真核系统表达的猪α干扰素(PoIFN-α)发酵液,经离心、收集上清液、透析过滤处理,通过FPLC-HisTrap HP Kit亲和层析系统分离纯化,最后以SDS-PAGE银染法检验。结果表明,在不同pH和NaCl浓度情况下,发酵液经亲和层析系统分离纯化后均可以得...真核系统表达的猪α干扰素(PoIFN-α)发酵液,经离心、收集上清液、透析过滤处理,通过FPLC-HisTrap HP Kit亲和层析系统分离纯化,最后以SDS-PAGE银染法检验。结果表明,在不同pH和NaCl浓度情况下,发酵液经亲和层析系统分离纯化后均可以得到较为单一的目的蛋白组分,而在pH8.2,NaCl0mmol/L的情况下得到的目的蛋白更纯,且非特异性吸附也较少。展开更多
采用分子量为20 k D单甲氧基聚乙二醇琥珀酰亚胺碳酸酯(m PEG-SC)修饰重组猪α干扰素,初步研究了修饰反应条件及分离纯化工艺。结果表明,单修饰PEG-IFNα的转化率达到65%,单修饰产品纯度达到97%。由于修饰产物相对分子质量和不均一性的...采用分子量为20 k D单甲氧基聚乙二醇琥珀酰亚胺碳酸酯(m PEG-SC)修饰重组猪α干扰素,初步研究了修饰反应条件及分离纯化工艺。结果表明,单修饰PEG-IFNα的转化率达到65%,单修饰产品纯度达到97%。由于修饰产物相对分子质量和不均一性的增加,导致其体外杭病毒活性降低,抗病毒活性保留达到未修饰重组猪α干扰素的29%,仍然具有良好的抗病毒作用。展开更多
文摘真核系统表达的猪α干扰素(PoIFN-α)发酵液,经离心、收集上清液、透析过滤处理,通过FPLC-HisTrap HP Kit亲和层析系统分离纯化,最后以SDS-PAGE银染法检验。结果表明,在不同pH和NaCl浓度情况下,发酵液经亲和层析系统分离纯化后均可以得到较为单一的目的蛋白组分,而在pH8.2,NaCl0mmol/L的情况下得到的目的蛋白更纯,且非特异性吸附也较少。
文摘采用分子量为20 k D单甲氧基聚乙二醇琥珀酰亚胺碳酸酯(m PEG-SC)修饰重组猪α干扰素,初步研究了修饰反应条件及分离纯化工艺。结果表明,单修饰PEG-IFNα的转化率达到65%,单修饰产品纯度达到97%。由于修饰产物相对分子质量和不均一性的增加,导致其体外杭病毒活性降低,抗病毒活性保留达到未修饰重组猪α干扰素的29%,仍然具有良好的抗病毒作用。
