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重组白细胞介素10-pEGFP-N2质粒构建及表达 被引量:1
1
作者 程远雄 钟南山 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期241-243,共3页
目的 将IL 10基因定向克隆入pEGFP N2质粒 ,探讨采用构建的质粒转染支气管上皮细胞H2 92株 ,稳定表达IL 10和荧光蛋白可行性。方法 采用定向克隆技术 ,将IL 10基因克隆入pEGFP N2质粒 ,用构建成功的IL 10 pEGFP N2质粒在Fuge 6介导... 目的 将IL 10基因定向克隆入pEGFP N2质粒 ,探讨采用构建的质粒转染支气管上皮细胞H2 92株 ,稳定表达IL 10和荧光蛋白可行性。方法 采用定向克隆技术 ,将IL 10基因克隆入pEGFP N2质粒 ,用构建成功的IL 10 pEGFP N2质粒在Fuge 6介导下转染培养的支气管上皮细胞株 (H2 92 ) ,利用免疫组化、RT PCR检测细胞中IL 10蛋白和mRNA的表达 ,并在荧光显微镜下观察荧光蛋白表达。结果 ①重组后的pEGFP N2质粒已成功载入IL 10基因。②IL 10 pEGFP N2质粒转染支气管上皮细胞H2 92株后 ,可在H2 92株内表达IL 10mRNA、IL 10蛋白和荧光蛋白。结论 重组的IL 10 pEGFP N2质粒可在上皮细胞内表达IL 10和荧光蛋白。由于两者共用一个启动子 ,荧光蛋白表达可报告IL 10表达 ,适用于动物实验气道内的IL 10转基因研究。 展开更多
关键词 重组白细胞介素10-pegfp-n2 质粒 克隆 IL-10转基因
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M2型巨噬细胞通过分泌白细胞介素-10调控胆囊癌细胞增殖、迁移和侵袭的研究
2
作者 赵向阳 江博文 +1 位作者 陶滔 谈燚 《海南医学院学报》 CAS 北大核心 2024年第8期561-567,共7页
目的:探讨M2型巨噬细胞通过调控白细胞介素-10(IL-10)表达影响胆囊癌(gallbladder cancer,GBC)细胞增殖、迁移、侵袭的研究。方法:将人单核细胞株THP-1在体外诱导成M2型巨噬细胞,利用RTqPCR检测相应标记物和IL-10的表达情况;利用ELISA... 目的:探讨M2型巨噬细胞通过调控白细胞介素-10(IL-10)表达影响胆囊癌(gallbladder cancer,GBC)细胞增殖、迁移、侵袭的研究。方法:将人单核细胞株THP-1在体外诱导成M2型巨噬细胞,利用RTqPCR检测相应标记物和IL-10的表达情况;利用ELISA检测细胞上清液中IL-10的表达情况。将GBC细胞株NOZ和GBC-SD分组为Control组(无血清培养基)、M2-CM组(M2型巨噬细胞条件培养基)、M2-CM+anti-IL-10组(含IL-10中和抗体的M2-CM)和M2-CM+IgG组(含IL-10同型对照抗体的M2-CM)。采用CCK-8实验、细胞划痕实验和Transwell实验检测各组细胞的增殖、迁移和侵袭变化状况,再用Western blot实验检测各组细胞的上皮间质转化标志物(E-cadherin和Vimentin)的表达量。结果:M2型巨噬细胞在体外诱导成功;与诱导前的THP-1相比,IL-10在M2型巨噬细胞内和上清液中表达明显升高(P<0.05);M2型巨噬细胞可促进GBC细胞增殖、迁移和侵袭,以及能抑制E-cadherin表达和促进Vimentin表达,阻断IL-10可抑制M2型巨噬细胞的这一影响(P<0.05)。结论:M2型巨噬细胞可通过分泌IL-10促进GBC细胞增殖、迁移、侵袭及上皮间质转化。 展开更多
关键词 胆囊癌 M2型巨噬细胞 白细胞介素-10 增殖 迁移 侵袭
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重组鸡干扰素/白细胞介素-2融合蛋白体内抗传染性法氏囊病病毒作用研究 被引量:8
3
作者 程俊贞 闫若潜 +9 位作者 吴志明 赵明军 闫志玲 刘梅芬 赵雪丽 孔刚锐 陈慧娟 杨晓璐 张书阳 刘毅 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期140-145,共6页
为研究原核表达的鸡干扰素/白细胞介素-2融合蛋白(rChIFN--Linker-ChIL-2)在SPF鸡体内的抗病毒作用,本研究将传染性法氏囊病病毒(IBDV)强毒株与rChIFN--Linker-ChIL-2同时接种21日龄SPF鸡,并分别通过临床观察和攻毒后(dpc)不同时间IBDV... 为研究原核表达的鸡干扰素/白细胞介素-2融合蛋白(rChIFN--Linker-ChIL-2)在SPF鸡体内的抗病毒作用,本研究将传染性法氏囊病病毒(IBDV)强毒株与rChIFN--Linker-ChIL-2同时接种21日龄SPF鸡,并分别通过临床观察和攻毒后(dpc)不同时间IBDV排毒率、带毒时间、在不同组织器官的动态分布及其体液和细胞免疫指标的检测以评价该重组融合蛋白抗IBDV的效果。结果显示:与IBDV攻毒对照组相比,融合蛋白与IBDV同时接种组鸡的发病率、死亡率和典型症状维持时间及排毒率、外周血持续带毒时间和不同组织器官带毒时间均显著低于对照组。但试验组鸡的IBDV抗体水平于7 dpc^42 dpc则极显著低于对照组(p<0.01)。然而,其血清中ChIFN-α、ChIFN-γ、ChIL-2、ChIL-6和ChIL-4表达水平(3 dpc^21 dpc)以及外周血T淋巴细胞(PBLC)增殖活性(7 dpc^21 dpc)、脾淋巴细胞增殖活性(7 dpc^14 dpc)均显著高于对照组(p<0.01)。结果表明:融合蛋白可以通过上调机体细胞因子的表达水平、增强鸡体PBLC和脾淋巴细胞增殖活性等方式增强机体的细胞免疫能力,从而发挥抗病毒作用和免疫增强作用。 展开更多
关键词 重组鸡干扰素 白细胞介素 2融合蛋白 传染性法氏囊病病毒 抗病毒 免疫增强 作用
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重组白细胞介素-2对固始鸡免疫机能的影响 被引量:7
4
作者 张怀 高春生 +2 位作者 蒋媛媛 赵峰 肖传斌 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2009年第7期48-51,共4页
本试验旨在探讨重组白细胞介素-2(IL-2)对固始鸡免疫机能的影响。应用大体解剖技术和免疫技术,对重组IL-2对固始鸡免疫机能的影响进行了研究。注射固始鸡IL-2的各免疫组的抗体水平均高于鸡志贺氏菌苗组,明显高于空白对照组;各免疫组抗... 本试验旨在探讨重组白细胞介素-2(IL-2)对固始鸡免疫机能的影响。应用大体解剖技术和免疫技术,对重组IL-2对固始鸡免疫机能的影响进行了研究。注射固始鸡IL-2的各免疫组的抗体水平均高于鸡志贺氏菌苗组,明显高于空白对照组;各免疫组抗体水平在第2~3周达到最高水平,以后在4~7周内基本保持恒定水平;注射IL-2的各免疫组的脾脏指数、胸腺指数、法氏囊指数基本上均高于空白对照组和鸡志贺氏菌苗组。重组IL-2可促进固始鸡免疫器官的生长发育和成熟,增强鸡的免疫机能,可抵抗各种病原微生物的感染。 展开更多
关键词 重组白细胞介素-2 固始鸡 免疫机能 抗体
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生理状态下外周血白细胞干扰素、白细胞介素2、白细胞介素4和白细胞介素10基因表达的荧光定量PCR检测 被引量:6
5
作者 陈佩杰 王茹 董强刚 《体育科学》 CSSCI 北大核心 2006年第1期74-76,共3页
目的:建立干扰素-γ(IFN-γ),白细胞介素-2(IL-2),白细胞介素-4(IL-4),白细胞介素-10(IL-10)基因表达的绝对定量实时PCR检测技术。方法:应用实时定量PCR方法检测25名健康运动员生理状态下外周血白细胞IFNγ-、IL-2、IL-4和IL-10 mRNA的... 目的:建立干扰素-γ(IFN-γ),白细胞介素-2(IL-2),白细胞介素-4(IL-4),白细胞介素-10(IL-10)基因表达的绝对定量实时PCR检测技术。方法:应用实时定量PCR方法检测25名健康运动员生理状态下外周血白细胞IFNγ-、IL-2、IL-4和IL-10 mRNA的表达。结果:应用实时定量PCR方法能够对健康受试者外周血白细胞IFNγ-、IL-2、IL-4和IL-10的mRNA表达进行定量分析,相关系数r>0.99。结论:从分子水平为检测运动过程中细胞因子的改变、评估运动员免疫机能状态提供了简易和准确的检测手段。 展开更多
关键词 干扰素-y(IFN-y) 白细胞介素2(IL-2) 白细胞介素4(IL-4) 白细胞介素10(IL-10) 信使核糖核酸 实时定量PCR
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重组白细胞介素2促进小鼠胸腺细胞发育及辐射损伤小鼠免疫功能的恢复 被引量:4
6
作者 高汉林 谢蜀生 +3 位作者 郝洁 杨四旬 马大龙 龙振洲 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1993年第3期136-139,共4页
经亚致死量照射的BALB/c小鼠胸腺内残留的胸腺干细胞经历与胚胎胸腺发育十分相似的过程,体内给予IL-2(6×10~5u/kg)可明显促进胸腺细胞由CD4^-CD8^-向CD4^+CD8^+再向CD4^+CD8^-/CD4^-CD8^-分化并明显促进胸腺细胞增殖和亚致死量照... 经亚致死量照射的BALB/c小鼠胸腺内残留的胸腺干细胞经历与胚胎胸腺发育十分相似的过程,体内给予IL-2(6×10~5u/kg)可明显促进胸腺细胞由CD4^-CD8^-向CD4^+CD8^+再向CD4^+CD8^-/CD4^-CD8^-分化并明显促进胸腺细胞增殖和亚致死量照射小鼠脾细胞对ConA、LPS 的增殖能力,促进同种异型细胞的混合淋巴细胞反应(MLR)和绵羊红细胞(SRBC)的抗体形成细胞数(PFC)等多项免疫功能的恢复。 展开更多
关键词 重组 白细胞介素2 胸腺细胞
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重组人白细胞介素2-绿脓杆菌外毒素融合蛋白的纯化及复性 被引量:6
7
作者 胡志明 林来兴妹 +2 位作者 周明乾 陈泽洪 王小宁 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第3期206-207,214,共3页
目的探讨该所发明的新方法对重组人白细胞介素2-绿脓杆菌外毒素(IL2-PE664Glu)融合蛋白进行纯化与复性的效果。方法采用该所发明的新方法提纯包涵体,包涵体复性后,样品经DEAE-SepharoseFF离子交换层析,获得融合蛋白纯品。结果获得的具... 目的探讨该所发明的新方法对重组人白细胞介素2-绿脓杆菌外毒素(IL2-PE664Glu)融合蛋白进行纯化与复性的效果。方法采用该所发明的新方法提纯包涵体,包涵体复性后,样品经DEAE-SepharoseFF离子交换层析,获得融合蛋白纯品。结果获得的具有生物学活性的融合蛋白纯度达到95%,复性回收率为80%。结论此包涵体分离纯化技术简便、实用,可为中试研究和规模化生产提供基础。 展开更多
关键词 重组白细胞介素-2 绿脓杆菌外毒素 融合蛋白 纯化 复性
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人白细胞介素2重组逆转录病毒载体的构建与表达 被引量:3
8
作者 章卫平 曹雪涛 +3 位作者 王建莉 马施华 黄欣 于益芝 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1996年第3期186-190,共5页
通过RT-PCR克隆到含有全部编码序列的人IL-2 cDNA.并经核苷酸测序加以证实,将其克隆至逆转录病毒载体pLXSN,构建成人IL-2的重组逆转录病毒表达载体pLXSN-hIL2.体外经CRIP细胞包装后病毒滴度达7.6×10^4CFU/ml,NIH 3T3小鼠成纤... 通过RT-PCR克隆到含有全部编码序列的人IL-2 cDNA.并经核苷酸测序加以证实,将其克隆至逆转录病毒载体pLXSN,构建成人IL-2的重组逆转录病毒表达载体pLXSN-hIL2.体外经CRIP细胞包装后病毒滴度达7.6×10^4CFU/ml,NIH 3T3小鼠成纤维细胞感染hIL-2重组逆转录病毒后.分泌IL-2水平达118.2U/ml;PCR从其基因组DNA中扩增到NeoR基因片段.提示重组逆转录病毒载体已整合至宿主细胞的基因组DNA中。本研究为开展人IL-2基因治疗奠定了基础. 展开更多
关键词 白细胞介素2 重组逆转录病毒载体 构建 表达 基因治疗 肿瘤瘤苗
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重组白细胞介素-2对猪瘟疫苗免疫效果的影响 被引量:12
9
作者 张光勤 李旺 +1 位作者 赵星灿 李治力 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 2003年第2期174-176,共3页
观察了重组IL 2对经产母猪和育成母猪猪瘟疫苗免疫效果的影响.结果表明,进行猪瘟免疫时应用重组IL 2,可以显著提高经产母猪和育成母猪猪瘟疫苗的抗体滴度水平及整齐度.
关键词 重组白细胞介素-2 猪瘟 疫苗 免疫效果 抗体滴度
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重组鸡α干扰素/白细胞介素-2融合蛋白体外活性评价方法研究 被引量:4
10
作者 杨晓璐 闫若潜 +4 位作者 李勤楠 赵雪丽 谢彩华 刘梅芬 张书阳 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第12期3153-3159,共7页
为建立稳定、便捷的重组鸡α干扰素/白细胞介素-2融合蛋白(rChIFN-α-Linker-ChIL-2蛋白,重组融合蛋白)体外活性评价方法,本研究分别采用ChIFN-α和ChIL-2ELISA方法检测重组融合蛋白与抗ChIFN-α单抗和抗ChIL-2单抗发生特异性免疫反应... 为建立稳定、便捷的重组鸡α干扰素/白细胞介素-2融合蛋白(rChIFN-α-Linker-ChIL-2蛋白,重组融合蛋白)体外活性评价方法,本研究分别采用ChIFN-α和ChIL-2ELISA方法检测重组融合蛋白与抗ChIFN-α单抗和抗ChIL-2单抗发生特异性免疫反应的活性;采用细胞病变抑制法检测重组融合蛋白在DF1细胞上抑制水疱性口炎病毒(VSV)和传染性法氏囊病病毒(IBDV)增殖活性;采用MTS法分别测定重组融合蛋白促鸡外周血T淋巴细胞(PBLC)和脾淋巴细胞增殖活性。结果表明,重组融合蛋白可以与抗ChIFN-α单抗和抗ChIL-2单抗发生特异性免疫反应;重组融合蛋白在DF1细胞上具有明显抗病毒活性,其抗VSV活性高于抗IBDV活性,且均明显高于rChIFN-α蛋白对照;不同浓度的重组融合蛋白均具有明显的促鸡PBLC和脾淋巴细胞增殖活性,且其促增殖活性明显高于rChIFN-α蛋白对照。本研究成功建立了重组融合蛋白体外活性检测评价方法,为进一步探究重组融合蛋白在鸡体内协同作用奠定基础。 展开更多
关键词 鸡α干扰素 白细胞介素-2 重组融合蛋白 体外活性
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重组白细胞介素2对固始鸡空肠黏膜免疫增强作用的研究 被引量:3
11
作者 赵珊珊 张怀 +2 位作者 徐亚平 李超 肖传斌 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第3期60-64,共5页
本试验旨在研究重组白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)对固始鸡空肠黏膜免疫的作用。以父母代固始鸡为试验动物,用添加不同剂量的重组IL-2佐剂的鸡新城疫疫苗对试验鸡进行分组免疫,应用免疫组织化学技术,通过Qwin图像处理系统对鸡空肠... 本试验旨在研究重组白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)对固始鸡空肠黏膜免疫的作用。以父母代固始鸡为试验动物,用添加不同剂量的重组IL-2佐剂的鸡新城疫疫苗对试验鸡进行分组免疫,应用免疫组织化学技术,通过Qwin图像处理系统对鸡空肠内分泌型免疫球蛋白A(sIgA)阳性细胞及其分泌物分布和阳性面积量进行系统分析。结果表明,sIgA阳性细胞及其分泌物主要分布于肠绒毛的固有层和肠腺腔中。在新城疫疫苗组中添加重组IL-2能够提高sIgA细胞的分泌,从而提高动物体的免疫能力。重组IL-2对增强免疫性有一定的作用,且IL-2的添加剂量在50μg时对增加新城疫疫苗的免疫性效果最佳。 展开更多
关键词 重组白细胞介素-2 空肠 分泌型免疫球蛋白 固始鸡
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重组鸡白细胞介素-2对球虫感染雏鸡细胞免疫的影响 被引量:3
12
作者 李宏梅 李祥瑞 汪志楷 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 2000年第S1期229-,共1页
本实验旨在研究重组鸡白细胞介素-2对球虫感染雏鸡细胞免疫的影响。实验采用14日龄伊莎蛋鸡210只,分为7组,其中一组为不感染对照组,三组为柔嫩艾美耳球虫感染组,卵囊感染剂量分别为1万/只、2万/只、5万/只,另外三组... 本实验旨在研究重组鸡白细胞介素-2对球虫感染雏鸡细胞免疫的影响。实验采用14日龄伊莎蛋鸡210只,分为7组,其中一组为不感染对照组,三组为柔嫩艾美耳球虫感染组,卵囊感染剂量分别为1万/只、2万/只、5万/只,另外三组在感染卵囊1万/只、2万/只、5万/只的同时,肌注真核细胞表达的重组鸡白细胞介素-2 0.4ml/只。感染后第0、4、6、9、14、18、23、28天剖杀取牌和盲肠扁桃体,分离淋巴细胞,分别用ConA和PHA刺激,采用NIT比色法进行淋巴细胞转化试验,结果表明:在球虫感染后第4天(裂殖生殖阶段)和第6天(卵囊形成阶段),感染组脾和盲肠扁桃体淋巴细胞转化率均低于对照组,加重组鸡白细胞介素-2组脾和盲肠扁桃体淋巴细胞转化率高于感染组,相当或高于对照组水平。在感染后第9天和第14天(恢复期)加重组鸡白细胞介素-2组脾淋巴细胞转化率高于对照组,加重组鸡白细胞介素-2组盲肠扁桃体淋巴细胞转化率相当于对照组。本实验结果说明:1.球虫感染可以抑制细胞免疫;2.加重组鸡白细胞介素-2可以克服球虫感染引起的免疫抑制。 展开更多
关键词 重组白细胞介素-2 柔嫩艾美耳球虫 淋巴细胞转化 细胞免疫
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白细胞介素2、10和转化生长因子β_1在大鼠心脏移植急性排斥反应中的表达 被引量:1
13
作者 蒋雄刚 张向辉 +2 位作者 徐鹏 夏家红 张凯伦 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期584-587,共4页
目的研究白细胞介素2、10(IL-2、IL-10)与转化生长因子β1(TGF-β1)在大鼠心脏移植急性排斥反应中的表达.方法分两组建立同种大鼠颈部心脏移植模型:对照组(n=25)和新赛斯平组(CsA组,n=25),各5例观察移植心脏存活时间,于移植术后第1、5、... 目的研究白细胞介素2、10(IL-2、IL-10)与转化生长因子β1(TGF-β1)在大鼠心脏移植急性排斥反应中的表达.方法分两组建立同种大鼠颈部心脏移植模型:对照组(n=25)和新赛斯平组(CsA组,n=25),各5例观察移植心脏存活时间,于移植术后第1、5、7、14天分别取移植心组织各5例,半定量RT-PCR的方法动态检测移植心脏中IL-2、IL-10及TGF-β1的表达情况.结果对照组移植心存活时间为(8.6±1.5)d,CsA组移植心存活时间为(20.4±5.1)d,两组间移植心存活时间差异有显著性意义(P<0.01).两组中TGF-β1表达强度不同,对照组中表达较CsA组中弱,二者间差异有显著性意义(P<0.01).IL-2在对照组中先增高,于术后第5~7天达高峰,之后逐渐降至术后第14天的较低水平,而CsA组中IL-2则维持在较低水平.IL-10在对照组中表达维持于较低水平,CsA组中IL-10表达增高,于第7天达峰值,并维持高水平;两组间IL-10的表达差异有显著性意义(P<0.01).结论 IL-10和TGF-β1的产生和表达因CsA的干预而增加,IL-2的表达则受到抑制,CsA的干预明显延长了移植心脏的存活时间. 展开更多
关键词 白细胞介素2 白细胞介素10 转化生长因子β1 心脏移植
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重组牛白细胞介素-2生物活性单位的测定及其理化性质的分析 被引量:6
14
作者 金红 李祥瑞 于康震 《中国畜禽传染病》 CSCD 1998年第2期79-82,共4页
本研究对大肠杆菌表达的重组牛白细胞介素-2的生物活性单位进行了测定。以已标定的人白细胞介素-2为标准品,MTT比色法测出重组牛白细胞介素-2的生物活性单位约为4×106u/L菌液。同时,以SDS-PAGE法测出表... 本研究对大肠杆菌表达的重组牛白细胞介素-2的生物活性单位进行了测定。以已标定的人白细胞介素-2为标准品,MTT比色法测出重组牛白细胞介素-2的生物活性单位约为4×106u/L菌液。同时,以SDS-PAGE法测出表达的重组牛白细胞介素-2分子量约为15.5KD。理化性质分析结果表明,重组牛白细胞介素-2生物活性酸碱适应范围约为2~10;对胰蛋白酶和木瓜蛋白酶的作用敏感,而对核酸酶的作用则不敏感;重组牛白细胞介素-2对温度变化敏感,表现为不耐高温。 展开更多
关键词 重组 白细胞介素-2 生物活性 理化性质
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重组鸡α干扰素/白细胞介素-2融合蛋白对鸡外周血T淋巴细胞亚群的影响研究 被引量:4
15
作者 杨晓璐 闫若潜 +6 位作者 吴志明 刘梅芬 张代宝 张书阳 王淑娟 赵雪丽 刘毅 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第11期175-178,共4页
为了研究重组鸡α干扰素/白细胞介素-2融合蛋白(rChIFN-α-Linker-ChIL-2,重组融合蛋白)对SPF鸡外周血T淋巴细胞亚群含量影响,本研究采用流式细胞术对重组融合蛋白(第2组)和rChIFN-α蛋白(第3组)注射14日龄SPF鸡后不同时间对各试... 为了研究重组鸡α干扰素/白细胞介素-2融合蛋白(rChIFN-α-Linker-ChIL-2,重组融合蛋白)对SPF鸡外周血T淋巴细胞亚群含量影响,本研究采用流式细胞术对重组融合蛋白(第2组)和rChIFN-α蛋白(第3组)注射14日龄SPF鸡后不同时间对各试验组鸡外周血T淋巴细胞(PBLC)中CD3^+CD4^+、CD3^+CD8^+百分含量以及CD4^+/CD8^+比值进行检测。结果表明,与对照组相比,重组融合蛋白和rChIFN-α蛋白在鸡体内接种后3~14d均可明显提高鸡外周血T淋巴细胞中CD3^+CD4^+细胞百分含量,降低CD3^+CD8^+细胞的百分含量,提高CD4^+/CD8^+比值;接种后3~7d期间,第2组鸡的CD3^+CD4^+、CD3^+CD8^+细胞含量及CD4^+/CD8^+比值与PBS对照组(第1组)相比差异均极显著(P〈0.01),第3组与第1组相比差异均显著(P〈0.05)。以上结果表明,重组融合蛋白和rChIFN-α蛋白接种鸡体后均可显著影响鸡PBLC中淋巴细胞亚群百分含量,提高CD4^+/CD8^+比值,增强机体的细胞免疫功能;重组融合蛋白对鸡淋巴细胞亚群百分含量、CD4^+/CD8^+比值影响程度和细胞免疫功能的增强作用优于rChIFN-α蛋白;重组融合蛋白在体内发挥了鸡α干扰素和白细胞介素-2对细胞免疫功能的协同增强作用。 展开更多
关键词 重组鸡α干扰素/白细胞介素-2融合蛋白 重组鸡α干扰素蛋白 T淋巴细胞亚群 CD4^+/CD8^+比值 免疫功能
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重组人白细胞介素10对角朊细胞增殖及产生细胞因子的影响 被引量:1
16
作者 陈飞虎 陈敏珠 +2 位作者 李俊 汪光宝 智强 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2004年第12期1377-1380,共4页
目的 :研究重组人白细胞介素 10 (rhIL 10 )对无血清培养的角朊细胞增殖和产生细胞因子的影响 ,探讨其治疗银屑病的作用机制。方法 :用四甲基偶氮唑蓝比色法 (MTT)测定其对细胞增殖的影响 ;小鼠胸腺细胞增殖法检测白细胞介素 1(IL 1) ;E... 目的 :研究重组人白细胞介素 10 (rhIL 10 )对无血清培养的角朊细胞增殖和产生细胞因子的影响 ,探讨其治疗银屑病的作用机制。方法 :用四甲基偶氮唑蓝比色法 (MTT)测定其对细胞增殖的影响 ;小鼠胸腺细胞增殖法检测白细胞介素 1(IL 1) ;ELISA法检测白细胞介素 6 (IL 6 )、白细胞介素 8(IL 8)。结果 :重组人白细胞介素 10抑制角朊细胞增殖与IL 1、IL 6及IL 8的分泌 ,并呈剂量依赖关系。结论 :重组人白细胞介素 10抑制角朊细胞与细胞因子分泌 ,可能是治疗银屑病的作用机理之一。 展开更多
关键词 重组白细胞介素10 角朊细胞 细胞因子 银屑病
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纯化基因重组白细胞介素-2的初步研究 被引量:1
17
作者 阎颖 郝茜 +4 位作者 范国梁 赵秋雯 刘迎五 王建林 万冬林 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期325-327,共3页
采用羟基磷灰石 (HAP)作为填料 ,以pH 6 8的磷酸盐缓冲液为流动相 ,用制备型高效液相色谱来分离提纯基因重组白细胞介素 2 (IL 2 ) ,通过SDS 聚丙烯酰胺凝胶 (SDS PAGE)电泳测定IL 2的纯度 ,测定其活性为1× 1 0 6 U/mg。该法对IL ... 采用羟基磷灰石 (HAP)作为填料 ,以pH 6 8的磷酸盐缓冲液为流动相 ,用制备型高效液相色谱来分离提纯基因重组白细胞介素 2 (IL 2 ) ,通过SDS 聚丙烯酰胺凝胶 (SDS PAGE)电泳测定IL 2的纯度 ,测定其活性为1× 1 0 6 U/mg。该法对IL 2的纯化、含量测定及活性测定等效果良好。 展开更多
关键词 基因重组白细胞介素-2 分离提纯 HAP HPLC
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重组白细胞介素2体外折叠的实验研究 被引量:3
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作者 徐明波 孟文华 马贤凯 《生物化学杂志》 CSCD 1994年第3期376-381,共6页
包涵体中的重组蛋白抽提后可以在变性状态下纯化,而纯化后的体外折叠(即复性)是基因工程下游处埋中的重要环节。荧光光谱研究表明,IL-2分子折叠过程中荧光强度逐渐减小,最大发射峰由316nm红移到348nm。以Trp残基... 包涵体中的重组蛋白抽提后可以在变性状态下纯化,而纯化后的体外折叠(即复性)是基因工程下游处埋中的重要环节。荧光光谱研究表明,IL-2分子折叠过程中荧光强度逐渐减小,最大发射峰由316nm红移到348nm。以Trp残基的暴露程度反映分子的折叠状态。GM-CSF在折叠过程中的荧光强度有类似变化;凝胶排阻HPLC可以检测折叠过程中的聚合体;而反相HPLC可以将IL-2分成三个相互独立的异构体色谱峰。据此可以计算出IL-2分子的正确折叠率。常用的稀释复性方法,随着IL-2浓度的增高,它的正确折叠率逐渐降低,蛋白浓度的对数与正确折叠率之间大致呈线性关系。当IL-2浓度为1mg/mL时,其正确折叠率仅为30%,而采取较低的蛋白浓度进行复性会因大量的样品体积导致后期纯化的困难。 展开更多
关键词 重组 蛋白 折叠 白细胞介素2
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重组人白细胞介素10单克隆抗体的制备 被引量:2
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作者 陈飞虎 盛晓蓉 +2 位作者 吴亦伦 陈敏珠 智强 《安徽医科大学学报》 CAS 2000年第2期104-106,共3页
目的 制备重组人白细胞介素 10 (rhIL 10 )单克隆抗体。方法 应用鼠 鼠杂交瘤技术建立分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞系 ,ELISA检测杂交瘤细胞培养上清、腹水效价 ,双向免疫扩散试验进行亚类鉴定 ,Giemsa染色镜下计数杂交瘤染色体数目... 目的 制备重组人白细胞介素 10 (rhIL 10 )单克隆抗体。方法 应用鼠 鼠杂交瘤技术建立分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞系 ,ELISA检测杂交瘤细胞培养上清、腹水效价 ,双向免疫扩散试验进行亚类鉴定 ,Giemsa染色镜下计数杂交瘤染色体数目。结果 获得了 2株能分泌抗rhIL 10单克隆抗体的杂交瘤细胞系 (1D3、2A3) ,无血清培养液效价为 1∶5 12、1∶2 5 6 ,腹水效价 1∶10 5、1∶10 4 。单克隆抗体为IgG2 亚类 ,染色体数目 98~ 10 3条。 2株杂交瘤细胞体外传代培养6个月以上 ,ELISA检测抗体滴度无明显降低。结论 制备的 2株单克隆抗体效价高 。 展开更多
关键词 重组白细胞介素10 单克隆抗体 杂交瘤
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白细胞介素-10对人外周血白细胞β-防御素2基因诱导性表达的影响 被引量:1
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作者 陈齐兴 周景琳 +2 位作者 Malte Book Frank Stuber 方向明 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2006年第6期596-599,604,共5页
目的:探讨炎症抑制因子白细胞介素-10(白介素-10)在β-防御素2(hBD-2)基因诱导性表达中的作用。方法:22例健康人被纳入本研究中,以终浓度0 ng/m l的LPS、100 ng/m l的LPS、10ng/m l的IL-10、100 ng/m l的LPS+10 ng/m l的IL-10加入900μ... 目的:探讨炎症抑制因子白细胞介素-10(白介素-10)在β-防御素2(hBD-2)基因诱导性表达中的作用。方法:22例健康人被纳入本研究中,以终浓度0 ng/m l的LPS、100 ng/m l的LPS、10ng/m l的IL-10、100 ng/m l的LPS+10 ng/m l的IL-10加入900μl人外周血中,于37℃刺激培养6 h后,提取外周血白细胞总RNA,用实时定量RT-PCR的方法测定外周血白细胞hBD-2mRNA的表达水平。结果:0 ng/m l的LPS或10 ng/m l的IL-10刺激6 h的白细胞中未检测到hBD-2 mRNA,100 ng/m l的LPS刺激6 h后hBD-2mRNA的表达水平为166.9±35.14,而IL-10与LPS共同刺激6 h后hBD-2 mRNA的表达水平为30.40±9.18。IL-10使hBD-2mRNA的诱导性表达水平明显降低(P<0.05)。结论:人外周血白细胞中hBD-2基因呈现诱导性表达,IL-10能下调hBD-2的诱导性表达。 展开更多
关键词 白细胞介素10 防御素类/遗传学 Β-防御素2 基因表达
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