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重组人白细胞介素6对照射小鼠造血功能恢复的作用 被引量:1
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作者 黄成龙 邱丽玲 +3 位作者 柳晓兰 张卿西 王嘉玺 毛秉智 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1995年第4期427-431,共5页
^(60)Coγ线6.5Gy照射小鼠经每天2次、连续4天皮下注射500μg/kg的重组人白细胞介素6(rhIL-6) 时,10天后照射小鼠脾结节数(CFU-S)、脾重和造血祖细胞数(CFC-Mix、CFC-GM和CFC-MK)明显增高,但红系造血祖细胞数(CFC-E)轻度降低。另外在照... ^(60)Coγ线6.5Gy照射小鼠经每天2次、连续4天皮下注射500μg/kg的重组人白细胞介素6(rhIL-6) 时,10天后照射小鼠脾结节数(CFU-S)、脾重和造血祖细胞数(CFC-Mix、CFC-GM和CFC-MK)明显增高,但红系造血祖细胞数(CFC-E)轻度降低。另外在照后14-22天期间,外周血白细胞、红细胞及血小板数明显增高。进一步研究还发现,rhIL-6明显提高照射小鼠13天的脾结节(CFU-S)、骨髓CFU-Mix的自杀率,因而提示rhIL-6能刺激照射小鼠造血干细胞的增殖作用。结果提示,当在照射小鼠体内应用rhIL-6时,rhIL-6能刺激多能造血干细胞向粒系、红系和巨核系祖细胞分化,因而是一种有效的多向性造血生长因子且可望用于临床。 展开更多
关键词 重组人白细胞介素6 造血功能 造血干细胞 辐射损伤
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聚乙二醇化重组人白细胞介素6的放射性标记 被引量:1
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作者 徐贤坤 王霜 +1 位作者 曾宪垠 汪淑芳 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期236-240,共5页
分别用常规氯氨T和改进的双相氯氨T法对PEG-rhIL-6进行放射性碘标记,用柱层析法和离心超滤法对标记物分离纯化,同时用三氯乙酸沉淀法和SDS-PAGE电泳法鉴定纯化后的标记化合物放射化学纯度,采用rhIL-6依赖细胞7TD1,用MTT比色法测定标记... 分别用常规氯氨T和改进的双相氯氨T法对PEG-rhIL-6进行放射性碘标记,用柱层析法和离心超滤法对标记物分离纯化,同时用三氯乙酸沉淀法和SDS-PAGE电泳法鉴定纯化后的标记化合物放射化学纯度,采用rhIL-6依赖细胞7TD1,用MTT比色法测定标记物的生物学活性。结果表明:1.改进的双相氯氨T法标记率为74.5%,高于常规氯氨T法的62.3%,放射性比活度分别为5.513×105和4.610×105Bq/μg。2.经柱层析法和离心超滤法对标记物分离纯化后,用三氯乙酸沉淀法测得放射化学纯度均能达到99%以上。3.用SDS-PAGE电泳法检测两种标记方法所得的标记物与非标记物的结果表明,常规氯氨T法标记物比非标记物多1条高分子量蛋白带,认为是标记过程中蛋白质受到部分损伤;改进的双相氯氨T的标记物与非标记物蛋白质条带一致,认为蛋白质标记后基本没有受到损伤。4.生物活性检测表明改进的双相氯氨T标记物与非标记物活性之间无显著差异,常规氯氨T法标记物活性略低于双相氯氨T的标记物活性。 展开更多
关键词 聚乙二醇化重组人白细胞介素-6 放射性碘标记 离心超滤法 MTT比色法
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聚乙二醇化重组人白细胞介素-6经不同途径给药的药代动力学比较研究 被引量:2
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作者 何学令 杨光 +1 位作者 尹海林 张雪梅 《四川动物》 CSCD 北大核心 2009年第2期259-261,共3页
目的研究聚乙二醇化重组人白细胞介素-6不同给药途径的药代动力学。方法将大鼠分为皮下给药组、静脉给药组,每组各设3个剂量组。分别按40μg/kg、20μg/kg、3μg/kg给药。同位素示踪法用碘标记PEG-rhIL-6,采用TCA沉淀法检测放射性浓度,3... 目的研究聚乙二醇化重组人白细胞介素-6不同给药途径的药代动力学。方法将大鼠分为皮下给药组、静脉给药组,每组各设3个剂量组。分别按40μg/kg、20μg/kg、3μg/kg给药。同位素示踪法用碘标记PEG-rhIL-6,采用TCA沉淀法检测放射性浓度,3P87软件判断房室模型并计算各种参数,并检测125I-PEG-rhIL-6皮下注射大鼠后不同时间的血药浓度。结果①静脉给药大鼠体内的血药浓度-时间曲线符合二房室模型,而皮下给药大鼠体内的血药浓度-时间曲线符合一房室模型;②皮下给药的达峰时间比静脉给药慢,但其有效血药浓度维持时间较静脉给药长;③皮下给药较静脉给药各时点血药浓度低。结论皮下给药毒性低,是一种安全可靠的给药方法;同时有效血药浓度维持时间较长,有利于治疗血小板减少症。 展开更多
关键词 聚乙二醇化重组人白细胞介素-6 药代动力学 不同给药方法
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重组人白细胞介素-6(IL-6)受体基因导入大鼠髓性白血病细胞及基因表达 被引量:6
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作者 任蕴芳 郭宁 +3 位作者 张贺秋 毛宁 A.C.M.Martens A.Hagenbeek 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1994年第1期35-41,共7页
可移植性大鼠急性粒系白血病(Brown Norway rat acute myelocytic leukemia,BNML)是研究人急性粒系白血病的颇为完备的实验模型。由于重组人IL-6(rhIL-6)可作用于大鼠,然而大鼠BNML细胞系LT12缺乏rhIL-6受体(rhIL-6R)表达。为了在BNML... 可移植性大鼠急性粒系白血病(Brown Norway rat acute myelocytic leukemia,BNML)是研究人急性粒系白血病的颇为完备的实验模型。由于重组人IL-6(rhIL-6)可作用于大鼠,然而大鼠BNML细胞系LT12缺乏rhIL-6受体(rhIL-6R)表达。为了在BNML模型探讨rhIL-6在体外以及体内对白血病细胞增殖和分化的影响,本文应用改良的磷酸钙共沉淀法将携带rhIL-6R cDNA的逆转录病毒表达质粒XM6/IL-6RNeo导入LT12细胞,经过G418筛选获得G418抗性克隆,建立了表达rhIL-6R的LT12亚细胞系(称之为R cell lines)。我们分别应用三种不同的方法(rhIL-6R的单克隆抗体和FACScan检测、^(125)I-rhIL-6的配基结合分析测定、地高辛配基标记的rhIL-6R cDNA探针的细胞原位杂交技术)分折了R细胞系在体外不同条件下传代过程中及给BN大鼠尾静脉回输后其rhIL-6R的表达。研究结果表明,用改良的磷酸钙共沉淀法将编码rhIL-6R cDNA和Neo^R基因的逆转录病毒表达质粒XM6/IL-6RNeo导入LT12细胞系后,受体细胞在体外含适当浓度G418的基质液中传代培养,可长期稳定表达rhIL-6R,给BN大鼠尾静脉回输后20天左右,其脾脏和骨髓细胞均可检测到rhIL-6R的明显表达,而且~3H-TdR掺入分析证明细胞膜表面所表达的rhIL-6R可以介导外源性rhIL-6信号传到细胞核内。 展开更多
关键词 大鼠白血病细胞 逆转录病毒载体 基因转移 重组人白细胞介素-6受体
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重组人IL-6对近曲肾小管上皮细胞增殖及生物学表型的影响 被引量:1
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作者 詹林达 梁蔚文 +1 位作者 魏菁 邹和群 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期188-191,共4页
【目的】观察重组人白细胞介素6(rIL-6)在体外对人近曲肾小管上皮细胞株(HK-2)增殖及生物学表型的影响。探讨rIL-6对HK-2细胞作用的时间-效应及剂量-效应关系。【方法】用MTT比色法检测rIL-6对细胞增殖的影响;用流式细胞术检测rIL-6对... 【目的】观察重组人白细胞介素6(rIL-6)在体外对人近曲肾小管上皮细胞株(HK-2)增殖及生物学表型的影响。探讨rIL-6对HK-2细胞作用的时间-效应及剂量-效应关系。【方法】用MTT比色法检测rIL-6对细胞增殖的影响;用流式细胞术检测rIL-6对细胞周期及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)阳性细胞百分率的影响;倒置显微镜观察rIL-6对HK-2细胞形态改变的影响。【结果】MTT比色法示,rIL-6在10~50ng/mL作用浓度范围内促进HK-2细胞增殖,呈剂量、时间依赖效应;rIL-6作用浓度为100~200ng/mL时抑制细胞增殖,随作用浓度增加抑制作用加强(F=201.582,P<0.001),(F=43.943,P<0.001)。rIL-6影响HK-2细胞的DNA合成。HK-2细胞有基础量的α-SMA表达,25ng/mLrIL-6与HK-2孵育1~48h后,α-SMA阳性细胞百分率高峰出现在48h(F=442.22,P<0.001)。rIL-6干预下,HK-2细胞形态由卵园型渐转变为长棱型、长条型。【结论】rIL-6可促进HK-2细胞增殖及生物学表型的转化,但大剂量的rIL-6可抑制HK-2细胞增殖。 展开更多
关键词 重组人白细胞介素6 人近曲肾小管上皮细胞 Α-平滑肌肌动蛋白
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大鼠gp130反义寡核苷酸阻断rhIL-6对大鼠急性髓系白血病细胞系R2体外增殖的抑制效应(英文)
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作者 任蕴芳 冯明钊 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2002年第1期27-30,共4页
IL 6受体 (IL 6R) β链是分子量为 130kD的膜结合糖蛋白 (gp130 ) ,它是介导IL 6生物效应的信号转导子。我们的实验已经证实了重组人IL 6 (rhIL 6 )可作用于大鼠急性髓系白血病细胞系R2 ,rhIL 6与R2细胞表达的hIL 6R结合并与大鼠 gp130... IL 6受体 (IL 6R) β链是分子量为 130kD的膜结合糖蛋白 (gp130 ) ,它是介导IL 6生物效应的信号转导子。我们的实验已经证实了重组人IL 6 (rhIL 6 )可作用于大鼠急性髓系白血病细胞系R2 ,rhIL 6与R2细胞表达的hIL 6R结合并与大鼠 gp130缔合而转导IL 6的信号 ,产生其生物效应。本文在体外液体培养中试验观察到 ,大鼠 gp130的反义寡核苷酸片段被摄入R2细胞后 ,对rhIL 6生物效应产生明显的影响。我们的研究结果表明 ,所合成的大鼠gp130反义寡核苷酸片段在细胞体外液体培养中可部分阻断rhIL 6对R2细胞的增殖抑制效应 ,在最适的终浓度 ,其阻断率可达 (45± 7) %。 展开更多
关键词 GP130 反义寡核苷酸 重组人白细胞介素6 R2细胞 细胞增殖抑制 白血病
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重组人截短型IL-6在大肠杆菌DH5α中的高效表达与纯化 被引量:3
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作者 韩俊宏 孔令洪 +4 位作者 郑瑾 齐旭 来宝长 司履生 王一理 《西北大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期481-484,共4页
为研究重组人截短型白细胞介素6(rhIL-6)工程菌高效表达的影响因素及纯化方法的优化。观察不同培养温度对重组人截短型IL-6工程菌生长密度和IL-6表达的影响;复性蛋白终浓度对复性效率的影响;细菌诱导培养后,经破菌-洗包-溶包初步纯化后... 为研究重组人截短型白细胞介素6(rhIL-6)工程菌高效表达的影响因素及纯化方法的优化。观察不同培养温度对重组人截短型IL-6工程菌生长密度和IL-6表达的影响;复性蛋白终浓度对复性效率的影响;细菌诱导培养后,经破菌-洗包-溶包初步纯化后,再经柱层析纯化IL-6。其结果为30℃培养后42℃诱导培养5h的IL-6表达效率最高,达32.8%;复性蛋白终浓度在0.5g/L以下时,蛋白复性效率最佳,比活性为4.42×108μmol/min·mg-1;进一步柱层析后,IL-6的纯度达96.5%,得率可达46.5%。最后得出培养和纯化工艺简便易行,可获得高纯度、高比活性的截短型rhIL-6的结论。 展开更多
关键词 重组人白细胞介素-6 大肠杆菌 高效表达 纯化
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高压匀浆破碎释放重组大肠杆菌提取包含体过程的研究 被引量:11
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作者 吴蕾 洪建辉 +1 位作者 甘一如 张瑛 《高校化学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2001年第2期191-194,共4页
用高压匀浆机对重组大肠杆菌细胞进行破碎以释放重组人白细胞介素-6(rhIL-6)包含体,系统研究了高压匀浆过程中物理和化学因素的影响,包括匀浆次数,操作压力,料液的pH 及悬浮体系的影响。从而选择操作压力为80MPa,悬浮体系为去离子... 用高压匀浆机对重组大肠杆菌细胞进行破碎以释放重组人白细胞介素-6(rhIL-6)包含体,系统研究了高压匀浆过程中物理和化学因素的影响,包括匀浆次数,操作压力,料液的pH 及悬浮体系的影响。从而选择操作压力为80MPa,悬浮体系为去离子水,经3次破碎,表达量为20%的菌体可获得粗包含体的纯度约为40%。此外,本文还对该高压匀浆破碎过程进行了动力学分析。 展开更多
关键词 高压匀浆 重组人白细胞介素-6 重组大肠杆菌 动力学 包含体 破碎
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