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重组牛乳铁蛋白肽包含体的复性与纯化
被引量：
5
1
作者
林少华
罗红霞
+2 位作者
郭慧媛
任发政
罗云波
《中国乳品工业》
CAS
北大核心
2006年第1期9-12,共4页
通过分析透析液pH值,包含体蛋白浓度,DTT浓度3个参数对复性率的影响,确定了重组牛乳铁蛋白N-末端多肽(pGEX-4T1/rbLF-N)包含体透析复性的最佳条件和复性后蛋白纯化的适宜方法。采用谷胱甘肽琼脂糖凝胶4B柱(Glutathione SapharoseTM 4B)...
通过分析透析液pH值,包含体蛋白浓度,DTT浓度3个参数对复性率的影响,确定了重组牛乳铁蛋白N-末端多肽(pGEX-4T1/rbLF-N)包含体透析复性的最佳条件和复性后蛋白纯化的适宜方法。采用谷胱甘肽琼脂糖凝胶4B柱(Glutathione SapharoseTM 4B)对复性后的蛋白溶液进行纯化,纯化后的融和蛋白经胃蛋白酶酶解并检测其酶解产物的抗菌活性。试验表明包涵体蛋白可以部分复性。当pH值为8.5,包含体蛋白质量浓度为100mg/L,DTT浓度为24 mmol/L时,包含体的复性率最高。纯化后的融合蛋白酶解产物具有抗菌作用。
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关键词
重组
牛乳
铁
蛋白
肽
rblf—
n
包含体
透析复性
纯化
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职称材料
重组大肠杆菌BL21(DE3)/rbLF-N高密度培养条件优化
被引量：
4
2
作者
罗红霞
林少华
+3 位作者
任发政
陈历水
陈雅松
田寒友
《中国乳品工业》
CAS
北大核心
2007年第1期10-14,共5页
研究了6种不同培养基,pH值和诱导条件对表达量的影响。结果表明,培养基为2×TY+M9+微量元素溶液,pH值为7.0,在对数生长中后期(OD600=1.96)用浓度为0.1 mmol/L的IPTG诱导4 h,rbLF-N的表达量最高,达到25.2%。在此条件下,用Bioengineer...
研究了6种不同培养基,pH值和诱导条件对表达量的影响。结果表明,培养基为2×TY+M9+微量元素溶液,pH值为7.0,在对数生长中后期(OD600=1.96)用浓度为0.1 mmol/L的IPTG诱导4 h,rbLF-N的表达量最高,达到25.2%。在此条件下,用Bioengineering 19 L自控式发酵罐,以pH-stat的培养技术,高密度培养重组E.coli BL21(DE3)/pGEX-4T1,生产重组牛乳铁蛋白N末端多肽(recombinant bovine lactoferrin-N polypeptide,rbLF-N)。通过控制pH值、溶解氧以及补料方式,使工程菌E.coli BL21(DE3)/pGEX-4T1的发酵菌体OD600值达到72.6,发酵菌体干重为31.9 g/L,rbLF-N表达量为菌体总蛋白的26.8%。
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关键词
重组
牛乳
铁
蛋白
n
末端多
肽
(
rblf—
n
)
高密度培养
pH—stat
培养条件
优化
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职称材料
题名
重组牛乳铁蛋白肽包含体的复性与纯化
被引量：
5
1
作者
林少华
罗红霞
郭慧媛
任发政
罗云波
机构
中国农业大学食品科学与营养工程学院
出处
《中国乳品工业》
CAS
北大核心
2006年第1期9-12,共4页
基金
国家科技部资助项目(2002BA501A07)
北京市教委资助项目(GJSY10090401)
文摘
通过分析透析液pH值,包含体蛋白浓度,DTT浓度3个参数对复性率的影响,确定了重组牛乳铁蛋白N-末端多肽(pGEX-4T1/rbLF-N)包含体透析复性的最佳条件和复性后蛋白纯化的适宜方法。采用谷胱甘肽琼脂糖凝胶4B柱(Glutathione SapharoseTM 4B)对复性后的蛋白溶液进行纯化,纯化后的融和蛋白经胃蛋白酶酶解并检测其酶解产物的抗菌活性。试验表明包涵体蛋白可以部分复性。当pH值为8.5,包含体蛋白质量浓度为100mg/L,DTT浓度为24 mmol/L时,包含体的复性率最高。纯化后的融合蛋白酶解产物具有抗菌作用。
关键词
重组
牛乳
铁
蛋白
肽
rblf—
n
包含体
透析复性
纯化
Keywords
recombi
n
a
n
t bovi
n
e
rblf
-
n
i
n
clusio
n
body
dialysis re
n
aturatio
n
purificatio
n
分类号
TQ936.16 [化学工程]
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职称材料
题名
重组大肠杆菌BL21(DE3)/rbLF-N高密度培养条件优化
被引量：
4
2
作者
罗红霞
林少华
任发政
陈历水
陈雅松
田寒友
机构
北京农业职业学院
中国农业大学食品科学与营养工程学院功能乳品重点实验室
新疆农业大学食品科学学院
出处
《中国乳品工业》
CAS
北大核心
2007年第1期10-14,共5页
基金
北京市教委资助项目(GJSY10090401)
文摘
研究了6种不同培养基,pH值和诱导条件对表达量的影响。结果表明,培养基为2×TY+M9+微量元素溶液,pH值为7.0,在对数生长中后期(OD600=1.96)用浓度为0.1 mmol/L的IPTG诱导4 h,rbLF-N的表达量最高,达到25.2%。在此条件下,用Bioengineering 19 L自控式发酵罐,以pH-stat的培养技术,高密度培养重组E.coli BL21(DE3)/pGEX-4T1,生产重组牛乳铁蛋白N末端多肽(recombinant bovine lactoferrin-N polypeptide,rbLF-N)。通过控制pH值、溶解氧以及补料方式,使工程菌E.coli BL21(DE3)/pGEX-4T1的发酵菌体OD600值达到72.6,发酵菌体干重为31.9 g/L,rbLF-N表达量为菌体总蛋白的26.8%。
关键词
重组
牛乳
铁
蛋白
n
末端多
肽
(
rblf—
n
)
高密度培养
pH—stat
培养条件
优化
Keywords
recombi
n
a
n
t bovi
n
e lactoferri
n
-
n
Dolypeptide （
rblf
-
n
）
high cell-de
n
sity culture
pH-stat
culture co
n
ditio
n
optimize
分类号
Q93-335 [生物学—微生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
重组牛乳铁蛋白肽包含体的复性与纯化
林少华
罗红霞
郭慧媛
任发政
罗云波
《中国乳品工业》
CAS
北大核心
2006
5
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
重组大肠杆菌BL21(DE3)/rbLF-N高密度培养条件优化
罗红霞
林少华
任发政
陈历水
陈雅松
田寒友
《中国乳品工业》
CAS
北大核心
2007
4
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职称材料
已选择
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参考文献
引证文献
统计分析
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