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猪繁殖与呼吸综合征病毒M蛋白在重组牛痘病毒中的表达与鉴定 被引量:2
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作者 张维军 田野 +10 位作者 林燕 王群 徐青元 孙庆歌 刘霓红 杨涛 田志军 步志高 童光志 李文京 吴东来 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期741-746,共6页
为重组表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)M蛋白,本研究将RT-PCR获得的PRRSV CH-1a株M蛋白基因,克隆于pMD18-T载体中,经测序鉴定正确后,亚克隆至牛痘病毒重组转移质粒pSC11中,构建了转移重组质粒pSC11-PRRSV-M。将pSC11-PRRSV-M在脂质... 为重组表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)M蛋白,本研究将RT-PCR获得的PRRSV CH-1a株M蛋白基因,克隆于pMD18-T载体中,经测序鉴定正确后,亚克隆至牛痘病毒重组转移质粒pSC11中,构建了转移重组质粒pSC11-PRRSV-M。将pSC11-PRRSV-M在脂质体的介导下转染WR株牛痘病毒感染的TK-143细胞,在含有X-gal的琼脂培养基上通过蓝斑筛选含有PRRSV M基因的重组病毒rWR-PRRSV-M。Western blot与IFA检测表明,重组病毒成功表达了PRRSV M蛋白,而且所表达的蛋白保持了良好的免疫原性。动物实验表明,rWR-PRRSV-M所表达的PRRSV M蛋白在免疫小鼠体内诱生了抗PRRSV的抗体。rWR-PRRSV-M的构建,为进一步探讨PRRSV M蛋白免疫原性提供了基础数据,也为PRRS重组活载体疫苗的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 M蛋白 重组牛痘病毒
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PRRSV GP5蛋白在重组牛痘病毒中的表达与鉴定 被引量:1
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作者 田野 张维军 +6 位作者 林燕 王群 杨涛 步志高 童光志 张守发 吴东来 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期833-837,共5页
为构建表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP5重组牛痘病毒,本研究通过RT-PCR获得PRRSVCH-1a株GP5蛋白基因,将其克隆至pMD18-T载体。经测序鉴定正确后,将该片段作为目的基因亚克隆至转移质粒pSC11中,构建重组转移质粒(pSC11-GP5)。将pSC... 为构建表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP5重组牛痘病毒,本研究通过RT-PCR获得PRRSVCH-1a株GP5蛋白基因,将其克隆至pMD18-T载体。经测序鉴定正确后,将该片段作为目的基因亚克隆至转移质粒pSC11中,构建重组转移质粒(pSC11-GP5)。将pSC11-GP5转染WR株牛痘病毒感染的TK-143细胞,与牛痘病毒进行同源重组。在含有X-gal的琼脂培养基上进行蓝斑筛选,获得了含有PRRSV GP5基因的重组病毒(rWR-PRRSV-GP5)。IFA及动物试验表明,重组病毒表达了PRRSVGP5蛋白,并在免疫小鼠体内诱生了较强的PRRSV抗体。实验表明,该重组病毒所表达的PRRSV GP5蛋白保持了良好的抗原性,为进一步研究PRRSV GP5蛋白免疫原性提供了基础数据,也为PRRS重组活载体疫苗的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 猪生殖与呼吸综合征病毒 GP5蛋白 重组牛痘病毒
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禽流感病毒H5N1血凝素蛋白的重组牛痘病毒表达 被引量:1
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作者 谌资 郑煜煌 Yipu Lin 《中国感染控制杂志》 CAS 2009年第3期150-154,共5页
目的研究H5 I151F和H5 I151F+A134V+E186D两种氨基酸变异对血凝素蛋白(HA)亲人受体结合的影响,并获得该HA。方法构建载体pRB21’,共感染/转染vp37^-牛痘病毒vRB12和pRB21’,基因同源重组牛痘病毒表达HA,Western免疫印迹法鉴定... 目的研究H5 I151F和H5 I151F+A134V+E186D两种氨基酸变异对血凝素蛋白(HA)亲人受体结合的影响,并获得该HA。方法构建载体pRB21’,共感染/转染vp37^-牛痘病毒vRB12和pRB21’,基因同源重组牛痘病毒表达HA,Western免疫印迹法鉴定。结果获得了克隆有H5HA全长基因片段的载体pRB21’,构建了2种重组牛痘病毒re-VV H5 I151F和re-VV H5 I151F+A134V+E186D,且能在被感染细胞膜表达这两种HA。结论首次通过构建重组牛痘病毒成功表达了禽流感病毒H5N1的H5HA,为进一步研究禽流感病毒人传人的可能性奠定了基础。 展开更多
关键词 禽流感病毒 H5N1亚型 血凝素蛋白 重组牛痘病毒 传染病
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重组牛痘病毒疫苗对FMDV的保护作用
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作者 李秉鸿 《畜牧兽医科技信息》 2000年第9期13-13,共1页
这种重组牛痘病毒可以表达口蹄疫病毒(FMDV)C3Arg85株4种结构蛋白的前体,其构成是使用一种基于蚀斑形成的方式分离重组牛痘病毒的步骤来设计并生成这种疫苗。成年鼠接种这一重组牛痘病毒之后,诱导了抗同源性FMDV和牛痘病毒的很高滴度的... 这种重组牛痘病毒可以表达口蹄疫病毒(FMDV)C3Arg85株4种结构蛋白的前体,其构成是使用一种基于蚀斑形成的方式分离重组牛痘病毒的步骤来设计并生成这种疫苗。成年鼠接种这一重组牛痘病毒之后,诱导了抗同源性FMDV和牛痘病毒的很高滴度的中和抗体,通过中和试验可测出。使用全部病毒作为抗原进行液相阻断夹心ELISA_s,能显示出很高的抗同源性FMDV的总抗体滴度。 展开更多
关键词 重组牛痘病毒 FMDV 口蹄疫病毒 种疫苗 中和试验 灭活疫苗 同源性 中和抗体 结构蛋白 分离重组
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PRRSV GP5蛋白在重组牛痘病毒中的表达与鉴定
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《今日畜牧兽医》 2010年第1期68-68,共1页
为构建表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP5重组牛痘病毒,本研究通过RT—PCR获得PRRSVCH—1a株GP5蛋白基因,将其克隆至pMD18-T载体。经测序鉴定正确后,将该片段作为目的基因亚克隆至转移质粒pSC11中,构建重组转移质粒(pSC11—... 为构建表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP5重组牛痘病毒,本研究通过RT—PCR获得PRRSVCH—1a株GP5蛋白基因,将其克隆至pMD18-T载体。经测序鉴定正确后,将该片段作为目的基因亚克隆至转移质粒pSC11中,构建重组转移质粒(pSC11—GP5)。将pSC11—GP5转染WR株牛痘病毒感染的TK-143细胞, 展开更多
关键词 重组牛痘病毒 GP5蛋白 PRRSV 猪繁殖与呼吸综合征病毒 鉴定 病毒感染 蛋白基因 目的基因
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