组白细胞介素13
NIH
3T3
细胞
细胞
增殖
Keywords
recombinant interleukin
13
NIH 3T3 fibroblasts
cell proliferation
分类号
R563.9 [医药卫生—呼吸系统]
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职称材料
题名
重组人白细胞介素-13在大肠杆菌中的表达纯化及鉴定
被引量：
1
2
作者
林辉煌
刘春凤
尹凤红
丁玉梅
陈清西
机构
厦门大学生命科学学院
厦门特宝生物工程股份有限公司
出处
《厦门大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第6期836-841,共6页
基金
国家高技术研究发展计划(863)项目(2007AA021604)
文摘
采用大肠杆菌(Escherichia coli)作为宿主,通过300L发酵罐进行中试发酵表达重组人白细胞介素-13(rhIL-13)融合蛋白;经异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导,离心发酵液收集菌体,菌体经溶解、变性、稀释复性及亲和层析捕获,获得融合蛋白;融合蛋白经肠激酶酶切后,再经亲和层析分离和分子筛精细纯化等步骤,获得高纯度rhIL-13原液.每升发酵液可获得高纯度的rhIL-13原液约30mg.通过本纯化工艺获得的rhIL-13原液经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)法检测,纯度大于98.75%;经高效液相色谱分子排阻(HPLC-SEC)法检测,纯度为100%;质谱(MS)法测定rhIL-13分子质量为12 348u,与理论值基本一致;采用噻唑蓝(MTT)法进行比活性检测,比活大于8.0×106 IU/mg;采用HPLC-SEC法和MS法对rhIL-13二硫键数目和位置进行分析,结果显示二硫键数目和位置与理论一致.此操作方法可获得高纯度、高活性的rhIL-13原液,并且操作简单,易于放大,可实现工业化规模生产.
关键词
重组
人
白细胞
介素
-
13
(rhIL-
13
)
表达
纯化
鉴定
Keywords
recombinant human interleukin-
13
（rhIL-
13
）
expressions purifications identification
分类号
Q356.1 [生物学—遗传学]
在线阅读
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职称材料
题名
人重组白细胞介素-13在毕氏酵母中的表达及其体外诱导DC分化作用的研究
3
作者
江阳
时宏珍
黄伟达
谢炜
赵文宝
张学光
机构
苏州大学生物技术研究所
复旦大学生物化学系
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第2期82-87,共6页
基金
江苏省自然科学重点项目资助(批准号 BI98100)
文摘
目的:在毕氏酵母中表达重组人IL-13并探讨其对DC的诱导作用。方法:用基因工程的方法人工合成IL-13的全长片段,并转化至毕氏酵母菌株GS115中,筛选后获得表达量相对较高且分泌稳定的rhIL-13基因工程菌株,用rhIL-13来替代IL-4体外诱导DC。结果:得到表达量达25 mg/L且分泌稳定的rhIL-13基因工程菌株;rhIL-13具有rhIL-4同样的体外诱导外周血单核细胞向DC增殖分化的作用,MHCII、CD1α、CD80、CD83、CD86等DC表型分析和混合淋巴细胞反应刺激T细胞增殖的作用与IL-4诱导得到的成熟DC并无显著差别,其所诱导的未成熟DC具有很强的摄取抗原能力。结论:获得表达量相对较高且分泌稳定的rhIL-13基因工程菌株,rhIL-13在体外可有效地诱导外周血单核细胞向DC分化。
关键词
人
重组
白细胞
介素
-
13
毕氏酵母
外周血单核
细胞
DC分化
基因表达
基因工程
Keywords
Recombinant human interleukin-
13
(ihIL-
13
)
Pichia Pastoris
Expression
Induction
DC
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
在线阅读
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
重组白细胞介素13对成纤维细胞增殖的影响
肖莉
李振华
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
重组人白细胞介素-13在大肠杆菌中的表达纯化及鉴定
林辉煌
刘春凤
尹凤红
丁玉梅
陈清西
《厦门大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2016
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
人重组白细胞介素-13在毕氏酵母中的表达及其体外诱导DC分化作用的研究
江阳
时宏珍
黄伟达
谢炜
赵文宝
张学光
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2003
0
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职称材料
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