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重组猪γ-干扰素在毕赤酵母中的表达及其生物学活性研究 被引量:2
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作者 黄忠 黄元 +1 位作者 阮良基 曹汉威 《广东农业科学》 CAS CSCD 2008年第9期98-102,共5页
采用RT-PCR从猪外周血液淋巴细胞中克隆出猪γ-干扰素基因cDNA,构建了重组酵母表达载体(pPICZα-PoIFN-γ),并在巴斯德毕赤酵母X33株中实现了高效分泌表达,经SDS-PAGE和Western-blot证实猪γ-干扰素分子量为18 kD,细胞培养试验结果表明... 采用RT-PCR从猪外周血液淋巴细胞中克隆出猪γ-干扰素基因cDNA,构建了重组酵母表达载体(pPICZα-PoIFN-γ),并在巴斯德毕赤酵母X33株中实现了高效分泌表达,经SDS-PAGE和Western-blot证实猪γ-干扰素分子量为18 kD,细胞培养试验结果表明,重组猪γ-干扰素能抑制水泡性口炎病毒(VSV)对猪肾传代细胞(PK-15)的攻击;而在动物试验中,重组猪γ-干扰素可明显提高猪伪狂犬疫苗的免疫效果。 展开更多
关键词 γ-干扰素(poifn-γ) 重组毕赤酵母 基因表达
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重组猪α-干扰素的纯化及其抗病毒活性测定 被引量:1
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作者 肖长峰 叶小飞 +3 位作者 董世娟 朱于敏 李震 于瑞嵩 《上海农业学报》 CSCD 北大核心 2014年第1期1-4,共4页
分别采用PEG6000沉淀法和Sephadex G-50凝胶色谱法纯化毕赤酵母分泌表达的重组猪α-干扰素(PolFN-α)。正交试验结果显示:PEG6000沉淀法最佳分离条件为pH6.0、NaCl0.2mol/L、PEG60000.1g/mL,蛋白回收率约80%;纯化后蛋白效价... 分别采用PEG6000沉淀法和Sephadex G-50凝胶色谱法纯化毕赤酵母分泌表达的重组猪α-干扰素(PolFN-α)。正交试验结果显示:PEG6000沉淀法最佳分离条件为pH6.0、NaCl0.2mol/L、PEG60000.1g/mL,蛋白回收率约80%;纯化后蛋白效价为2.9×105IU/mL,比活为1.04x105IU/mg。通过SephadexG.50凝胶色谱纯化,重组PolFN-α的回收率为60%左右,纯度达到90%;纯化后蛋白效价为8×103IU/mL,比活为6.7×103IU/mg。 展开更多
关键词 猪α-干扰素 重组 纯化 抗病毒活性
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重组猪α-干扰素的纯化及生化性质鉴定 被引量:2
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作者 邵菁 于瑞嵩 +4 位作者 董世娟 朱于敏 沈世缘 曹祥荣 李震 《南京师大学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期97-100,104,共5页
对巴斯德毕赤酵母高效分泌表达的猪α-干扰素(PoIFN-α)纯化工艺和纯化后重组蛋白的部分生化特性进行了研究,结果表明:猪α-干扰素(PoIFN-α)发酵液经离心、透析、过滤处理之后,依次利用亲和层析和离子交换层析使目的蛋白得到了纯化.经... 对巴斯德毕赤酵母高效分泌表达的猪α-干扰素(PoIFN-α)纯化工艺和纯化后重组蛋白的部分生化特性进行了研究,结果表明:猪α-干扰素(PoIFN-α)发酵液经离心、透析、过滤处理之后,依次利用亲和层析和离子交换层析使目的蛋白得到了纯化.经N端氨基酸测序,Western-blot,对酸、热、巯基乙醇的稳定性和糖基化程度等检测后发现,所表达的猪α-干扰素N端氨基酸序列(前5个)正确,对酸和热基本稳定,二硫键对目的蛋白的活性至关重要,没有发现目的蛋白的糖基化. 展开更多
关键词 重组猪α-干扰素(poifn-α) 亲和层析 离子交换层析 糖基化 生化性质
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重组猪α干扰素防治仔猪流行性腹泻病试验及临床应用 被引量:11
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作者 赵永旭 袁秀芳 +2 位作者 姜平 李慧 王一成 《浙江农业科学》 2017年第2期291-293,共3页
针对近年在我国再次出现的猪流行性腹泻,尤其是造成初生仔猪大批死亡的情况,本试验应用酵母表达的重组猪α-干扰素开展初生仔猪流行性腹泻病的临床防治试验。选择了3个发病猪场,以口服重组猪α-干扰素方式进行防治。结果表明,口服重组猪... 针对近年在我国再次出现的猪流行性腹泻,尤其是造成初生仔猪大批死亡的情况,本试验应用酵母表达的重组猪α-干扰素开展初生仔猪流行性腹泻病的临床防治试验。选择了3个发病猪场,以口服重组猪α-干扰素方式进行防治。结果表明,口服重组猪α-干扰素对初生仔猪流行性腹泻具有较好的防治作用,仔猪存活率可达50%~70%。同时进行腹腔或/和口服补液,仔猪存活率从53%提升到71%。同时对重组猪α-干扰素进行临床防治应用,取得了较好的效果。 展开更多
关键词 重组猪α-干扰素 流行性腹泻病 存活率
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重组猪α干扰素的亲和层析 被引量:1
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作者 邵菁 于瑞嵩 +4 位作者 董世娟 朱于敏 沈世缘 曹祥荣 李震 《上海农业学报》 CSCD 2007年第4期31-33,共3页
真核系统表达的猪α干扰素(PoIFN-α)发酵液,经离心、收集上清液、透析过滤处理,通过FPLC-HisTrap HP Kit亲和层析系统分离纯化,最后以SDS-PAGE银染法检验。结果表明,在不同pH和NaCl浓度情况下,发酵液经亲和层析系统分离纯化后均可以得... 真核系统表达的猪α干扰素(PoIFN-α)发酵液,经离心、收集上清液、透析过滤处理,通过FPLC-HisTrap HP Kit亲和层析系统分离纯化,最后以SDS-PAGE银染法检验。结果表明,在不同pH和NaCl浓度情况下,发酵液经亲和层析系统分离纯化后均可以得到较为单一的目的蛋白组分,而在pH8.2,NaCl0mmol/L的情况下得到的目的蛋白更纯,且非特异性吸附也较少。 展开更多
关键词 重组猪α干扰素(poifn-α) 亲和层析
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猪γ干扰素基因重组腺病毒的构建与鉴定 被引量:1
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作者 刘根梅 罗满林 +2 位作者 陈瑞爱 陈矩豪 裴党帅 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2011年第5期18-20,共3页
干扰素-γ(INF-γ)又称Ⅱ干扰素,主要是由活化的CD4+、CD8+等T淋巴细胞和NK细胞产生的一种细胞因子,猪γ干扰素全基因为501个碱基,编码166个氨基酸,前23个氨基酸为信号肽,后143个氨基酸为活性成熟蛋白。
关键词 干扰素基因 Γ干扰素 重组腺病毒 鉴定 活性状态 干扰素-Γ T淋巴细胞 氨基酸
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猪α-干扰素临床促仔猪生长及疾病预防试验 被引量:9
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作者 岑路 岑伟建 +1 位作者 刘键强 卢和丰 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第2期141-143,共3页
选择广东四会某猪场40只断奶仔猪为观察对象,开展重组猪α-干扰素在促进生长作用和预防病毒性疾病方面的临床试验。试验1、2组与对照组相比较料重比分别降低6.3%和17.23%,平均每日增重率分别改变了-3.69%和24.85%,成活率分别提高了6.6%... 选择广东四会某猪场40只断奶仔猪为观察对象,开展重组猪α-干扰素在促进生长作用和预防病毒性疾病方面的临床试验。试验1、2组与对照组相比较料重比分别降低6.3%和17.23%,平均每日增重率分别改变了-3.69%和24.85%,成活率分别提高了6.6%和14.3%,腹泻率分别降低了11.5%和26.9%,疾病总防治率分别提高了40.1%和55.49%;试验观察期间,对照组诊断为蓝耳病的4例,死亡1例,试验组则没有发生蓝耳病例。表明猪α-干扰素对仔猪的生长有良好的促进作用,具有显著的紧急预防病毒性疾病效果。 展开更多
关键词 重组猪α-干扰素 断奶仔 促生长 预防疾病
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