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荧光定量PCR法检测重组汉逊酵母中HBsAg基因的拷贝数
被引量：
2
1
作者
邵强
冯真真
+2 位作者
张勇朝
潘若文
徐玉国
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第10期178-180,193,共4页
重组汉逊酵母基因中外源基因拷贝数是影响目的基因表达水平和检测传代稳定性的重要因素,因此外源基因拷贝数的检测成为研究和分析重组基因的重要内容。利用快速、灵敏的荧光定量PCR法检测外源基因HBsAg拷贝数,以Mox基因为内源参照基因,...
重组汉逊酵母基因中外源基因拷贝数是影响目的基因表达水平和检测传代稳定性的重要因素,因此外源基因拷贝数的检测成为研究和分析重组基因的重要内容。利用快速、灵敏的荧光定量PCR法检测外源基因HBsAg拷贝数,以Mox基因为内源参照基因,通过梯度稀释法,建立了Mox基因和HBsAg基因的循环数(Ct值)与起始模板数的相关标准曲线,其相关系数分别达到0.9996和0.9982。通过比较目的基因HBsAg和内源参照基因Mox在同一荧光强度下出峰的循环数,获得了目的基因HBsAg在重组汉逊酵母中的拷贝数为39。发酵前后HBsAg基因在重组汉逊酵母中稳定存在,发酵前后拷贝数相差均小于6.2%。本方法快速、简便、准确,可以满足基因拷贝数检测的需要。
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关键词
荧光定量PCR
HBsAg基因
Mox基因
重组汉逊酵母
拷贝数
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职称材料
题名
荧光定量PCR法检测重组汉逊酵母中HBsAg基因的拷贝数
被引量：
2
1
作者
邵强
冯真真
张勇朝
潘若文
徐玉国
机构
河南师范大学生命科学学院
华兰生物工程股份有限公司
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第10期178-180,193,共4页
基金
河南省重点科技攻关项目(082300450300)
华兰生物工程有限公司博士后科研基金
河南省动物学重点学科基金
文摘
重组汉逊酵母基因中外源基因拷贝数是影响目的基因表达水平和检测传代稳定性的重要因素,因此外源基因拷贝数的检测成为研究和分析重组基因的重要内容。利用快速、灵敏的荧光定量PCR法检测外源基因HBsAg拷贝数,以Mox基因为内源参照基因,通过梯度稀释法,建立了Mox基因和HBsAg基因的循环数(Ct值)与起始模板数的相关标准曲线,其相关系数分别达到0.9996和0.9982。通过比较目的基因HBsAg和内源参照基因Mox在同一荧光强度下出峰的循环数,获得了目的基因HBsAg在重组汉逊酵母中的拷贝数为39。发酵前后HBsAg基因在重组汉逊酵母中稳定存在,发酵前后拷贝数相差均小于6.2%。本方法快速、简便、准确,可以满足基因拷贝数检测的需要。
关键词
荧光定量PCR
HBsAg基因
Mox基因
重组汉逊酵母
拷贝数
Keywords
Fluorescence quantitative PCR HBsAg gene Mox gene Recombinant Hansenula polymorpha yeast Copy number
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
荧光定量PCR法检测重组汉逊酵母中HBsAg基因的拷贝数
邵强
冯真真
张勇朝
潘若文
徐玉国
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2009
2
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