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重组原核表达质粒pTrc99A-ureB/hlyE的构建和表达
被引量：
1
1
作者
焦志勇
陈旻湖
+3 位作者
李国庆
朱森林
陈为
胡品津
《中国人兽共患病杂志》
CSCD
北大核心
2003年第3期34-36,67,共4页
目的 构建表达幽门螺杆菌 (Helicobacterpylori,Hp)尿素酶B亚单位 (ureB)基因与大肠杆菌K - 12株hlyE基因融合表达的原核表达质粒 pTrc99A -hlyE 并表达。 方法 用PCR扩增hlyE基因 ,经酶切连接反应将其克隆入重组原核表达质粒并测序 ,...
目的 构建表达幽门螺杆菌 (Helicobacterpylori,Hp)尿素酶B亚单位 (ureB)基因与大肠杆菌K - 12株hlyE基因融合表达的原核表达质粒 pTrc99A -hlyE 并表达。 方法 用PCR扩增hlyE基因 ,经酶切连接反应将其克隆入重组原核表达质粒并测序 ,与GenBank中的核酸和蛋白序列进行BLAST分析 ,重组的阳性克隆经IPTG诱导培养 ,SDS -PAGE电泳进行表达分析 ,薄层扫描分析融合蛋白的含量。结果 对重组质粒进行酶切和PCR检测 ,证明构建了携带hlyE及ureB基因的重组原核表达质粒 pTrc99A -ureB/hlyE ,核酸序列测定及同源性分析证实所构建的原核表达质粒pTrc99A -ureB/hlyE中所含的Hp -ureB及hlyE与GeneBank中的Hp -ureB和hlyE序列的同源性分别为 97 4 2 % (16 6 3/ 170 7)、99% (910 / 918)。重组细菌JM10 9可表达约 10 0kD的融合蛋白ureB/hlyE ,含量占全菌体蛋白含量的 15 5 %。 结论 构建并鉴定了原核表达质粒pTrc99A -hlyE并高效表达 。
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关键词
重组原核表达质粒
pTrc99A-ureB/hlyE
尿素酶B亚单位
幽门螺杆菌
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职称材料
题名
重组原核表达质粒pTrc99A-ureB/hlyE的构建和表达
被引量：
1
1
作者
焦志勇
陈旻湖
李国庆
朱森林
陈为
胡品津
机构
中山大学第一附属医院消化内科
出处
《中国人兽共患病杂志》
CSCD
北大核心
2003年第3期34-36,67,共4页
基金
2002年度教育部骨干教师基金(2 0 0 0 -0 65)
2 0 0 2年广东省自然科学基金重点项目 (0 2 1898)
+1 种基金
广东省高教厅"千百十工程"优秀人才基金(Q2 0 3 1)
CMB -Sumsscholarprogram(NO .98-677)
文摘
目的 构建表达幽门螺杆菌 (Helicobacterpylori,Hp)尿素酶B亚单位 (ureB)基因与大肠杆菌K - 12株hlyE基因融合表达的原核表达质粒 pTrc99A -hlyE 并表达。 方法 用PCR扩增hlyE基因 ,经酶切连接反应将其克隆入重组原核表达质粒并测序 ,与GenBank中的核酸和蛋白序列进行BLAST分析 ,重组的阳性克隆经IPTG诱导培养 ,SDS -PAGE电泳进行表达分析 ,薄层扫描分析融合蛋白的含量。结果 对重组质粒进行酶切和PCR检测 ,证明构建了携带hlyE及ureB基因的重组原核表达质粒 pTrc99A -ureB/hlyE ,核酸序列测定及同源性分析证实所构建的原核表达质粒pTrc99A -ureB/hlyE中所含的Hp -ureB及hlyE与GeneBank中的Hp -ureB和hlyE序列的同源性分别为 97 4 2 % (16 6 3/ 170 7)、99% (910 / 918)。重组细菌JM10 9可表达约 10 0kD的融合蛋白ureB/hlyE ,含量占全菌体蛋白含量的 15 5 %。 结论 构建并鉴定了原核表达质粒pTrc99A -hlyE并高效表达 。
关键词
重组原核表达质粒
pTrc99A-ureB/hlyE
尿素酶B亚单位
幽门螺杆菌
Keywords
Helicobacter pylori
ureB gene
hlyE gene
Vaccine
Recombinant
分类号
R378.2 [医药卫生—病原生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
重组原核表达质粒pTrc99A-ureB/hlyE的构建和表达
焦志勇
陈旻湖
李国庆
朱森林
陈为
胡品津
《中国人兽共患病杂志》
CSCD
北大核心
2003
1
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