细菌重组减毒鼠伤寒沙门氏菌疫苗研究进展 被引量：6

1

作者 李文桂 陈雅棠 《动物医学进展》 CSCD 2004年第2期49-53,共5页

鼠伤寒沙门氏菌 ( St)是一种肠道致病菌 ,通过基因突变可构建许多鼠伤寒沙门氏菌减毒株 ,例如 :X40 72、X42 17、X45 5 0、X4989、X4990、 X40 64、 SL 3 2 61、 GID10 1、 GID10 5、GID10 6和 BRD5 0 9等 ,它们均是两个或多个基因的精... 鼠伤寒沙门氏菌 ( St)是一种肠道致病菌 ,通过基因突变可构建许多鼠伤寒沙门氏菌减毒株 ,例如 :X40 72、X42 17、X45 5 0、X4989、X4990、 X40 64、 SL 3 2 61、 GID10 1、 GID10 5、GID10 6和 BRD5 0 9等 ,它们均是两个或多个基因的精确突变 ,其基因型和表型均很稳定 ,可用作构建细菌性疫苗的表达载体。国内外学者相继研制了肺炎链球菌、结核杆菌、百日咳杆菌、产单核细胞李斯特菌、鼠疫耶尔森菌、土拉弗郎西斯菌、铜绿假单胞菌、淋病奈瑟菌、牛布氏杆菌、破伤风梭菌、炭疽芽孢杆菌、沙眼衣原体和猪肺炎支原体等细菌的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌疫苗。文章着重讨论了这些疫苗的构建及其免疫机制等方面的研究进展 。 展开更多

关键词 细菌重组减毒疫苗 鼠伤寒沙门氏菌 肠道致病菌 免疫机制 细菌性疾病

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食源和人源鼠伤寒沙门氏菌单相变种的基因组特征和毒力因子对比分析

2

作者 干鸿翔 许安宁 +7 位作者 周璐 罗芳芳 冯仲阳 高彬茹 李卓思 王翔 董庆利 秦晓杰 《食品科学》 北大核心 2025年第6期116-123,共8页

基于前期获得的32株食源和人源鼠伤寒沙门氏菌单相变种,通过全基因组测序比较分析菌株的毒力因子和可移动遗传元件,并构建系统进化树,进一步分析菌株的酸抗性、生物被膜及细胞黏附与侵袭能力,明确不同来源鼠伤寒沙门氏菌单相变种的毒力... 基于前期获得的32株食源和人源鼠伤寒沙门氏菌单相变种,通过全基因组测序比较分析菌株的毒力因子和可移动遗传元件,并构建系统进化树,进一步分析菌株的酸抗性、生物被膜及细胞黏附与侵袭能力,明确不同来源鼠伤寒沙门氏菌单相变种的毒力特征。结果显示,食源和人源鼠伤寒沙门氏菌单相变种均携带大量毒力因子和基因组岛、转座子等可移动遗传元件。进化关系分析显示,32株菌与数据库中参考的鼠伤寒沙门氏菌单相变种处于同一分支,表明具有较近的亲缘关系。另外,所有菌株在pH 3处理1 h后均能存活,25%的菌株生物被膜形成能力强,但人源和食源菌株的生物被膜形成和细胞黏附与侵袭能力无显著差异。总之,不同来源鼠伤寒沙门氏菌单相变种均携带大量毒力因子和可移动遗传元件,且菌株的毒力相关表型具有异质性,结果可为该菌的风险评估提供重要数据支撑。 展开更多

关键词 鼠伤寒沙门氏菌单相变种 毒力因子 酸抗性 生物被膜 细胞黏附与侵袭

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以减毒鼠伤寒沙门氏菌为载体的重组HBsAg口服疫苗构建与鉴定 被引量：2

3

作者 方希修 乐国伟 +2 位作者 王冬梅 刘建文 施用辉 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期98-102,共5页

采用大量培养含有pcDNA3s的大肠杆菌,提取pcDNA3s质粒,利用电转化方法将pcD-NA3s质粒转化到感受态减毒鼠伤寒沙门氏菌,SDS-PAPG检测到930 bp大小的条带,基因序列分析到重组菌含有乙肝表面抗原(HBsAg)基因序列;观察重组菌体外传代培养的... 采用大量培养含有pcDNA3s的大肠杆菌,提取pcDNA3s质粒,利用电转化方法将pcD-NA3s质粒转化到感受态减毒鼠伤寒沙门氏菌,SDS-PAPG检测到930 bp大小的条带,基因序列分析到重组菌含有乙肝表面抗原(HBsAg)基因序列;观察重组菌体外传代培养的稳定性,该重组菌株在体外能稳定地繁殖、生长和传代。试验结果表明,携带HBsAg的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌疫苗X8786/pcDNA3s已成功构建,为研究和应用人和动物治疗用乙型肝炎病毒口服基因工程活疫苗奠定了基础。 展开更多

关键词 重组减毒鼠伤寒沙门氏菌 电转化 乙肝表面抗原 SDS—PAPG 基因序列分析

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以减毒鼠伤寒沙门氏菌为载体的重组NDV-HN口服疫苗的构建与鉴定 被引量：5

4

作者 田芳华 程相朝 +3 位作者 张春杰 李银聚 李静 刘一尘 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第11期59-63,共5页

试验旨在构建表达鸡新城疫病毒(NDV)HN基因的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌SL1344ΔcrpΔasd(pYA3493-HN)。以pMD18-T-HN为模板,通过PCR扩增出NDV HN基因片段,定向插入原核表达载体pYA3493中,将重组表达质粒pYA3493-HN转入χ6097,再转入减毒... 试验旨在构建表达鸡新城疫病毒(NDV)HN基因的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌SL1344ΔcrpΔasd(pYA3493-HN)。以pMD18-T-HN为模板,通过PCR扩增出NDV HN基因片段,定向插入原核表达载体pYA3493中,将重组表达质粒pYA3493-HN转入χ6097,再转入减毒鼠伤寒沙门氏菌SL1344ΔcrpΔasd,通过双酶切和PCR对质粒进行鉴定。结果表明,携带NDV HN基因片段的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌SL1344ΔcrpΔasd(pYA3493-HN)构建成功。本研究结果为开发鸡新城疫的口服基因工程活载体疫苗奠定了基础。 展开更多

关键词 新城疫 HN基因 原核表达载体pYA3493 减毒鼠伤寒沙门氏菌

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携带pEGFPC3的减毒鼠伤寒沙门氏菌在雏鸡体内的表达

5

作者 方希修 王冬梅 +3 位作者 杨晓志 管军军 孙进 乐国伟 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期403-407,共5页

构建了重组减毒鼠伤寒沙门氏菌SL8786/pEGFP-C3,检测了PEGFP-C3在雏鸡体内荧光表达。将重组减毒鼠伤寒沙门菌SL8786/pEGFP-C3分别灌胃饲服3日龄雏鸡,结果表明,在体外稳定试验中,重组菌经LB固体及液体培养基连续传20代后,单个菌落和菌液... 构建了重组减毒鼠伤寒沙门氏菌SL8786/pEGFP-C3,检测了PEGFP-C3在雏鸡体内荧光表达。将重组减毒鼠伤寒沙门菌SL8786/pEGFP-C3分别灌胃饲服3日龄雏鸡,结果表明,在体外稳定试验中,重组菌经LB固体及液体培养基连续传20代后,单个菌落和菌液均呈淡绿色。流式细胞仪结果证实,减毒鼠伤寒沙门菌可以将pEGFP-C3转入脾脏细胞,并在其中表达。在体内稳定试验中,经雏鸡连续传代12次,从肝脏、脾脏中分离的细菌经LB固体培养仍为绿色,证明构建的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌是稳定的。用免疫剂量的重组细菌接种雏鸡后,观察1个月未见有异常现象,同时剖检后也未见脏器有眼观病变。免疫一定时间后,在雏鸡肝脏、脾脏、肾脏、胸腺、十二指肠、肌肉等组织有荧光表达。表达PEGFP-C3的重组鼠伤寒沙门氏菌在鸡体产生荧光表达,为减毒沙门氏菌作为活载体的基因工程疫苗研制提供一个优良模型。 展开更多

关键词 增强型绿色荧光蛋白C3(EGFP—C3) 重组减毒鼠伤寒沙门氏菌 荧光表达

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鸽源鼠伤寒沙门氏菌的分离鉴定及耐药与毒力基因检测 被引量：5

6

作者 陆凡 王鹏 +6 位作者 刘林敏 黄振兴 张明霞 杜文珍 吴颖臻 韦平 韦天超 《动物医学进展》 北大核心 2024年第1期36-43,共8页

旨在鉴定广西某鸽场分两批送检的疑似鸽副伤寒病例的病原并对病原菌的耐药性和毒力基因进行检测分析;对从病鸽肝脏组织分离的病原菌进行培养特性观察、生化鉴定、血清型鉴定及16S rRNA测序分析,并通过药敏试验、耐药基因和毒力基因检测... 旨在鉴定广西某鸽场分两批送检的疑似鸽副伤寒病例的病原并对病原菌的耐药性和毒力基因进行检测分析;对从病鸽肝脏组织分离的病原菌进行培养特性观察、生化鉴定、血清型鉴定及16S rRNA测序分析,并通过药敏试验、耐药基因和毒力基因检测对分离菌株进行耐药性和毒力分析。分离到2株革兰氏阴性短杆菌,结合生化鉴定、血清型鉴定和16S rRNA分析结果,表明2株分离菌株均为鼠伤寒沙门氏菌。药敏试验结果表明,2株鼠伤寒沙门氏菌均对萘啶酸、链霉素和四环素耐药,并呈现多重耐药表型,耐药基因检测结果与耐药表型相符。2株鼠伤寒沙门氏菌中invA等12种毒力基因检测呈阳性。结果表明,成功分离鉴定2株具有多重耐药性并携带大量毒力基因的鸽源鼠伤寒沙门氏菌,可为鸽源鼠伤寒沙门氏菌的防治和研究提供参考。 展开更多

关键词 鸽 鼠伤寒沙门氏菌 分离鉴定 多重耐药性 毒力基因

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表达猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白减毒鼠伤寒沙门氏菌疫苗株的构建及动物免疫试验 被引量：7

7

作者 许信刚 赵红妮 童德文 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期955-962,共8页

本试验旨在构建表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP5蛋白的口服重组减毒鼠伤寒沙门氏菌活载体疫苗株。PCR克隆除去信号肽序列的PRRSV ORF5基因,将其插入到表达载体pYA3341中,构建重组质粒pYA3341-ORF5。将重组质粒电转入鼠伤寒沙门氏... 本试验旨在构建表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP5蛋白的口服重组减毒鼠伤寒沙门氏菌活载体疫苗株。PCR克隆除去信号肽序列的PRRSV ORF5基因,将其插入到表达载体pYA3341中,构建重组质粒pYA3341-ORF5。将重组质粒电转入鼠伤寒沙门氏菌疫苗株X4550(缺失Asd、Cya、Crp基因),获得重组疫苗菌株X4550(pYA3341-ORF5)。鉴定重组菌GP5蛋白的表达;测定重组菌定居特性及安全性;检测免疫小鼠血清抗体;流式细胞仪检测重组菌对小鼠T淋巴细胞CD4+和CD8+亚群的影响;最后进行免疫猪血清抗体检测。结果表明,酶切鉴定证实重组质粒构建成功;Western blot证实重组菌表达的GP5蛋白能与PRRSV阳性血清特异性结合;重组菌在体内可较稳定地定居于小鼠的肠系膜淋巴结和脾脏中,并在其中表达出GP5蛋白;小鼠口服试验证实重组菌无毒性作用;重组菌口服免疫小鼠可以产生抗GP5蛋白抗体且抗体具有中和活性;重组菌株能不同程度地使CD4+、CD4+/CD8+升高,而使CD8+下降,表明重组菌对细胞免疫功能具有调节作用;淋巴细胞增殖试验表明,重组菌能诱发小鼠产生较强的细胞免疫应答;重组菌口服免疫猪可以产生抗GP5蛋白抗体。本试验成功构建了能稳定表达PRRSV GP5蛋白的口服减毒鼠伤寒沙门氏菌疫苗株,为研究PRRSV口服基因工程疫苗奠定基础。 展开更多

关键词 减毒鼠伤寒沙门氏菌 PRRSV GP5蛋白 活载体疫苗

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减毒鼠伤寒沙门氏菌载体在兽用疫苗中的运用 被引量：3

8

作者 訾占超 石佩 +2 位作者 陈瑞 熊惠军 宋立 《中国兽药杂志》 2009年第5期33-39,共7页

减毒鼠伤寒沙门氏菌可以作为重组疫苗研究中真核表达载体。其原理是将免疫原基因片段连接到某种真核质粒中,然后将质粒导入减毒鼠伤寒沙门氏菌,构建针对该特异病原的重组活疫苗。本文介绍了减毒鼠伤寒沙门氏菌作为DNA载体,在动物细菌、... 减毒鼠伤寒沙门氏菌可以作为重组疫苗研究中真核表达载体。其原理是将免疫原基因片段连接到某种真核质粒中,然后将质粒导入减毒鼠伤寒沙门氏菌,构建针对该特异病原的重组活疫苗。本文介绍了减毒鼠伤寒沙门氏菌作为DNA载体,在动物细菌、病毒和支原体重组活疫苗中的最新运用成果,为兽用的重组DNA疫苗的研究提供参考。 展开更多

关键词 减毒沙门氏菌 载体 重组疫苗

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鼠伤寒沙门氏菌CRISPR/Cas12a检测方法的建立与应用 被引量：1

9

作者 李丹 袁梦君 +3 位作者 王旭 李文豪 张鸿雁 王恬 《食品安全质量检测学报》 CAS 2024年第12期143-150,共8页

目的建立快速、超灵敏检测食品中鼠伤寒沙门氏菌的方法。方法根据鼠伤寒沙门氏菌fliC基因保守片段设计并合成特异性CRISPR RNA(crRNA),并根据crRNA所在的基因序列区域设计重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)... 目的建立快速、超灵敏检测食品中鼠伤寒沙门氏菌的方法。方法根据鼠伤寒沙门氏菌fliC基因保守片段设计并合成特异性CRISPR RNA(crRNA),并根据crRNA所在的基因序列区域设计重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)特异性引物,利用RPA技术扩增样本核酸,并对扩增产物进行CRISPR/Cas12a荧光检测。结果该检测方法克服了传统鼠伤寒沙门氏菌检测方法的缺陷,耗时短且具有较高的灵敏度,对鼠伤寒沙门氏菌的检出限低至1copy/μL,与乙型副伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、单增李斯特菌、阪崎肠杆菌、大肠埃希氏菌等常见食源性致病菌核酸检测无交叉反应,且建立的方法在检测人工污染的食品样品时具有较高的灵敏度和准确性。结论本研究建立的检测方法耗时短、灵敏度高,可用于鼠伤寒沙门氏菌的快速检测。 展开更多

关键词 CRISPR/Cas12a 重组酶聚合酶扩增 鼠伤寒沙门氏菌 快速检测

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减毒鼠伤寒沙门菌活疫苗载体研究进展 被引量：4

10

作者 杨冬梅 王鹏雁 +1 位作者 王远志 陈创夫 《动物医学进展》 CSCD 2007年第4期85-88,共4页

活载体疫苗技术的发展促使产生了更多的疫苗设计新思路。沙门菌是一种肠道细菌,目前已通过基因突变的方法构建了许多种减毒株,如GID101、GID105、X4064、ZJⅢ、Ty800、X4632、X4550、X4072和X3730等,这些减毒株被突变掉了两个或两个以... 活载体疫苗技术的发展促使产生了更多的疫苗设计新思路。沙门菌是一种肠道细菌,目前已通过基因突变的方法构建了许多种减毒株,如GID101、GID105、X4064、ZJⅢ、Ty800、X4632、X4550、X4072和X3730等,这些减毒株被突变掉了两个或两个以上的基因,然而其基因型和血清型仍很稳定,所以人们常将其用作基因疫苗的表达载体或运送载体。现在已有许多种细菌、病毒和寄生虫的减毒沙门菌活载体疫苗被研制成功。文章对沙门菌的减毒方法,减毒沙门菌的免疫机理以及其用途和作为疫苗载体的优缺点做了简述。 展开更多

关键词 鼠伤寒沙门菌 活载体疫苗 重组减毒沙门菌 基因减毒

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三株递呈猪流行性腹泻病毒S基因的减毒鼠伤寒沙门菌的生物学特性研究

11

作者 梁恩涛 陈杰 +4 位作者 黄小波 文心田 曹三杰 吴学婧 朱书权 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期279-287,共9页

为了探究减毒沙门菌递呈不同长度猪流行性腹泻病毒(PEDV)S基因的可行性,本研究对3株携带不同长度S基因片段的减毒鼠伤寒沙门菌进行了生物学特性评估。主要进行了对所构建的重组减毒沙门菌菌株SL7207(pVAX-S499-650)(长456bp,编码S蛋白N... 为了探究减毒沙门菌递呈不同长度猪流行性腹泻病毒(PEDV)S基因的可行性,本研究对3株携带不同长度S基因片段的减毒鼠伤寒沙门菌进行了生物学特性评估。主要进行了对所构建的重组减毒沙门菌菌株SL7207(pVAX-S499-650)(长456bp,编码S蛋白N末端499—650位氨基酸)、SL7207(pVAX-S499-789)(长873bp,编码S蛋白N末端499—789位氨基酸)和前期构建的菌株SL7207(pVAXD-S1-789)(长2 367bp,编码S蛋白N末端1—789位氨基酸)的生物学特性研究,包括生长曲线测定、携带质粒的体内/外稳定性、回肠组织内的转录、在小鼠体内动态增殖规律、小鼠口服的安全性等。结果表明:SL7207(pVAX-S499-650)、SL7207(pVAX-S499-789)、SL7207(pVAXDS1-789)3种口服菌株均具有较高的稳定性;携带的目的基因可在肠道组织内转录;菌株在小鼠肝、脾中增殖约5周后逐渐被机体清除;小鼠口服具有良好的安全性。本研究结果表明减毒鼠伤寒沙门菌SL7207可递呈不同长度的S基因抗原片段,为后续开展3种菌株的实际口服免疫效果比较研究奠定了基础。 展开更多

关键词 猪流行性腹泻病毒 S基因 减毒鼠伤寒沙门菌 口服 生物学特性

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1株信鸽源鼠伤寒沙门氏菌的分离鉴定及其耐药性和毒力分析 被引量：9

12

作者 张启龙 栗云鹏 +6 位作者 傅彩霞 刘海莹 张玮 王林 吴迪 刘晓冬 周德刚 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第1期338-347,共10页

本试验旨在鉴定临床疑似沙门氏菌感染致死信鸽的病原菌并确定致病菌的耐药及毒力状况。通过细菌分离培养、菌落形态观察、染色镜检、生化鉴定、血清分型、16S rRNA基因测序分析和康复信鸽血清平板凝集试验进行鉴定,并通过药敏试验、耐... 本试验旨在鉴定临床疑似沙门氏菌感染致死信鸽的病原菌并确定致病菌的耐药及毒力状况。通过细菌分离培养、菌落形态观察、染色镜检、生化鉴定、血清分型、16S rRNA基因测序分析和康复信鸽血清平板凝集试验进行鉴定,并通过药敏试验、耐药基因和毒力基因检测进行耐药性和毒力分析。结果显示,分离纯化的细菌在BS、XLD、HE培养基上为黑色菌落,镜检为无荚膜、无芽孢的革兰氏阴性短杆菌;分离菌株生化反应结果符合沙门氏菌生化特性;分离菌株血清型为1,4,12:i:1,2;分离菌株16S rRNA基因序列系统进化树分析显示,该分离菌株与鼠伤寒沙门氏菌聚为一支,同源性>99%,康复信鸽血清与分离菌株发生特异性凝集,结合生化反应和血清分型结果该菌株鉴定为鼠伤寒沙门氏菌;分离菌株对氟苯尼考耐药,经耐药基因检测携带floR、cmlA氯霉素类耐药基因,与耐药表型相符;分离菌株mogA等17种毒力基因检测均为阳性。本试验成功分离到1株信鸽源鼠伤寒沙门氏菌,分离菌株对氟苯尼考耐药且具有较强毒力,为下一步信鸽沙门氏菌的防治和研究提供了参考依据。 展开更多

关键词 信鸽 鼠伤寒沙门氏菌 分离 鉴定 耐药性 毒力

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携带DEV-gB基因重组质粒减毒沙门氏菌在鸭免疫器官中的表达动态

13

作者 刘妍罕 王相金 +5 位作者 胡安东 曾茂芹 杨颖 温贵兰 程振涛 文明 《山地农业生物学报》 2021年第6期37-43,共7页

为明确含DEV-gB基因重组减毒沙门氏菌在鸭免疫器官中的分布动态,本研究将重组减毒沙门氏菌口服接种鸭(即重组细菌组),同时设立重组质粒组、弱毒疫苗组和空白对照组,于免疫后第7、14、21、28、35、42和49天时,捕杀试验鸭,采集鸭脾脏、胸... 为明确含DEV-gB基因重组减毒沙门氏菌在鸭免疫器官中的分布动态,本研究将重组减毒沙门氏菌口服接种鸭(即重组细菌组),同时设立重组质粒组、弱毒疫苗组和空白对照组,于免疫后第7、14、21、28、35、42和49天时,捕杀试验鸭,采集鸭脾脏、胸腺、法氏囊和哈德氏腺等免疫器官,采用间接免疫荧光法进行DEV-gB抗原检测观察,结果显示:空白对照组鸭免疫器官在7个时间点均未检测到DEV-gB抗原信号;免疫后,重组细菌组、弱毒疫苗组和重组质粒组鸭免疫器官均能检测到DEV抗原阳性信号,但含DEV抗原阳性信号细胞数量从多到少的组别顺序是弱毒疫苗组、重组细菌组和重组质粒组,且重组细菌组与弱毒疫苗组差异不显著(P>0.05);检出含DEV抗原阳性信号的免疫器官先后顺序是脾脏、法氏囊、哈德氏腺和胸腺,而含DEV抗原阳性信号细胞数量从多到少的免疫器官顺序是脾脏、法氏囊、胸腺和哈德氏腺。由此可见,本研究构建的携带DEV-gB基因重组减毒沙门氏菌能在鸭免疫器官中得到良好的表达,为该重组细菌疫苗的临床应用奠定了理论基础。 展开更多

关键词 DEV 重组减毒沙门氏菌 鸭 表达动态

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A型、C型肉毒毒素对鼠伤寒沙门氏菌的诱变性研究

14

作者 李家存 孙文清 《中国兽药杂志》 2006年第12期31-33,共3页

应用鼠伤寒沙门氏菌4种组氨酸缺陷型菌株TA97、TA98、TA100、TA102的诱变试验来研究A型、C型肉毒毒素的诱变作用。A型、C型肉毒毒素通过点试法、渗入法(-S9和+S9)及液体预保温培养法检测,结果均为阴性,说明A型、C型肉毒毒素对原核细胞... 应用鼠伤寒沙门氏菌4种组氨酸缺陷型菌株TA97、TA98、TA100、TA102的诱变试验来研究A型、C型肉毒毒素的诱变作用。A型、C型肉毒毒素通过点试法、渗入法(-S9和+S9)及液体预保温培养法检测,结果均为阴性,说明A型、C型肉毒毒素对原核细胞无诱变性。 展开更多

关键词 A型 C型肉毒毒素 鼠伤寒沙门氏菌 诱变

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减毒沙门氏菌作为原核表达宿主菌和真核表达载体的研究(英文) 被引量：4

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作者 迪卡 陈雪燕 +2 位作者 帅江冰 陈宁 方维焕 《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期237-244,共8页

本研究以增强型绿色荧光蛋白(eGFP)为报告基因,探讨了减毒沙门氏菌作为原核表达宿主菌和真核表达载体的可行性.通过多功能分光光度仪测定细菌的OD600和eGFP在大肠杆菌和减毒沙门氏菌中的表达量,结果表明:eGFP在沙门氏菌中的表达量依赖于... 本研究以增强型绿色荧光蛋白(eGFP)为报告基因,探讨了减毒沙门氏菌作为原核表达宿主菌和真核表达载体的可行性.通过多功能分光光度仪测定细菌的OD600和eGFP在大肠杆菌和减毒沙门氏菌中的表达量,结果表明:eGFP在沙门氏菌中的表达量依赖于IPTG的浓度,最佳浓度为0.5 mmol?L-1,增加浓度至0.75 mmol?L-1不能增加eGFP的表达量;而该现象在大肠杆菌中不明显.当IPTG浓度等于或大于0.5 mmol?L-1时,沙门氏菌中eGFP的表达量显著高于大肠杆菌.若以相对荧光度(1个OD600单位的荧光值,即eGFP相对表达量)表示,两种宿主菌的最佳诱导时间均为3 h.Hela细胞侵袭力试验表明该减毒沙门氏菌仍具有侵袭力,同时以脂质体转染为对照,将携带重组质粒pcDNA3-eGFP的减毒沙门氏菌转染Hela细胞,48 h后可观察到绿色荧光,表明了该菌可作为载体将重组质粒携带到细胞内,并使外源基因得到表达.此外,利用基于微孔板的多功能分光光度仪可直接检测荧光强度和OD值,能快速、准确地进行多样本检测,可用于GFP在不同宿主菌或相同宿主菌在不同试验条件下,甚至不同表达载体在相同宿主菌中表达等方面的研究. 展开更多

关键词 减毒鼠伤寒沙门氏菌 大肠杆菌 重组质粒 增强型绿色荧光蛋白

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通过疫苗接种控制禽群的沙门氏菌病 被引量：1

16

作者 肖昌 陈琳 +1 位作者 Daniel Windhorst 孙建和 《国外畜牧学（猪与禽）》 2015年第3期53-56,共4页

食源性感染肠炎沙门氏菌（Salmonella enteritidis）和鼠伤寒沙门氏菌（S.Typhimuriun）会引发严重的公共卫生问题。在与沙门氏菌感染斗争10多年后,该菌仍是导致人类发生食物中毒的重要病原之一。最近的研究估计,全世界每年大约发生8 03... 食源性感染肠炎沙门氏菌（Salmonella enteritidis）和鼠伤寒沙门氏菌（S.Typhimuriun）会引发严重的公共卫生问题。在与沙门氏菌感染斗争10多年后,该菌仍是导致人类发生食物中毒的重要病原之一。最近的研究估计,全世界每年大约发生8 030万例与沙门氏菌感染有关的食源性疾病。在欧盟,沙门氏菌是继弯曲杆菌之后的第二种最重要的食源性感染病原（图1）。禽肉和禽蛋是全球许多地方质优价廉能量蛋白的主要来源,但它们被认为是人类感染沙门氏菌的主要原因。 展开更多

关键词 沙门氏菌感染 食源性感染 鼠伤寒沙门氏菌 疫苗接种 食源性疾病 类感染 弯曲杆菌 肠炎沙门氏菌 SALMONELLA 减毒活疫苗

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结核分支杆菌重组活疫苗研究进展 被引量：1

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作者 李文桂 陈雅棠 《动物医学进展》 CSCD 2005年第2期1-5,共5页

结核分支杆菌(MTB)引起的结核病 是一种人兽共患的慢性传染病,短程督导化 疗是治疗该病的主要措施,卡介苗是预防该 病的惟一疫苗,但其免疫效果极不稳定。分 子生物学技术的发展为研制新型MTB疫苗 提供了理想方法,人们利用鼠伤寒沙门氏菌... 结核分支杆菌(MTB)引起的结核病 是一种人兽共患的慢性传染病,短程督导化 疗是治疗该病的主要措施,卡介苗是预防该 病的惟一疫苗,但其免疫效果极不稳定。分 子生物学技术的发展为研制新型MTB疫苗 提供了理想方法,人们利用鼠伤寒沙门氏菌 (Salmonellatyphimurium,St)减毒株作为 载体,将编码MTB保护性抗原的基因导入其 中,可构建重组St疫苗,如rSt Ag85B疫苗 和rSt ESAT 6疫苗;将编码MTB保护性抗 原的基因导入小鼠巨噬细胞或骨髓细胞可构 建MTB活细胞疫苗,如J774 HSP65疫苗和 BMC HSP65疫苗;利用基因诱变可构建 MTB减毒活疫苗,如MTB嘌呤营养缺陷株, ICL基因剔除株,VitB5营养缺陷株和十一萜 醇激酶基因变异株。文章介绍了结核分支杆 菌重组鼠伤寒沙门氏菌疫苗,活细胞疫苗和 减毒活疫苗的构建及其免疫机制等方面的研 究进展。 展开更多

关键词 结核分支杆菌 重组鼠伤寒沙门氏菌疫苗 活细胞疫苗 减毒活疫苗

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病原细菌

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《国外科技资料目录（医药卫生）》 CAS 2002年第8期17-21,共5页

0227860 齿龈紫色单胞菌的重组和固有毒力标记物的随机分布的证据/Frandsen EV//Infect Immnu.-2001,69(7).-4479～4485 医科图0227861

关键词 医科 金黄色葡萄球菌 突变体 纤连蛋白结合蛋白 单胞菌 致病性大肠杆菌 鼠伤寒沙门氏菌 毒力 氧化性应激 出血性大肠杆菌

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