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地高辛标记核酸探针检测重组人白细胞介素1受体颉颃剂中DNA残余量的研究
1
作者
王超
刘庚
张林波
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2013年第11期54-58,共5页
试验旨在建立重组人白细胞介素1受体颉颃剂(interleukin-1receptor antagonist,IL-1ra)原液中宿主菌DNA残余量的检测方法。以重组白细胞介素1受体颉颃剂工程菌基因组DNA为模板,优化试验条件,借助超声波手段,制备地高辛标记的核酸探针,...
试验旨在建立重组人白细胞介素1受体颉颃剂(interleukin-1receptor antagonist,IL-1ra)原液中宿主菌DNA残余量的检测方法。以重组白细胞介素1受体颉颃剂工程菌基因组DNA为模板,优化试验条件,借助超声波手段,制备地高辛标记的核酸探针,并以此探针进行狭缝杂交及显色反应。结果显示,在24批次重组人IL-1ra原液中,每人份使用剂量的宿主DNA残余量均小于10ng。结果表明,该方法灵敏度较高、特异性较强、重复性较好、操作步骤安全且较为方便,可用于重组人IL-1ra原液及半成品的DNA残余检测。
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关键词
DNA残余量
地高辛
重组人白细胞介素1受体颉颃剂
狭缝杂交
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职称材料
白细胞介素1受体颉颃剂抑制脂多糖促奶牛外周血单个核细胞氧化应激损伤作用的研究
2
作者
郭咏梅
齐敬宇
+2 位作者
闫素梅
赵艳丽
郭晓宇
《饲料工业》
CAS
2024年第4期100-105,共6页
试验以脂多糖(LPS)为刺激源,以细胞活力、抗氧化指标和炎症因子为判断指标,探讨白细胞介素1受体颉颃剂(IL-1Ra)通过抑制白细胞介素1β(IL-1β)的活性,对LPS诱导外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)氧化损伤的...
试验以脂多糖(LPS)为刺激源,以细胞活力、抗氧化指标和炎症因子为判断指标,探讨白细胞介素1受体颉颃剂(IL-1Ra)通过抑制白细胞介素1β(IL-1β)的活性,对LPS诱导外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)氧化损伤的缓解作用。试验采用单因子完全随机设计,PBMCs被随机分为7个组(每组6个重复),分别给予不同的处理:第1组是阴性对照组(Neg组),完全培养基培养30 h;第2组损伤组(Dam组),是在完全培养基中培养6 h后,再经10μg/mL的LPS工作液培养24 h;第3至7组(R0.25、R0.5、R1、R5组和R10组)细胞分别经浓度为0.25、0.5、1、5、10 ng/mL的IL-1Ra培养6 h,接着经10μg/mL的LPS工作液培养24 h。结果表明:与Neg组相比,Dam组的细胞活力、抗氧化相关酶[包括总抗氧化能力(T-AOC)以及总超氧化物歧化酶(T-SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)和硫氧还蛋白还原酶(TrxR)]的活性显著降低,丙二醛(MDA)浓度、炎症因子白细胞介素-6(IL-6)和IL-1β含量以及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性、一氧化氮(NO)含量均显著升高(P≤0.05)。与Dam组相比,R1组显著逆转了氧化损伤引起的上述抗氧化活性的降低和炎症因子浓度的升高,其他IL-1Ra处理组对上述指标的逆转效果不同程度地低于R1组(P≤0.05)。上述结果说明,LPS通过诱发PBMCs产生大量IL-1β进而导致细胞氧化损伤,IL-1Ra剂量依赖性地缓解了LPS引起的氧化损伤,添加剂量以1 ng/mL为宜。
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关键词
奶牛外周血单个核
细胞
氧化应激
剂
量依赖性
白细胞
介素
1
受体
颉
颃
剂
预保护作用
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职称材料
HSA/IL1ra融合蛋白的纯化及生物学活性研究
3
作者
沈其
陈枢青
《浙江大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第3期260-264,共5页
目的:纯化HSA/IL1ra融合蛋白并对其生物学活性进行检测。方法:采用亲和层析及离子交换层析分离纯化HSA/IL1ra融合蛋白,检测其对IL1引起的对A375 S2的杀伤保护作用。结果:获得的HSA/IL1ra融合蛋白HPLC纯度在98%以上,并且具有与天然IL1ra...
目的:纯化HSA/IL1ra融合蛋白并对其生物学活性进行检测。方法:采用亲和层析及离子交换层析分离纯化HSA/IL1ra融合蛋白,检测其对IL1引起的对A375 S2的杀伤保护作用。结果:获得的HSA/IL1ra融合蛋白HPLC纯度在98%以上,并且具有与天然IL1ra相似的、对IL1杀伤A375 S2细胞的保护作用。结论:获得高纯度的HSA/IL1ra融合蛋白并且具有相应的生物学活性。
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关键词
受体
白细胞
介素
1/拮抗
剂
和抑制
剂
血清白蛋白
重组
融合蛋白质类/分离和提纯
重组
融合蛋白质类/生物合成
黑色素瘤
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职称材料
题名
地高辛标记核酸探针检测重组人白细胞介素1受体颉颃剂中DNA残余量的研究
1
作者
王超
刘庚
张林波
机构
吉林农业大学生命科学学院
吉林农业大学中药材学院
出处
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2013年第11期54-58,共5页
基金
国家自然基金(31072127)
文摘
试验旨在建立重组人白细胞介素1受体颉颃剂(interleukin-1receptor antagonist,IL-1ra)原液中宿主菌DNA残余量的检测方法。以重组白细胞介素1受体颉颃剂工程菌基因组DNA为模板,优化试验条件,借助超声波手段,制备地高辛标记的核酸探针,并以此探针进行狭缝杂交及显色反应。结果显示,在24批次重组人IL-1ra原液中,每人份使用剂量的宿主DNA残余量均小于10ng。结果表明,该方法灵敏度较高、特异性较强、重复性较好、操作步骤安全且较为方便,可用于重组人IL-1ra原液及半成品的DNA残余检测。
关键词
DNA残余量
地高辛
重组人白细胞介素1受体颉颃剂
狭缝杂交
Keywords
residual DNA
digoxigenin
recombinant interleukin-
1
receptor antagonist
slot blotting
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
白细胞介素1受体颉颃剂抑制脂多糖促奶牛外周血单个核细胞氧化应激损伤作用的研究
2
作者
郭咏梅
齐敬宇
闫素梅
赵艳丽
郭晓宇
机构
内蒙古农业大学动物科学学院
出处
《饲料工业》
CAS
2024年第4期100-105,共6页
基金
内蒙古农业大学青年教师科研能力提升专项[BR22014]
内蒙古农业大学高层次人才科研启动项目[NDYB2020-4]。
文摘
试验以脂多糖(LPS)为刺激源,以细胞活力、抗氧化指标和炎症因子为判断指标,探讨白细胞介素1受体颉颃剂(IL-1Ra)通过抑制白细胞介素1β(IL-1β)的活性,对LPS诱导外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)氧化损伤的缓解作用。试验采用单因子完全随机设计,PBMCs被随机分为7个组(每组6个重复),分别给予不同的处理:第1组是阴性对照组(Neg组),完全培养基培养30 h;第2组损伤组(Dam组),是在完全培养基中培养6 h后,再经10μg/mL的LPS工作液培养24 h;第3至7组(R0.25、R0.5、R1、R5组和R10组)细胞分别经浓度为0.25、0.5、1、5、10 ng/mL的IL-1Ra培养6 h,接着经10μg/mL的LPS工作液培养24 h。结果表明:与Neg组相比,Dam组的细胞活力、抗氧化相关酶[包括总抗氧化能力(T-AOC)以及总超氧化物歧化酶(T-SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)和硫氧还蛋白还原酶(TrxR)]的活性显著降低,丙二醛(MDA)浓度、炎症因子白细胞介素-6(IL-6)和IL-1β含量以及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性、一氧化氮(NO)含量均显著升高(P≤0.05)。与Dam组相比,R1组显著逆转了氧化损伤引起的上述抗氧化活性的降低和炎症因子浓度的升高,其他IL-1Ra处理组对上述指标的逆转效果不同程度地低于R1组(P≤0.05)。上述结果说明,LPS通过诱发PBMCs产生大量IL-1β进而导致细胞氧化损伤,IL-1Ra剂量依赖性地缓解了LPS引起的氧化损伤,添加剂量以1 ng/mL为宜。
关键词
奶牛外周血单个核
细胞
氧化应激
剂
量依赖性
白细胞
介素
1
受体
颉
颃
剂
预保护作用
Keywords
peripheral blood mononuclear cells
oxidative stress
dose-dependent manner
interleukin-
1
receptor antagonist
pre-protective effect
分类号
S816.7 [农业科学]
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职称材料
题名
HSA/IL1ra融合蛋白的纯化及生物学活性研究
3
作者
沈其
陈枢青
机构
浙江大学药学院药理毒理与生化药学研究所
出处
《浙江大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第3期260-264,共5页
基金
浙江省卫生厅科研基金资助项目(2007A049)
台州市-浙江大学科技合作专项
文摘
目的:纯化HSA/IL1ra融合蛋白并对其生物学活性进行检测。方法:采用亲和层析及离子交换层析分离纯化HSA/IL1ra融合蛋白,检测其对IL1引起的对A375 S2的杀伤保护作用。结果:获得的HSA/IL1ra融合蛋白HPLC纯度在98%以上,并且具有与天然IL1ra相似的、对IL1杀伤A375 S2细胞的保护作用。结论:获得高纯度的HSA/IL1ra融合蛋白并且具有相应的生物学活性。
关键词
受体
白细胞
介素
1/拮抗
剂
和抑制
剂
血清白蛋白
重组
融合蛋白质类/分离和提纯
重组
融合蛋白质类/生物合成
黑色素瘤
Keywords
Receptors, interleukin-
1
/antag
Serum albumin
Recombinant fusion proteins/isol
Recombinant fusion proteins/biosyn
Melanoma
分类号
R346 [医药卫生—基础医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
地高辛标记核酸探针检测重组人白细胞介素1受体颉颃剂中DNA残余量的研究
王超
刘庚
张林波
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2013
0
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下载PDF
职称材料
2
白细胞介素1受体颉颃剂抑制脂多糖促奶牛外周血单个核细胞氧化应激损伤作用的研究
郭咏梅
齐敬宇
闫素梅
赵艳丽
郭晓宇
《饲料工业》
CAS
2024
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
HSA/IL1ra融合蛋白的纯化及生物学活性研究
沈其
陈枢青
《浙江大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2009
0
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职称材料
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