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重组人磷脂酶D2在体内能明显抑制慢性哮喘豚鼠血清中GPI-PLD的表达(英文)
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作者 朱玲 余传星 +2 位作者 邹伟斌 何小丽 林俊锦 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期116-121,共6页
通过建立慢性豚鼠哮喘模型,研究重组人磷脂酶D2(rhPLD2)干预慢性哮喘豚鼠血清中糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D(GPI-PLD)含量的变化,探寻可能的机制.以rhPLD2干预慢性哮喘豚鼠,用TX-114分相法检测豚鼠血清中GPI-PLD酶活性.与正常状态豚... 通过建立慢性豚鼠哮喘模型,研究重组人磷脂酶D2(rhPLD2)干预慢性哮喘豚鼠血清中糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D(GPI-PLD)含量的变化,探寻可能的机制.以rhPLD2干预慢性哮喘豚鼠,用TX-114分相法检测豚鼠血清中GPI-PLD酶活性.与正常状态豚鼠相比较,慢性哮喘状态豚鼠其血清中GPI-PLD酶活性显著升高.但以rhPLD2及地塞米松干预慢性哮喘豚鼠后,该指标显著下降.rhPLD2可通过抑制其血清中GPI-PLD酶活性表达,来抑制哮喘发生过程中的炎症反应. 展开更多
关键词 重组人磷脂酶d2 糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶d 慢性哮喘 豚鼠
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不含氨基端的人磷脂酶D2在大肠杆菌中的表达及其抗炎活性研究(英文) 被引量:1
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作者 朱玲 徐剑峰 +2 位作者 余传星 陆惠民 黄伟达 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期991-998,共8页
目的研究重组人磷脂酶D2(rhPLD2)在体内外的免疫学活性,尤其是研究其抗炎活性。方法将编码rh-PLD2的cDNA片段经RT-PCR克隆至pET-30a载体中,并纯化来自包涵体中由大肠杆菌表达的rhPLD2重组蛋白。通过测定豚鼠慢性哮喘模型的支气管肺泡灌... 目的研究重组人磷脂酶D2(rhPLD2)在体内外的免疫学活性,尤其是研究其抗炎活性。方法将编码rh-PLD2的cDNA片段经RT-PCR克隆至pET-30a载体中,并纯化来自包涵体中由大肠杆菌表达的rhPLD2重组蛋白。通过测定豚鼠慢性哮喘模型的支气管肺泡灌洗液(BALF)和血液中嗜酸性粒细胞的数量及肺组织中IL-5、MMP-9的表达来评定rhPLD2重组蛋白的抗炎活性。结果从人Daudi细胞中获得了不含膜结合部位及信号肽的,可编码631个氨基酸的rh-PLD2 cDNA序列(GenBank登录号:AY178289)。rhPLD2重组蛋白的纯度约76%,其生物活性达到50.9745U/L(0.9212g/L)。用rhPLD2治疗慢性哮喘动物模型证实了其的抗炎功效。包括:能下调炎性细胞因子IL-5的表达。结论由大肠杆菌表达的rhPLD2重组蛋白具有抗炎活性。 展开更多
关键词 重组人磷脂酶d2 哮喘 动物模型 抗炎活性
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pEGFP-rhPLD_2融合基因在CHO细胞株中的稳定表达
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作者 陈秋雁 左娟 +1 位作者 何小丽 朱玲 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期775-778,共4页
目的建立可以稳定表达增强型绿色荧光蛋白-重组人磷脂酶D2(pEGFP-rhPLD2)的CHO细胞株,从而制备大量的重组PLD2(rhPLD2)蛋白,为rhPLD2的功能研究奠定基础。方法用脂质体介导pEGFP-rhPLD2重组质粒转染CHO细胞株,经G418加压筛选出阳性克隆,... 目的建立可以稳定表达增强型绿色荧光蛋白-重组人磷脂酶D2(pEGFP-rhPLD2)的CHO细胞株,从而制备大量的重组PLD2(rhPLD2)蛋白,为rhPLD2的功能研究奠定基础。方法用脂质体介导pEGFP-rhPLD2重组质粒转染CHO细胞株,经G418加压筛选出阳性克隆,用RT-PCR、Western blot检测pEGFP-rhPLD2融合蛋白的表达,用倒置荧光显微镜观察增强型绿色荧光蛋白的表达。结果pEGFP-rhPLD2融合基因整合入细胞基因组DNA中,成功建立了pEGFP-rhPLD2在CHO细胞中的稳定表达体系。结论获得了稳定表达pEGFP-rhPLD2的CHO细胞株,为进一步研究rhPLD2的生物学功能及其在疾病预防治疗方面的作用奠定了实验基础。 展开更多
关键词 重组人磷脂酶d2 增强型绿色荧光蛋白 融合蛋白 CHO细胞 稳定转染 脂质体
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