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重组人肝再生增强因子对5/6肾切除大鼠肾组织MMP-9、TIMP-1及Collgen-Ⅳ表达的影响 被引量：2
1
作者 迟雁青 王学敏 +6 位作者 郭珊珊 林海英 张涛 王秀芬 丁芳 刘茂东 李英 《山东医药》 CAS 2012年第8期55-56,59,共3页
目的探讨重组人肝再生增强因子(rhALR)是否可以通过影响基质金属蛋白酶9(MMP-9)、基质金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)及Ⅳ型胶原(Collgen-Ⅳ)的表达,来延缓肾小球硬化。方法雄性SD大鼠分为假手术组、对照组及rhALR组,以rhALR对5/6肾... 目的探讨重组人肝再生增强因子(rhALR)是否可以通过影响基质金属蛋白酶9(MMP-9)、基质金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)及Ⅳ型胶原(Collgen-Ⅳ)的表达,来延缓肾小球硬化。方法雄性SD大鼠分为假手术组、对照组及rhALR组,以rhALR对5/6肾切除所致慢性肾衰竭大鼠进行干预。结果与假手术组比较,对照组肾小球硬化指数增大,Collgen-Ⅳ、TIMP-1表达增加,MMP-9表达减少(P均<0.05);外源性给予rhALR能降低TIMP-1表达,增加MMP-9表达,减轻Collgen-Ⅳ的沉积,改善肾小球硬化(P均<0.05)。结论 rhALR可通过上调MMP-9/TIMP-1比例减少Collgen-Ⅳ积聚而改善肾小球硬化,保护残肾功能。 展开更多
关键词 重组人肝再生增强因子 基质金属蛋白酶-9 金属蛋白酶组织抑制因子-1 Ⅳ型胶原 肾小球硬化
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重组肝再生增强因子对5/6肾切除大鼠模型肾性贫血的影响 被引量：2
2
作者 王学敏 林海英 《中国中西医结合肾病杂志》 2010年第1期52-53,共2页
目的:探讨重组人肝再生增强因子(rhALR)对5/6肾切除所致慢性肾衰竭大鼠肾性贫血的影响。方法:将雄性SD大鼠随机分为假手术组、对照组及rhALR组。对照组及rhALR组大鼠行5/6肾切除,术后12周慢性肾衰竭大鼠模型成功,以rhALR对rhALR组大鼠... 目的:探讨重组人肝再生增强因子(rhALR)对5/6肾切除所致慢性肾衰竭大鼠肾性贫血的影响。方法:将雄性SD大鼠随机分为假手术组、对照组及rhALR组。对照组及rhALR组大鼠行5/6肾切除,术后12周慢性肾衰竭大鼠模型成功,以rhALR对rhALR组大鼠进行治疗,用药1周,于用药结束后24 h比较各组大鼠血常规、血清尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)、血清铁、血清促红细胞生成素(EPO)等各项指标。结果:rhALR能升高5/6肾切除肾衰竭大鼠血红蛋白(Hb)、红细胞计数(RBC)、红细胞压积(HCT)、EPO水平,降低肾衰竭大鼠血中Scr及BUN水平。与对照组相比差异有统计学意义。结论:rhALR可有效改善5/6肾切除所致慢性肾衰竭肾性贫血,升高血中Hb、RBC、HCT、EPO水平,并对肾功能有保护作用。 展开更多
关键词 重组肝再生增强因子 慢性肾衰竭 肾性贫血
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肝再生增强因子促进HepG2细胞增殖对细胞Na^+,K^+ATP酶的影响(英文)
3
作者 林莹 佟明华 +1 位作者 孔祥平 梁世中 《陕西科技大学学报（自然科学版）》 2006年第2期26-30,共5页
为了研究rhALR在促进HepG2细胞增殖过程中对细胞Na+,K+ATPase的影响,采用四甲基噻唑盐(MTT)法检验了重组人肝再生增强因子(rhALR)对HepG2细胞的增殖作用并用无机磷比色法测定了细胞Na+,K+ATPase的酶活力。结果显示:rhALR能以浓度依赖的... 为了研究rhALR在促进HepG2细胞增殖过程中对细胞Na+,K+ATPase的影响,采用四甲基噻唑盐(MTT)法检验了重组人肝再生增强因子(rhALR)对HepG2细胞的增殖作用并用无机磷比色法测定了细胞Na+,K+ATPase的酶活力。结果显示:rhALR能以浓度依赖的方式促进HepG2的细胞增殖,对细胞Na+,K+ATPase的酶活呈剂量时间依赖型影响;rhALR提高HepG2细胞Na+,K+ATPase的酶活符合MichaelisMenten方程作用机制,Vmax由0.84±0.11μmol·mg-1·min-1上升到1.68±0.07μmol·mg-1·min-1(p<0.01,差异有极显著性),而Km则由23.54±0.12mM变为20.86±0.13mM(p>0.05,差异无显著性),rhALR提高了细胞Na+,K+ATPase的转化效率;Na+,K+ATPase的专一性抑制剂(奎巴因)可以抑制rhALR促进HepG2细胞增殖的作用;ALR能以浓度时间依赖的方式激活细胞的Na+,K+ATPase,ALR引发的细胞增殖与了Na+,K+ATPase的活化有关。该为进一步研究rhALR的生物学功能提供了理论依据。 展开更多
关键词 重组人肝再生增强因子(rh- ALR) Na^+ K^+-ATPase 酶活 剂量-时间依赖
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人肝再生增强因子基因慢病毒表达载体的构建与鉴定 被引量：1
4
作者 薛峰 王伯庆 +1 位作者 尹继炜 易超 《成都医学院学报》 CAS 2015年第4期393-396,409,共5页
目的构建携带人肝再生增强因子(augmenter of liver regeneration,ALR)基因的慢病毒表达载体,并验证其安全性与有效性。方法将以人胎肝cDNA为模板扩增得到的ALR与pLenti6/V5-D-TOPO重组慢病毒载体连接后,与慢病毒包装体系ViraPowerTMPac... 目的构建携带人肝再生增强因子(augmenter of liver regeneration,ALR)基因的慢病毒表达载体,并验证其安全性与有效性。方法将以人胎肝cDNA为模板扩增得到的ALR与pLenti6/V5-D-TOPO重组慢病毒载体连接后,与慢病毒包装体系ViraPowerTMPackaging Mix共转染293T细胞,得到携带人ALR基因的慢病毒表达载体病毒颗粒,实时定量PCR法测定病毒滴度;转染BLR 3A大鼠肝细胞,观察细胞生长情况,并用RT-PCR法测定ALR基因表达的方法,验证构建的慢病毒载体的安全性与有效性。结果扩增产物凝胶电泳、提抽质粒酶切电泳及基因测序结果均显示成功构建携带ALR基因的慢病毒表达载体,测得其病毒滴度为1.48×107 v.p./mL。转染BLR 3A大鼠肝细胞72h后,仅少量细胞病变脱离,转染率为88.49%;RT-PCR结果显示,构建的携带ALR慢病毒表达载体可诱导BLR 3A大鼠肝细胞表达ALR基因。结论慢病毒表达载体是一种兼具有效性与安全性,且适用于基因研究的病毒表达载体。 展开更多
关键词 肝再生增强因子 慢病毒表达载体 BLR 3A 大鼠肝细胞 基因重组技术
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肝再生增强因子在肾间质纤维化中的研究进展 被引量：3
5
作者 李红娟 孟祥娟 +1 位作者 崔玉杰 安惠霞 《中国中西医结合肾病杂志》 2015年第12期1126-1128,共3页
肾纤维化,尤其是肾小管间质纤维化（RIF）是各种肾脏疾病发展致肾衰竭的共同途径[1],其病变的程度与肾功能的损害程度密切相关。肾间质纤维化是一个缓慢的动态过程,涉及到各种细胞因子的释放、炎症细胞的浸润、肾小管上皮细胞-间充质细... 肾纤维化,尤其是肾小管间质纤维化（RIF）是各种肾脏疾病发展致肾衰竭的共同途径[1],其病变的程度与肾功能的损害程度密切相关。肾间质纤维化是一个缓慢的动态过程,涉及到各种细胞因子的释放、炎症细胞的浸润、肾小管上皮细胞-间充质细胞转分化（EMT）、肾小管上皮细胞（RTEC）的凋亡、细胞外基质的过度积聚及降解失衡等因素。近年来,随着对肾间质纤维化的深入研究, 展开更多
关键词 肾间质纤维化 肾小管上皮细胞 肝再生 肾脏疾病 转分化 细胞外基质 细胞因子 炎症细胞 间充质细胞 增强因子
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肝再生增强因子对HepG2细胞Na^+,K^+-ATP酶的影响
6
作者 林莹 佟明华 +1 位作者 孔祥平 梁世中 《华南理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第5期58-62,共5页
用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检验重组肝再生增强因子(ALR)对人肝母细胞瘤细胞系(HepG2)细胞的增殖作用,无机磷比色法测定细胞Na,+K+-ATP酶的酶活,蛋白质免疫印迹分析Na+,K+-ATP酶的磷酸化情况.体外实验结果表明,重组ALR能促进HepG2... 用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检验重组肝再生增强因子(ALR)对人肝母细胞瘤细胞系(HepG2)细胞的增殖作用,无机磷比色法测定细胞Na,+K+-ATP酶的酶活,蛋白质免疫印迹分析Na+,K+-ATP酶的磷酸化情况.体外实验结果表明,重组ALR能促进HepG2细胞增殖.ALR可提高HepG2细胞Na,+K+-ATP酶酶活,符合M ichaelis-M enten方程作用机制,ALR提高了细胞Na,+K+-ATP酶的转化效率,vm ax由(0.84±0.11)μmol/(mg.m in)上升到(1.68±0.07)μmol/(mg.m in)(P<0.01,差异极显著),而Km则由(23.54±0.12)mmol/L变为(20.86±0.13)mmol/L(P>0.05,差异无显著性).丝氨酸/苏氨酸残基磷酸化是酶活提高的关键因素.蛋白质免疫印迹分析也证实:ALR对Na,+K+-ATP酶磷酸化的影响属于剂量-时间依赖型. 展开更多
关键词 肝再生 增强因子 NA^+ K^+-ATP酶 转化效率 剂量-时间依赖
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人肝再生增强因子和荧光蛋白基因在绵羊成纤维细胞中的表达
7
作者 扈会平 马玉珍 扈廷茂 《北方药学》 2007年第6期35-36,共2页
本实验利用LipofectAMINETM介导pEGFP/ALR载体转染sFFCs,经G418筛选,10d后共形成38个单克隆细胞,细胞用于提取蛋白进行聚丙烯酰胺凝胶电泳及免疫组化检测。结果表明:3个荧光单克隆细胞,聚丙烯酰胺凝胶电泳可见与预期相符的57KD大小的融... 本实验利用LipofectAMINETM介导pEGFP/ALR载体转染sFFCs,经G418筛选,10d后共形成38个单克隆细胞,细胞用于提取蛋白进行聚丙烯酰胺凝胶电泳及免疫组化检测。结果表明:3个荧光单克隆细胞,聚丙烯酰胺凝胶电泳可见与预期相符的57KD大小的融合蛋白,免疫组化检测可见ALR蛋白分布于sFFCs胞质和胞核,且细胞核含量多于细胞质。 展开更多
关键词 人肝再生增强因子 EGFP 成纤维细胞 表达
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肝再生增强因子对肾间质纤维化发病的干预作用机制及其治疗应用研究进展
8
作者 于琼 蒲涛 于泓 《山东医药》 CAS 2022年第8期86-89,共4页
肾间质纤维化是慢性肾脏病发生发展过程中的重要病理特征之一。在肾损伤的过程中,分布于肾脏细胞内的肝再生增强因子表达上调,通过免疫调控、提高氧化酸化能力和巯基氧化酶等作用参与肾损伤调控。肝再生增强因子可从抗肾小管细胞凋亡、... 肾间质纤维化是慢性肾脏病发生发展过程中的重要病理特征之一。在肾损伤的过程中,分布于肾脏细胞内的肝再生增强因子表达上调,通过免疫调控、提高氧化酸化能力和巯基氧化酶等作用参与肾损伤调控。肝再生增强因子可从抗肾小管细胞凋亡、抑制转化生长因子β信号通路、抑制细胞外基质合成、刺激细胞外基质降解、阻断信号通路及抑制炎症反应等多个方面干预肾间质纤维化的发生发展,保护肾脏功能。肝再生增强因子有望成为预防和减轻肾间质纤维化损伤的作用靶点。 展开更多
关键词 肝再生增强因子 肾间质纤维化 转化生长因子Β 细胞外基质 炎症反应
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筛选hALR的相互作用蛋白基因(英) 被引量：3
9
作者 陈思强 姚汝华 +1 位作者 佟明华 孔祥平 《华南理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第4期17-22,共6页
为筛选与人肝再生增强因子(hALR)相互作用蛋白的基因,探讨肝再生增强因子在肝再生过程中的分子生物学机制,将人肝再生增强因子基因的开放读码框片断,重组入载体pGBKT7构建成“诱饵”质粒pGBKT7-hALR,然后用酵母双杂交系统从预转化酵母菌... 为筛选与人肝再生增强因子(hALR)相互作用蛋白的基因,探讨肝再生增强因子在肝再生过程中的分子生物学机制,将人肝再生增强因子基因的开放读码框片断,重组入载体pGBKT7构建成“诱饵”质粒pGBKT7-hALR,然后用酵母双杂交系统从预转化酵母菌Y187的成人肝细胞cDNA文库中筛选与人肝再生增强因子相互作用蛋白的基因.筛出的阳性克隆基因序列被测出后,经GenBank查询,结果发现它们分别是血清白蛋白、金属硫蛋白、硒蛋白类似物、Na+/K+ ATPase和一个未知功能的蛋白的部分序列.这初步克隆了与hALR相互作用的蛋白基因,为进一步探讨ALR在肝再生过程中的作用机制奠定了基础. 展开更多
关键词 酵母双杂交系统 人肝再生增强因子 hALR 相互作用蛋白 基因筛选 分子生物学 作用机制
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ALR siRNA慢病毒载体最佳干扰序列的筛选及构建
10
作者 郭虹利 吴传新 +3 位作者 郭晖 刘杞 杨超 孙航 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期267-271,共5页
目的筛选并构建肝再生增强因子(ALR)基因的最佳RNA干扰(RNA interference,RNAi)慢病毒表达载体,为研究ALR基因表达下调后对肝癌细胞生物学特性的影响提供依据。方法针对ALR基因序列设计并合成4个siRNA靶点,酶切连接GV118-GFP载体,PCR筛... 目的筛选并构建肝再生增强因子(ALR)基因的最佳RNA干扰(RNA interference,RNAi)慢病毒表达载体,为研究ALR基因表达下调后对肝癌细胞生物学特性的影响提供依据。方法针对ALR基因序列设计并合成4个siRNA靶点,酶切连接GV118-GFP载体,PCR筛选阳性克隆,测序鉴定;在包含ALR基因的质粒中以PCR法扩增出ALR基因,克隆至慢病毒载体GV143,构建ALR基因的过表达质粒,将RNAi重组慢病毒载体和ALR的基因表达质粒共转染293T细胞,用western blot检测其对目的基因ALR的敲减效率。结果酶切鉴定证实成功构建了ALR RNAi慢病毒载体及ALR基因过表达载体。不同浓度干扰质粒(0.4μg和0.8μg)的western blot结果显示,相较于阴性对照组,KD1组ALR蛋白的表达水平(0.51±0.02,0.36±0.09)、KD2组ALR蛋白的表达水平(0.65±0.04,0.49±0.02)、KD3组ALR蛋白的表达水平(0.62±0.07,0.52±0.02)均降低(P均<0.05),而以KD1组蛋白表达量最低。结论成功筛选并构建了能有效沉默ALR基因的最佳RNAi重组慢病毒载体,为后续实验奠定基础。 展开更多
关键词 肝再生增强因子基因 RNA干扰 慢病毒载体
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