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重组人Ⅲ型胶原蛋白的分离纯化
被引量：
5
1
作者
梁鑫
张仁怀
+5 位作者
吕自力
艾华伟
刘冬
梁波
单旭东
陈浩然
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第16期159-163,共5页
利用分泌表达重组人Ⅲ型胶原蛋白的毕赤酵母发酵液,通过层析条件的优化,建立了重组人Ⅲ型胶原蛋白一步层析纯化工艺。发酵液以硫酸铵(30%饱和度)沉淀胶原蛋白,沉淀用超纯水复溶后超滤转换介质至20 mmol/L磷酸缓冲液(phosphate buffer,PB...
利用分泌表达重组人Ⅲ型胶原蛋白的毕赤酵母发酵液,通过层析条件的优化,建立了重组人Ⅲ型胶原蛋白一步层析纯化工艺。发酵液以硫酸铵(30%饱和度)沉淀胶原蛋白,沉淀用超纯水复溶后超滤转换介质至20 mmol/L磷酸缓冲液(phosphate buffer,PB)(pH 6.0),然后用SP Sepharose HP阳离子交换柱进行纯化,以20mmol/L PB (pH 6.0)-150 mmol/L NaCl洗涤杂蛋白,以20 mmol/L PB (pH 6.0)-250 mmol/L Na Cl洗脱重组人Ⅲ型胶原蛋白。采用该工艺对60 L发酵液进行重组人Ⅲ型胶原蛋白的纯化,产品纯度97.7%,总回收率68.8%,纯化的重组人Ⅲ型胶原蛋白纯度高,热原含量低,可用于医药领域。该研究建立了一步层析法从毕赤酵母发酵液中高效制备重组人Ⅲ型胶原蛋白的纯化工艺,工艺简便、稳定可靠,离子交换层析放大容易,为重组人Ⅲ型胶原蛋白的工业化生产奠定了基础。
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关键词
毕赤酵母
重组人ⅲ型胶原蛋白
盐析
阳离子交换层析
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职称材料
负载无细胞脂肪提取物的rhCol Ⅲ水凝胶促进大鼠脊髓损伤修复
2
作者
杨标
吴中桓
+2 位作者
李廷栋
姜福贵
伍骏锋
《神经解剖学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第5期572-580,共9页
目的:探讨缓释无细胞脂肪提取物(CEFFE)的重组人Ⅲ型胶原蛋白(rhCol Ⅲ)水凝胶对脊髓损伤(SCI)的修复效果。方法:制备rhCol Ⅲ水凝胶并在其中添加CEFFE,形成可缓释CEFFE的rhCol Ⅲ水凝胶复合支架。选用大鼠制备SCI半切模型,随机分为3组:...
目的:探讨缓释无细胞脂肪提取物(CEFFE)的重组人Ⅲ型胶原蛋白(rhCol Ⅲ)水凝胶对脊髓损伤(SCI)的修复效果。方法:制备rhCol Ⅲ水凝胶并在其中添加CEFFE,形成可缓释CEFFE的rhCol Ⅲ水凝胶复合支架。选用大鼠制备SCI半切模型,随机分为3组:SCI组、rhCol Ⅲ组和rhCol Ⅲ/CEFFE组。结果:RhCol Ⅲ/CEFFE水凝胶具有三维多孔互连结构与合适的弹性模量,并且可以持续释放CEFFE。与其他组相比,rhCol Ⅲ/CEFFE组的运动功能得到显著改善;苏木精和伊红(HE)染色显示脊髓组织连续性更完整;酶联免疫吸附试验(ELISA)、牢固蓝(LFB)染色与免疫荧光结果显示RhCol Ⅲ/CEFFE水凝胶能够抑制炎症因子的表达,促进小胶质细胞向M2型转变,减少胶质疤痕的形成,并促进神经元分化,同时促进轴突再生与髓鞘形成。结论:rhCol Ⅲ/CEFFE水凝胶可重塑抑制性微环境,促进神经再生与神经网络形成,并最终有利于神经功能的恢复。
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关键词
脊髓损伤
无细胞脂肪提取物
重组人ⅲ型胶原蛋白
神经再生
大鼠
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职称材料
题名
重组人Ⅲ型胶原蛋白的分离纯化
被引量：
5
1
作者
梁鑫
张仁怀
吕自力
艾华伟
刘冬
梁波
单旭东
陈浩然
机构
成都中医药大学医学与生命科学学院
四川省人口和计划生育科学研究所
成都远睿生物技术有限公司
河南多美康生物药业有限公司
出处
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第16期159-163,共5页
基金
四川省科技厅项目(2018YSZH0028)
四川省卫生健康委课题(19PJ033)
四川省中医药管理局中医药科研专项(2018JC010)。
文摘
利用分泌表达重组人Ⅲ型胶原蛋白的毕赤酵母发酵液,通过层析条件的优化,建立了重组人Ⅲ型胶原蛋白一步层析纯化工艺。发酵液以硫酸铵(30%饱和度)沉淀胶原蛋白,沉淀用超纯水复溶后超滤转换介质至20 mmol/L磷酸缓冲液(phosphate buffer,PB)(pH 6.0),然后用SP Sepharose HP阳离子交换柱进行纯化,以20mmol/L PB (pH 6.0)-150 mmol/L NaCl洗涤杂蛋白,以20 mmol/L PB (pH 6.0)-250 mmol/L Na Cl洗脱重组人Ⅲ型胶原蛋白。采用该工艺对60 L发酵液进行重组人Ⅲ型胶原蛋白的纯化,产品纯度97.7%,总回收率68.8%,纯化的重组人Ⅲ型胶原蛋白纯度高,热原含量低,可用于医药领域。该研究建立了一步层析法从毕赤酵母发酵液中高效制备重组人Ⅲ型胶原蛋白的纯化工艺,工艺简便、稳定可靠,离子交换层析放大容易,为重组人Ⅲ型胶原蛋白的工业化生产奠定了基础。
关键词
毕赤酵母
重组人ⅲ型胶原蛋白
盐析
阳离子交换层析
Keywords
Pichia pastoris
recombinant human type
ⅲ
collagen
salting out
cation exchange chromatography
分类号
TQ920.1 [轻工技术与工程—发酵工程]
TQ936 [化学工程]
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职称材料
题名
负载无细胞脂肪提取物的rhCol Ⅲ水凝胶促进大鼠脊髓损伤修复
2
作者
杨标
吴中桓
李廷栋
姜福贵
伍骏锋
机构
黔东南苗族侗族自治州人民医院骨科
黔东南苗族侗族自治州人民医院泌尿外科
出处
《神经解剖学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第5期572-580,共9页
基金
黔东南州基础研究计划(黔东南科合基础[2023]21号)。
文摘
目的:探讨缓释无细胞脂肪提取物(CEFFE)的重组人Ⅲ型胶原蛋白(rhCol Ⅲ)水凝胶对脊髓损伤(SCI)的修复效果。方法:制备rhCol Ⅲ水凝胶并在其中添加CEFFE,形成可缓释CEFFE的rhCol Ⅲ水凝胶复合支架。选用大鼠制备SCI半切模型,随机分为3组:SCI组、rhCol Ⅲ组和rhCol Ⅲ/CEFFE组。结果:RhCol Ⅲ/CEFFE水凝胶具有三维多孔互连结构与合适的弹性模量,并且可以持续释放CEFFE。与其他组相比,rhCol Ⅲ/CEFFE组的运动功能得到显著改善;苏木精和伊红(HE)染色显示脊髓组织连续性更完整;酶联免疫吸附试验(ELISA)、牢固蓝(LFB)染色与免疫荧光结果显示RhCol Ⅲ/CEFFE水凝胶能够抑制炎症因子的表达,促进小胶质细胞向M2型转变,减少胶质疤痕的形成,并促进神经元分化,同时促进轴突再生与髓鞘形成。结论:rhCol Ⅲ/CEFFE水凝胶可重塑抑制性微环境,促进神经再生与神经网络形成,并最终有利于神经功能的恢复。
关键词
脊髓损伤
无细胞脂肪提取物
重组人ⅲ型胶原蛋白
神经再生
大鼠
Keywords
sspinal cord injury(SCI)
cell-free fat extract(CEFFE)
recombinant human collagen III protein(RhCol II)
neural regeneration
rat
分类号
R651.2 [医药卫生—外科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
重组人Ⅲ型胶原蛋白的分离纯化
梁鑫
张仁怀
吕自力
艾华伟
刘冬
梁波
单旭东
陈浩然
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2020
5
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下载PDF
职称材料
2
负载无细胞脂肪提取物的rhCol Ⅲ水凝胶促进大鼠脊髓损伤修复
杨标
吴中桓
李廷栋
姜福贵
伍骏锋
《神经解剖学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2024
0
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职称材料
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