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毕赤酵母利用甲醇生产重组蛋白技术的研究进展: 1; 作者王媛媛张翀 +1 位作者韩双艳邢新会《化工进展》北大核心 2025年第5期2441-2450,共10页; 甲醇等一碳化合物作为生物制造的一种绿色可持续低碳原料,不存在与人争粮的问题,具有巨大的应用发展潜力。能够天然利用甲醇的毕赤酵母研究历史长,已被广泛应用于多种重组蛋白的生物制造中,成为甲醇利用性能优良的底盘细胞工厂。近年虽... 展开更多; 关键词甲醇毕赤酵母重组蛋白代谢工程合成生物学; 在线阅读下载PDF 职称材料

重组毕赤酵母表达人血清白蛋白-人白介素2融合蛋白过程的代谢特性被引量：2: 2; 作者王舒郑志永 +5 位作者詹晓北史仲平高敏杰刘立明金坚李华钟《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期11-17,共7页; 分析了重组甲醇营养型毕赤酵母在5L多参数自控发酵罐上生产人血清白蛋白-人白介素2融合蛋白(HSA-IL-2)的发酵过程。在使用多种在线传感器和离线检测参数的基础上,应用相关性分析的方法将细胞生长的关键酶(乙醇氧化酶、葡萄糖-6-磷酸脱... 展开更多; 关键词重组甲醇营养型毕赤酵母在线测量酶活分析相关性分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

人甲状旁腺素在甲醇毕赤酵母中的分泌表达被引量：1: 3; 作者王旭李霜 +1 位作者刘志斌何冰芳《南京工业大学学报（自然科学版）》 CAS 2004年第4期45-48,共4页; 选用酵母偏爱的密码子,人工合成长度为282bp的人甲状旁腺素(hPTH)基因,将其克隆于M13载体中,DNA测序验证正确。通过PCR从含有hPTH基因的M13载体获得了该基因,将其插入到含有AOX1启动子和α因子信号肽序列的表达载体pPIC9K中,构建了重组... 展开更多; 关键词甲状旁腺素甲醇毕赤酵母重组质粒分泌表达酶联免疫沉淀法; 在线阅读下载PDF 职称材料

重组毕赤酵母恒化培养研究进展: 4; 作者伊博文梁伟凡《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第27期14850-14851,14857,共3页; 从底物流加策略、甲醇流加方法、甲醇浓度和稀释率几个方面综述重组毕赤酵母(Pichia pastoris)恒化培养。; 关键词重组毕赤酵母恒化培养底物流加策略甲醇流加方法及浓度稀释率; 在线阅读下载PDF 职称材料

毕赤酵母外源基因表达系统研究进展被引量：8: 5; 作者杜中军朱水芳 +1 位作者黄文胜翟衡《生物技术通报》 CAS CSCD 2002年第4期7-11,共5页; 巴斯德毕赤酵母Pichiapastoris外源基因表达系统已经成功表达了很多胞间型和胞内型蛋白质。与酿酒酵母Saccharomycesceresiviae相比 ,该系统所具有的很多优势使其应用越来越广泛。有关研究主要涉及以下几个方面 :宿主菌株、表达载体、... 展开更多; 关键词毕赤酵母外源基因表达系统研究进展甲醇营养型酵母; 在线阅读下载PDF 职称材料

重组人可溶性凋亡素-2配体在Pichia系统中的表达被引量：2: 6; 作者王梁华朱玉平 +3 位作者娄永华彭燕冯煜焦炳华《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期248-251,共4页; 目的 :在甲醇营养型酵母 (Pichia)表达系统中表达重组人可溶性肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体 (TRAIL ,凋亡素 - 2配体 )分子。方法 :人可溶性 TRAIL编码基因片段插入 p IC 3.5酵母表达载体 ,氯化锂转化酵母 GS115株 ,甲醇诱导表达 5 ... 展开更多; 关键词重组人可溶性凋亡素-2 Pichia表达系统细胞毒甲醇营养型酵母; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名毕赤酵母利用甲醇生产重组蛋白技术的研究进展: 1; 作者王媛媛张翀韩双艳邢新会; 机构清华大学深圳国际研究生院清华大学深圳国际研究生院清华大学化工系生物化工研究所清华大学合成与系统生物学研究中心华南理工大学生物科学与工程学院; 出处《化工进展》北大核心 2025年第5期2441-2450,共10页; 基金国家重点研发计划(2018YFA0901500) 深圳市高等院校稳定支持计划(WDZC20231126172733002)。; 文摘甲醇等一碳化合物作为生物制造的一种绿色可持续低碳原料,不存在与人争粮的问题,具有巨大的应用发展潜力。能够天然利用甲醇的毕赤酵母研究历史长,已被广泛应用于多种重组蛋白的生物制造中,成为甲醇利用性能优良的底盘细胞工厂。近年虽然对毕赤酵母的生理学、甲醇代谢网络、蛋白分泌表达途径及关键元件挖掘开展了大量的研究,积累了大量知识,但仍存在影响其高效应用的一系列关键问题,如甲醇及其代谢物对细胞毒性的复杂影响机制认知有限、细胞鲁棒性及甲醇利用相关的“生命暗物质”挖掘能力不足、甲醇高效转化成目标蛋白的工程化手段有限等。本文综述了国内外有关毕赤酵母生物转化甲醇合成重组蛋白的研究现状,重点总结讨论了毕赤酵母细胞工厂转化甲醇及蛋白表达优化策略,最后探讨了当前毕赤酵母生物转化甲醇生产重组蛋白过程中面临的挑战,并对其未来的生物技术创新和应用进行了展望。; 关键词甲醇毕赤酵母重组蛋白代谢工程合成生物学; Keywords methanol Pichia pastoris recombinant proteins metabolic engineering synthetic biology; 分类号 TQ9 [化学工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名重组毕赤酵母表达人血清白蛋白-人白介素2融合蛋白过程的代谢特性被引量：2: 2; 作者王舒郑志永詹晓北史仲平高敏杰刘立明金坚李华钟; 机构江南大学工业生物技术教育部重点实验室; 出处《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期11-17,共7页; 基金国家自然科学基金(60604028) 国家重点基础研究发展规划项目(973)(2007CB714304) 江苏省自然科学基金(BK2006532); 文摘分析了重组甲醇营养型毕赤酵母在5L多参数自控发酵罐上生产人血清白蛋白-人白介素2融合蛋白(HSA-IL-2)的发酵过程。在使用多种在线传感器和离线检测参数的基础上,应用相关性分析的方法将细胞生长的关键酶(乙醇氧化酶、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶和异柠檬酸脱氢酶)酶活和代谢特性相关联。实验结果显示,甲醇诱导后葡萄糖-6-磷酸脱氢酶和异柠檬酸脱氢酶的酶活分别下降了46.1%和66.8%,说明胞内代谢流发生了迁移:三羧酸循环(TCA)和磷酸戊糖途径(HMP)中代谢流通量下降,甲醇完全氧化代谢成为主要代谢流。此外,在不同控制策略下,乙醇氧化酶的酶活和重组蛋白HSA-IL-2表达量也呈现出一定的差异。高溶氧低甲醇控制方式下HSA-IL2的表达量达到27mg/L,比低溶氧高甲醇条件下的表达量高33.7%。; 关键词重组甲醇营养型毕赤酵母在线测量酶活分析相关性分析; Keywords recombinant Pichia pastoris, on-line measurement, enzyme activity analysis, correlation analysis; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人甲状旁腺素在甲醇毕赤酵母中的分泌表达被引量：1: 3; 作者王旭李霜刘志斌何冰芳; 机构南京工业大学制药与生命科学学院; 出处《南京工业大学学报（自然科学版）》 CAS 2004年第4期45-48,共4页; 文摘选用酵母偏爱的密码子,人工合成长度为282bp的人甲状旁腺素(hPTH)基因,将其克隆于M13载体中,DNA测序验证正确。通过PCR从含有hPTH基因的M13载体获得了该基因,将其插入到含有AOX1启动子和α因子信号肽序列的表达载体pPIC9K中,构建了重组质粒pPIC9K-hPTH,电击法转化甲醇毕赤酵母(Pichiapastoris)GS115菌株,经G418筛选得到高拷贝转化子,甲醇诱导表达,Tricine-SDS-PAGE电泳结果表明在9 3kDa处有明显的诱导蛋白带,与报道的hPTH的相对分子质量相近;酶联免疫沉淀法(ELISA)检测证明表达的蛋白具有hPTH免疫活性为132ng/L。; 关键词甲状旁腺素甲醇毕赤酵母重组质粒分泌表达酶联免疫沉淀法; Keywords human parathyroid hormone Pichia pastoris recombinant plasmid secreted expression; 分类号 TQ467.4 [化学工程—制药化工] Q933 [生物学—微生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名重组毕赤酵母恒化培养研究进展: 4; 作者伊博文梁伟凡; 机构华南理工大学生物科学与工程学院; 出处《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第27期14850-14851,14857,共3页; 基金国家大学生创新性实验计划项目(081056131); 文摘从底物流加策略、甲醇流加方法、甲醇浓度和稀释率几个方面综述重组毕赤酵母(Pichia pastoris)恒化培养。; 关键词重组毕赤酵母恒化培养底物流加策略甲醇流加方法及浓度稀释率; Keywords Recombinant Pichia pastoris； Chemostat culture； Substrate feeding； Methanol feeding； Dilution rate；; 分类号 Q936 [生物学—微生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名毕赤酵母外源基因表达系统研究进展被引量：8: 5; 作者杜中军朱水芳黄文胜翟衡; 机构山东农业大学园艺学院国家动植物检疫实验所; 出处《生物技术通报》 CAS CSCD 2002年第4期7-11,共5页; 文摘巴斯德毕赤酵母Pichiapastoris外源基因表达系统已经成功表达了很多胞间型和胞内型蛋白质。与酿酒酵母Saccharomycesceresiviae相比 ,该系统所具有的很多优势使其应用越来越广泛。有关研究主要涉及以下几个方面 :宿主菌株、表达载体、转化方法、外源基因整合、外源蛋白糖基化和高密度发酵培养等。; 关键词毕赤酵母外源基因表达系统研究进展甲醇营养型酵母; Keywords Methylotrophic yeasts Pichia pastoris Expression system; 分类号 Q344.13 [生物学—遗传学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名重组人可溶性凋亡素-2配体在Pichia系统中的表达被引量：2: 6; 作者王梁华朱玉平娄永华彭燕冯煜焦炳华; 机构第二军医大学基础医学部卫生毒理学教研室; 出处《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期248-251,共4页; 基金国家"九五"科技攻关计划医药生物关键技术基因工程药物"重中之重"专题! (96 -C0 2 -0 1-0 2 )资助; 文摘目的 :在甲醇营养型酵母 (Pichia)表达系统中表达重组人可溶性肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体 (TRAIL ,凋亡素 - 2配体 )分子。方法 :人可溶性 TRAIL编码基因片段插入 p IC 3.5酵母表达载体 ,氯化锂转化酵母 GS115株 ,甲醇诱导表达 5 d,SDS- PAGE和 Western- blotting确认表达 ,L 92 9细胞鉴定活性。结果 :发现在酵母细胞中重组表达的 TRAIL在 SDS-PAGE上占总蛋白的 5 0 %以上 ,用抗人 TRAIL多抗可以确认表达了 TRAIL重组分子 ,杀伤肿瘤细胞的比活性较原核表达后复性的 TRAIL有明显提高 ,并能诱导几株肿瘤细胞 DNA片段化 ,说明 TRAIL可能已正确折叠并形成活性必需的高级结构。结论 :在 Pichia系统中正确表达了人可溶性 TRAIL分子。; 关键词重组人可溶性凋亡素-2 Pichia表达系统细胞毒甲醇营养型酵母; Keywords ligand, apoptosis 2 Pichia pastoris expression system cytotoxicity; 分类号 R73－3 [医药卫生—肿瘤] Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	毕赤酵母利用甲醇生产重组蛋白技术的研究进展	王媛媛张翀韩双艳邢新会	《化工进展》北大核心	2025	0	在线阅读下载PDF 职称材料
2	重组毕赤酵母表达人血清白蛋白-人白介素2融合蛋白过程的代谢特性	王舒郑志永詹晓北史仲平高敏杰刘立明金坚李华钟	《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心	2008	2	在线阅读下载PDF 职称材料
3	人甲状旁腺素在甲醇毕赤酵母中的分泌表达	王旭李霜刘志斌何冰芳	《南京工业大学学报（自然科学版）》 CAS	2004	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	重组毕赤酵母恒化培养研究进展	伊博文梁伟凡	《安徽农业科学》 CAS 北大核心	2010	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	毕赤酵母外源基因表达系统研究进展	杜中军朱水芳黄文胜翟衡	《生物技术通报》 CAS CSCD	2002	8	在线阅读下载PDF 职称材料
6	重组人可溶性凋亡素-2配体在Pichia系统中的表达	王梁华朱玉平娄永华彭燕冯煜焦炳华	《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2001	2	在线阅读下载PDF 职称材料