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重组人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体对家兔纤溶和凝血系统活性的影响 被引量:2
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作者 董六一 范丽 +5 位作者 江勤 方明 岑德意 陈飞虎 智强 陈志武 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2004年第7期778-780,共3页
目的 :观察重组人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体 (reteplase ,Ret)对家兔纤溶和凝血系统活性的影响。方法 :采用常规方法测定家兔血液纤溶和凝血系统相关参数指标。结果 :Ret(3.75、7.5 0、15 .0MIU·kg-1)可明显降低纤溶酶原含量 ... 目的 :观察重组人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体 (reteplase ,Ret)对家兔纤溶和凝血系统活性的影响。方法 :采用常规方法测定家兔血液纤溶和凝血系统相关参数指标。结果 :Ret(3.75、7.5 0、15 .0MIU·kg-1)可明显降低纤溶酶原含量 ,使血浆纤维蛋白降解产物转呈阳性反应 ,缩短优球蛋白溶解时间 ,同时延长血浆凝血酶时间 ,凝血酶原时间及活化部分凝血活酶时间。结论 展开更多
关键词 重组人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体 组织酶原激活剂 系统 凝血系统 家兔
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重组人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体对猕猴的长期毒性研究
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作者 董六一 左翔 +4 位作者 范丽 方明 陈飞虎 智强 陈志武 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期582-584,共3页
目的 观察重组人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体(reteplase,Ret)的长期毒性作用。 方法 连续 14d给猕猴静脉注射不同剂量Ret。结果 Ret 8 0MIU·kg-1对猕猴不表现任何毒性作用 ,Ret 2 5 0、80 0MIU·kg-1组的血液RBC、HGB及... 目的 观察重组人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体(reteplase,Ret)的长期毒性作用。 方法 连续 14d给猕猴静脉注射不同剂量Ret。结果 Ret 8 0MIU·kg-1对猕猴不表现任何毒性作用 ,Ret 2 5 0、80 0MIU·kg-1组的血液RBC、HGB及HCT均降低 ,部分猕猴粪便隐血试验阳性 ,血液生化学检查有TP下降 ,但这些指标在停药 14d时基本恢复正常。另外 ,所有给药猕猴出血时间均延长 ,但脏器系数和病理学未见有毒性变化。结论 Ret静脉注射 8 0MIU·kg-1是安全剂量 ,2 5 0、80 0MIU·kg-1两个剂量有一定的毒性反应 ,主要表现为贫血和出血 ,停药后毒性可以恢复。 展开更多
关键词 重组人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体 长期毒性 猕猴
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重组人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体对犬冠状动脉血栓的溶栓作用
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作者 李春海 刘亚千 +2 位作者 陈华 智强 王喜群 《中国比较医学杂志》 CAS 2006年第9期518-521,F0002,共5页
目的观察重组人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体(reteplase)对犬冠状动脉血栓的溶栓作用。方法实验用杂种犬,设溶剂对照组r、eteplase 100×104、50×104和25×104IU/kg 4组。手术分离冠状动脉左旋支(LCX),以血管内膜粗糙+电... 目的观察重组人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体(reteplase)对犬冠状动脉血栓的溶栓作用。方法实验用杂种犬,设溶剂对照组r、eteplase 100×104、50×104和25×104IU/kg 4组。手术分离冠状动脉左旋支(LCX),以血管内膜粗糙+电刺激法形成冠状动脉左旋支血栓,检测静脉注射不同剂量reteplase后对冠状动脉左旋支血流量、栓塞再通率、心肌梗死范围、伤口失血量和末梢出血时间的影响。结果静脉注射reteplase可使栓塞的冠状动脉血管很快出现再通,血流量显著增加,心肌梗塞范围明显缩小,明显增加伤口出血量,延长末梢出血时间,rete-plase各剂量组与溶剂对照组比较均有显著差别(P<0.001)。结论reteplase对犬冠状动脉血栓具有显著的溶栓作用。 展开更多
关键词 重组人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体 冠状动脉 血流量
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重组人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体基因的克隆及工程菌的构建与鉴定 被引量:2
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作者 陈于红 朱镇华 +6 位作者 刘蓓钫 张菁 傅一工 王石泉 张巍 杨庆 刘建宁 《南京大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期1-6,共6页
 利用RT PCR技术,从人脐带静脉上皮细胞中克隆人组织型纤溶酶原激活剂基因,将其接入TA克隆载体PCR2.1中,经DNA序列测定后,以该重组质粒DNA为模板,用PCR方法获得了人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体(K2tPA)基因,将其转入pET29a,构建了重...  利用RT PCR技术,从人脐带静脉上皮细胞中克隆人组织型纤溶酶原激活剂基因,将其接入TA克隆载体PCR2.1中,经DNA序列测定后,以该重组质粒DNA为模板,用PCR方法获得了人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体(K2tPA)基因,将其转入pET29a,构建了重组表达质粒pET29a/K2tPA,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,构成工程菌.经IPTG诱导表达,在40kDa处有一明显表达条带,表达量为约占菌体总蛋白的20%.该菌种在贮存与复苏及传代过程中具有良好的质粒稳定性和表达稳定性. 展开更多
关键词 组织酶原激活剂基因 工程菌 质粒稳定性 表达稳定性 克隆
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重组人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体的工业化制备与性质研究 被引量:1
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作者 朱镇华 孙自勇 +7 位作者 陈于红 张菁 王石泉 杨庆 刘莉莉 丁楅森 陈新园 刘建宁 《南京大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期7-15,共9页
 将含有人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体(K2tPA)重组表达质粒的工程菌经10L种子罐培养及100L发酵,IPTG诱导表达,其表达量为占菌体总蛋白的20%,表达产物经体外变复性、TI Sepharose亲和层析、SP Sepharose离子交换层析,每100L发酵液得...  将含有人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体(K2tPA)重组表达质粒的工程菌经10L种子罐培养及100L发酵,IPTG诱导表达,其表达量为占菌体总蛋白的20%,表达产物经体外变复性、TI Sepharose亲和层析、SP Sepharose离子交换层析,每100L发酵液得重组人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体(K2tPA)纯品4g,纯度达95%以上,比活大于500000IU/mg,内毒素及热源含量、宿主蛋白残留量、宿主DNA残留量等均达到临床使用标准.其分子量(质谱测定)、氨基酸组成、N、C-端氨基酸序列分析等均与理论值相符.同时进行了等电点测定及肽图分析等性质研究. 展开更多
关键词 重组人组织酶原激活剂 缺失 制备 发酵 活化 纯化 蛋白
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重组人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体的药效学研究
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作者 赵专友 刘厚孝 +5 位作者 张菁 陈于红 张巍 朱镇华 王石泉 刘建宁 《南京大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期16-27,共12页
 犬静脉给予重组人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体(K2tPA)1×106IU/kg、5×105IU/kg、2.5×105IU/kg对冠脉血栓产生显著的溶栓效果,栓塞冠脉血管很快出现再通,高、中、低剂量组残存血栓较溶剂对照组分别减少了72.7%、55.6%...  犬静脉给予重组人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体(K2tPA)1×106IU/kg、5×105IU/kg、2.5×105IU/kg对冠脉血栓产生显著的溶栓效果,栓塞冠脉血管很快出现再通,高、中、低剂量组残存血栓较溶剂对照组分别减少了72.7%、55.6%、42.5%;心肌梗死范围明显缩小.血纤维蛋白原明显降解,凝血酶原时间、凝血酶时间及陶土激活部分凝血酶时间明显延长,但抗凝血酶活性无显著改变.伤口出血量增加,出血时间延长.以上指标与等剂量(5×105IU/kg)的德国BoehringerMannheimGmbH产品Retavase作用相似.离体家兔血小板凝集实验结果表明:重组人K2tPA对家兔血小板聚集功能具有明显的抑制作用. 展开更多
关键词 重组人组织酶原激活剂 缺失 药效学 维蛋白原 血小板聚集 心脑血管病
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