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重组人单链白细胞介素12融合基因(rhscIL-12)的构建和真核表达被引量：1: 1; 作者张梅司履生 +1 位作者王一理耿宜苹《西安医科大学学报》 CSCD 2000年第4期297-302,共6页; 克隆人 IL - 1 2 ( h IL - 1 2 ) p40和 p35亚单位 c DNA,构建人单链 IL- 1 2 ( rhsc IL- 1 2 )融合基因 ,并在哺乳动物细胞中进行表达。方法　从经 PDBu刺激的 EBV转化的人 B淋巴母细胞株 NC37中提取 m RNA,经 RT- PCR分别获得 h IL- 1... 展开更多; 关键词重组人单链白细胞介素12 融合基因真核表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

小鼠单链白细胞介素-12重组卡介苗的构建与表达被引量：1: 2; 作者张黎王瑜伟 +3 位作者何永林李娜王爽帖儒修《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期257-260,共4页; 目的:构建携带小鼠白细胞介素-12基因的重组卡介苗(Bacille calmette-guerin,BCG),并鉴定该重组菌向真核细胞递呈质粒的能力。方法:以分子生物学方法构建携带小鼠IL-12基因和分支杆菌复制子OriM的真核穿梭共表达质粒pBM12,以电转化的方... 展开更多; 关键词白细胞介素12 重组卡介苗真核表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

重组白细胞介素4受体(IL-4R)噬菌体单链抗体库构建及筛选被引量：7: 3; 作者杨光勇郭海涛 +5 位作者刘茜明何光志田维毅蔡琨王平王文佳《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期829-833,共5页; 目的应用噬菌体展示技术构建重组白细胞介素4受体（IL-4R）噬菌体单链抗体（sc Fv）库,并从抗体库中进行筛选。方法利用重组人IL-4R（rh IL-4R）蛋白免疫BALB/c小鼠,提取总RNA,反转录PCR扩增V_H和V_L基因,经重叠延伸PCR扩增出带有限制... 展开更多; 关键词重组人白细胞介素4(rhIL-4R) 噬菌体展示技术单链抗体; 在线阅读下载PDF 职称材料

重组猪单链IL-12的构建及真核表达被引量：1: 4; 作者王雪梅袁远英 +3 位作者方强夏惠孙新李柏青《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1687-1692,共6页; 目的克隆猪IL-12(pIL-12)p35和p40亚单位cDNA,构建含有重组猪单链IL-12(pscIL-12)融合基因的真核表达质粒并进行表达。方法分别从正常成年肉猪的外周血单个核细胞(PBMCs)和脾淋巴细胞中提取总RNA,经RT-PCR分别获得pIL-12 p35和p40亚单... 展开更多; 关键词白细胞介素-12 单链猪分子克隆真核表达 CHO-K1细胞; 在线阅读下载PDF 职称材料

GLS/IL-12重组BCG的构建及其对小鼠结核病疗效的研究被引量：3: 5; 作者杨春张黎 +5 位作者伊正君何永林王渝伟李娜徐蕾朱道银《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期774-778,共5页; 目的构建携带编码人天然颗粒溶素(GLS)和小鼠IL-12基因质粒(pZM03)的重组卡介苗(BCG),并观察其对结核分枝杆菌感染的疗效与机制。方法将分枝杆菌复制子OriM克隆进已含GLS和IL-12的多启动子真核共表达载体pBudCE4.1中(pZM02),得到穿梭质... 展开更多; 关键词颗粒溶素白细胞介素-12 重组卡介苗结核病; 在线阅读下载PDF 职称材料

rhIL-12对恒河猴造血系统辐射防护作用的初步研究被引量：12: 6; 作者熊国林赵毅 +10 位作者邢爽申星宁学成卢世香李建郭玲玲郝锐陈廷超缪锦来贺济琛罗庆良《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期150-154,共5页; 本研究旨在初步观察重组人白介素-12(rhIL-12)对急性辐射损伤猴造血系统的防护和治疗作用,为同类型病人的临床救治提供实验依据。在体外实验中,观察了不同浓度rhIL-12(0、1、5、25、125和625 ng/ml)对来自人和健康成年猴骨髓造血祖细胞... 展开更多; 关键词重组人白细胞介素-12 辐射损伤急性放射病恒河猴; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名重组人单链白细胞介素12融合基因(rhscIL-12)的构建和真核表达被引量：1: 1; 作者张梅司履生王一理耿宜苹; 机构西安交通大学第一医院血液病研究室西安交通大学免疫病理研究室; 出处《西安医科大学学报》 CSCD 2000年第4期297-302,共6页; 基金陕西省自然科学基金! ( 99SM4 9); 文摘克隆人 IL - 1 2 ( h IL - 1 2 ) p40和 p35亚单位 c DNA,构建人单链 IL- 1 2 ( rhsc IL- 1 2 )融合基因 ,并在哺乳动物细胞中进行表达。方法　从经 PDBu刺激的 EBV转化的人 B淋巴母细胞株 NC37中提取 m RNA,经 RT- PCR分别获得 h IL- 1 2 p40和 p35亚单位编码序列的 c DNA,运用重组 PCR技术将两段基因通过一疏水性多肽接头 ( Gly4 Ser) 3 DNA序列进行体外基因重组 ,构建 rhsc IL- 1 2融合基因 ,将其插入 pc DNA3.1 ( + )真核表达载体 ,经脂质体转染 COS7细胞进行表达 ,Western blot进行分析。结果　所克隆的 h IL- 1 2 p40、p35c DNA序列和构建的 rhsc IL - 1 2融合基因 DNA序列均经测序得以证实 ,融合基因可在 COS7中表达其产物 rhsc IL- 1 2融合蛋白 ,其分子量为 70 KD,可与鼠抗人 IL - 1 2 p40 /p70单克隆抗体特异性结合。结论　本研究结果为进一步探讨 rhsc IL- 1 2融合蛋白的生物学活性和特性奠定了基础 ,也为 rhsc IL- 1; 关键词重组人单链白细胞介素12 融合基因真核表达; Keywords human interleukin 12(hIL 12) recombinant human single chain interleukin 12; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名小鼠单链白细胞介素-12重组卡介苗的构建与表达被引量：1: 2; 作者张黎王瑜伟何永林李娜王爽帖儒修; 机构重庆医科大学附属第一医院眼科重庆医科大学基础医学院免疫学教研室重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室; 出处《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期257-260,共4页; 基金国家自然科学基金项目(304000375); 文摘目的:构建携带小鼠白细胞介素-12基因的重组卡介苗(Bacille calmette-guerin,BCG),并鉴定该重组菌向真核细胞递呈质粒的能力。方法:以分子生物学方法构建携带小鼠IL-12基因和分支杆菌复制子OriM的真核穿梭共表达质粒pBM12,以电转化的方式将pBM12质粒转入BCG构建重组BCG,抽提质粒进行PCR鉴定重组菌;将重组菌感染巨噬细胞,通过RT-PCR了解重组菌向真核细胞递呈质粒的能力。结果:电转化方式可将pBM12导入BCG,抽提质粒鉴定出与mIL-12基因相符的目的条带。以该重组BCG感染小鼠巨噬细胞,96h后用RT-PCR法也扩增出1632bp左右的基因条带。结论:成功构建含pBM12的重组BCG。该重组BCG能向小鼠巨噬细胞递呈携带基因。; 关键词白细胞介素12 重组卡介苗真核表达; Keywords Granulysin Interleukin- 12 Recombinant BCG Eukaryotic expression; 分类号 R378.91 [医药卫生—病原生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名重组白细胞介素4受体(IL-4R)噬菌体单链抗体库构建及筛选被引量：7: 3; 作者杨光勇郭海涛刘茜明何光志田维毅蔡琨王平王文佳; 机构贵阳中医学院; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期829-833,共5页; 基金 2011年贵州省社会发展科技攻关项目[黔科合SY字(2011)3020] 贵州省委组织部高层次人才科研条件特助经费(TZJF-2011年28号) 2014年度贵阳中医学院"2011协同创新中心"联合资助; 文摘目的应用噬菌体展示技术构建重组白细胞介素4受体（IL-4R）噬菌体单链抗体（sc Fv）库,并从抗体库中进行筛选。方法利用重组人IL-4R（rh IL-4R）蛋白免疫BALB/c小鼠,提取总RNA,反转录PCR扩增V_H和V_L基因,经重叠延伸PCR扩增出带有限制性酶切位点的sc Fv,用限制性内切酶SfiⅠ和NotⅠ分别双酶切sc Fv和p CANTAB5E载体,利用T4连接酶进行连接,转入感受态细菌E.coli TG1中制备转化子;在培养基中培养得到噬菌体单链抗体库;通过3轮富集和筛选,选择抗原亲和力最强的克隆进行测序分析。结果经过3轮筛选,构建了库容为2×10~8的rh IL-4R单链抗体库,测序结果显示抗rh IL-4R蛋白sc Fv基因全长741 bp,编码247个氨基酸。通过VBASE2数据库分析,抗rh IL-4R蛋白的V_H和V_L基因序列都存在3个互补决定区和4个骨架区。结论成功构建了抗rh IL-4R蛋白噬菌体sc Fv库。; 关键词重组人白细胞介素4(rhIL-4R) 噬菌体展示技术单链抗体; Keywords recombinant human IL-4R phage display technique scFv; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学] Q789 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名重组猪单链IL-12的构建及真核表达被引量：1: 4; 作者王雪梅袁远英方强夏惠孙新李柏青; 机构蚌埠医学院病原生物学教研室蚌埠医学院安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠医学院免疫学教研室; 出处《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1687-1692,共6页; 基金国家自然科学基金(30600518 C030112)~~; 文摘目的克隆猪IL-12(pIL-12)p35和p40亚单位cDNA,构建含有重组猪单链IL-12(pscIL-12)融合基因的真核表达质粒并进行表达。方法分别从正常成年肉猪的外周血单个核细胞(PBMCs)和脾淋巴细胞中提取总RNA,经RT-PCR分别获得pIL-12 p35和p40亚单位编码序列的cDNA,应用重叠延伸PCR技术通过一柔性接头(linker)(Gly4Ser)3串联这两个亚基构建融合基因pscIL-12,将融合基因pscIL-12插入pcDNA3.1(+)真核表达载体,通过阳离子聚合物介导转染CHO-K1细胞进行表达,RT-PCR鉴定pscIL-12融合基因在真核细胞中的表达。结果所克隆的pIL-12 p35亚基和p40亚基的编码基因序列和构建的融合基因pscIL-12序列均经PCR、酶切、测序得以证实;融合基因pscIL-12在CHO-K1细胞中成功转录。结论成功构建了pcDNA3.1(+)-pscIL-12融合基因的真核表达质粒;pcDNA3.1(+)-pscIL-12在CHO-K1细胞中成功转录,为进一步探讨pscIL-12融合蛋白的生物学活性和疫苗佐剂效应奠定了基础。; 关键词白细胞介素-12 单链猪分子克隆真核表达 CHO-K1细胞; Keywords interleukin-12 single chain porcine molecular cloning eukaryotic expression CHO-K1 cells; 分类号 R392 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名GLS/IL-12重组BCG的构建及其对小鼠结核病疗效的研究被引量：3: 5; 作者杨春张黎伊正君何永林王渝伟李娜徐蕾朱道银; 机构重庆医科大学免疫学和微生物学教研室; 出处《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期774-778,共5页; 基金国家自然科学基金资助项目(No.30400375); 文摘目的构建携带编码人天然颗粒溶素(GLS)和小鼠IL-12基因质粒(pZM03)的重组卡介苗(BCG),并观察其对结核分枝杆菌感染的疗效与机制。方法将分枝杆菌复制子OriM克隆进已含GLS和IL-12的多启动子真核共表达载体pBudCE4.1中(pZM02),得到穿梭质粒pZM03,以pZM03电转化BCG获得重组BCG。结核分枝杆菌H37Rv感染Balb/c小鼠4周后分别用生理盐水、BCG、pZM03和重组BCG治疗,于第一次治疗后3个月,处死小鼠,检测器官荷菌量、脾淋巴细胞IFN-γ和TNF-α的分泌水平、血清IL-12和肺、脾组织中GLS表达,同时观察小鼠肺、脾组织病理改变情况。结果重组BCG治疗组肺、脾组织荷菌量比生理盐水组、BCG组和质粒组显著降低。重组BCG组和pZM03组经PPD刺激后IFN-γ和TNF-α分泌水平明显高于BCG组和生理盐水组。重组BCG组血清IL-12水平明显高于生理盐水组,但与pZM03质粒组和BCG载体组无明显差异。用免疫组化检测到小鼠肺及脾组织中GLS的表达。生理盐水和BCG组肺组织病理改变以渗出为主,病变广泛,增生改变不明显;重组BCG病变范围局限,并有大量类上皮细胞、泡沫细胞等细胞出现。结论成功构建携带GLS和IL-12的重组BCG;重组BCG对小鼠结核病有一定免疫治疗作用,系增强宿主Th1型免疫应答和抗菌活性有关。; 关键词颗粒溶素白细胞介素-12 重组卡介苗结核病; Keywords granulysin IL-12 recombinant BCG tuberculosis; 分类号 R378.911 [医药卫生—病原生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名rhIL-12对恒河猴造血系统辐射防护作用的初步研究被引量：12: 6; 作者熊国林赵毅邢爽申星宁学成卢世香李建郭玲玲郝锐陈廷超缪锦来贺济琛罗庆良; 机构军事医学科学院放射与辐射医学研究所青岛康立泰药业有限公司南昌市疾病预防控制中心; 出处《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期150-154,共5页; 文摘本研究旨在初步观察重组人白介素-12(rhIL-12)对急性辐射损伤猴造血系统的防护和治疗作用,为同类型病人的临床救治提供实验依据。在体外实验中,观察了不同浓度rhIL-12(0、1、5、25、125和625 ng/ml)对来自人和健康成年猴骨髓造血祖细胞集落形成能力的影响。在体内实验中,用11只经3.0 Gy全身照射后90 d活存猴再经致死剂量60Coγ(6.0 Gy)射线全身1次照射以建立重度骨髓型急性放射病动物模型。模型动物被随机分为照射对照组(n=4)、单次给药组(n=3)和分次给药组(n=4)。单次给药组于照射后2 h皮下注射rhIL-12 4μg/kg,分次给药组分别于照射后2 h和3、6、9 d皮下注射rhIL-12 1μg/kg,对照组于皮下注射同样体积的PBS。观察照射后动物活存情况和外周血象变化。体外培养结果显示,不同浓度rhIL-12可明显促进正常猴和人骨髓单个核细胞形成各系造血祖细胞集落,特别是CFU-E和CFU-GM最为明显。照射对照组动物于照射后22 d内全部死亡,死亡动物平均活存时间为(20.3±1.2)d;rhIL-12单次给药组3只动物全部存活,rhIL-12分次给药组1只动物于照射后17 d因贫血死亡。与对照组比较,rhIL-12治疗能明显提高动物存活(P=0.018),并促进外周血白细胞数、血红蛋白水平、血小板以及网织红细胞数的恢复(P<0.05)。结论:rhIL-12可明显促进灵长类骨髓造血祖细胞体外集落形成,并明显促进重度骨髓型急性放射病猴的造血功能恢复,提高动物存活率。; 关键词重组人白细胞介素-12 辐射损伤急性放射病恒河猴; Keywords recombinant human interleukin-12 radiation injury acute radiation sickness rhesus monkey; 分类号 R818 [医药卫生—放射医学] R818.05 [医药卫生—放射医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	重组人单链白细胞介素12融合基因(rhscIL-12)的构建和真核表达	张梅司履生王一理耿宜苹	《西安医科大学学报》 CSCD	2000	1	在线阅读下载PDF 职称材料
2	小鼠单链白细胞介素-12重组卡介苗的构建与表达	张黎王瑜伟何永林李娜王爽帖儒修	《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2009	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	重组白细胞介素4受体(IL-4R)噬菌体单链抗体库构建及筛选	杨光勇郭海涛刘茜明何光志田维毅蔡琨王平王文佳	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2016	7	在线阅读下载PDF 职称材料
4	重组猪单链IL-12的构建及真核表达	王雪梅袁远英方强夏惠孙新李柏青	《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2011	1	在线阅读下载PDF 职称材料
5	GLS/IL-12重组BCG的构建及其对小鼠结核病疗效的研究	杨春张黎伊正君何永林王渝伟李娜徐蕾朱道银	《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心	2007	3	在线阅读下载PDF 职称材料
6	rhIL-12对恒河猴造血系统辐射防护作用的初步研究	熊国林赵毅邢爽申星宁学成卢世香李建郭玲玲郝锐陈廷超缪锦来贺济琛罗庆良	《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2013	12	在线阅读下载PDF 职称材料