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表达重症急性呼吸综合征病毒刺突蛋白重组新城疫病毒的构建及其免疫原性研究
被引量：
1
1
作者
汤筱艳
刘任强
+5 位作者
山丹
潘丹
王喜军
葛金英
温志远
步志高
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第11期1145-1151,共7页
重症急性呼吸综合征(SARS)是一种急性、发热并伴有呼吸系统甚至多脏器感染的人兽共患病。虽然自2004年以来未见SARS感染病例相关报道,但是2019年12月我国湖北省武汉市暴发的新型冠状病毒肺炎(COVID-19)疫情表明SARS冠状病毒(SARS-CoV)...
重症急性呼吸综合征(SARS)是一种急性、发热并伴有呼吸系统甚至多脏器感染的人兽共患病。虽然自2004年以来未见SARS感染病例相关报道,但是2019年12月我国湖北省武汉市暴发的新型冠状病毒肺炎(COVID-19)疫情表明SARS冠状病毒(SARS-CoV)或者类SARS冠状病毒(SARSL-CoV)在人群中再次大面积流行的可能性极高。本研究首先构建了表达SARS-CoV刺突蛋白(S蛋白)的全长cDNA克隆pBRN-FL-SARS-CoV-S,并利用新城疫病毒(NDV)LaSota疫苗株反向遗传操作系统,拯救出表达SARS-CoV S蛋白的重组病毒rLa-SARS-CoV-S并鉴定。将rLa-SARS-CoV-S以MOI 0.01的剂量感染BHK-21细胞36 h后分别通过western blot和激光共聚焦试验对SARS-CoV S蛋白进行检测,结果显示S蛋白在感染的细胞中能正确表达并准确定位于细胞膜上。将rLa-SARS-CoV-S以1×104 EID50的剂量接种10日龄的SPF鸡胚后在不同时间点收集尿囊液并测定EID50,病毒的生长动力学曲线显示rLa-SARSCoV-S能够在鸡胚中高滴度生长,与亲本病毒一致。将rLa-SARS-CoV-S和亲本病毒10倍倍比稀释后接种10日龄的SPF鸡胚并记录每个鸡胚的死亡时间,按病毒最高稀释度引起鸡胚的死亡时间计算鸡胚平均致死时间(MDT),结果显示rLa-SARS-CoV-S的MDT为112.8 h,NDV LaSota的MDT为96 h,说明该重组病毒仍然保持NDV LaSota疫苗株的低致病力特性。将rLa-SARS-CoV-S和NDV LaSota分别以5×106 EID50的剂量通过肌肉注射接种6周龄的BALB/c小鼠并在第21 d加强免疫,同时设置PBS对照组。小鼠安全性试验结果显示接种rLa-SARS-CoV-S的小鼠全部存活并且无任何临床症状,体质量增长情况与NDV LaSota组及对照组保持一致;免疫后21 d和42 d对小鼠采血制备血清,通过ELISA检测小鼠体内针对SARS-CoV S蛋白的IgG抗体水平,结果显示在初免和加强免疫后该重组蛋白均可以诱导小鼠产生较高水平的特异性IgG抗体,并且抗体水平可以维持较长一段时间。本研究结果表明rLa-SARS-CoV-S具有作为SARS-CoV候选疫苗的潜在价值,同时为研发SARS-CoV-2疫苗提供思路。
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关键词
重症急性呼吸综合征病毒刺突蛋白
重组新城疫
病
毒
免疫原性
在线阅读
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职称材料
基于刺突蛋白靶点的抗新型冠状病毒药物研究进展
2
作者
耿嘉懿
孙浩
+1 位作者
倪强
李秋钰
《中国医学科学院学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第6期1056-1062,共7页
重症急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)引起的新型冠状病毒肺炎(COVID-19)目前仍在不断蔓延,但针对该病毒的特效治疗药物尚在研发当中。本文基于冠状病毒生物学特点和病毒复制过程中的关键蛋白——刺突蛋白,介绍了相关药物作用位点...
重症急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)引起的新型冠状病毒肺炎(COVID-19)目前仍在不断蔓延,但针对该病毒的特效治疗药物尚在研发当中。本文基于冠状病毒生物学特点和病毒复制过程中的关键蛋白——刺突蛋白,介绍了相关药物作用位点及研究进展,为抗SARS-CoV-2药物的临床应用提供信息依据,为治疗COVID-19药物研发提供思路。
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关键词
重症
急性
呼吸
综合征
冠状
病
毒2
刺
突
蛋白
抑制剂
糖基化
中药
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职称材料
儿童新冠病毒Omicron株感染的临床表现与生物学基础
被引量：
3
3
作者
徐言文
王群
+1 位作者
项琳娟
黄丽素
《临床儿科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第10期795-800,共6页
严重急性呼吸系统综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)不断变异,新突变株奥密克戎(Omicron)成为当前主要流行株。与此同时,儿童感染者显著增加,儿童患者的临床表型也发生变化,如上呼吸道感染尤其急性喉炎比例增多、肺炎表现减少等。这些临床特...
严重急性呼吸系统综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)不断变异,新突变株奥密克戎(Omicron)成为当前主要流行株。与此同时,儿童感染者显著增加,儿童患者的临床表型也发生变化,如上呼吸道感染尤其急性喉炎比例增多、肺炎表现减少等。这些临床特点有其生物学基础,如病毒刺突蛋白高度变异、与宿主受体亲和力增加、入侵宿主细胞途径转变、合胞体形成能力减弱等,导致Omicron在传染性、传播特征、临床表型、致病性和免疫逃逸能力方面均发生显著变化,并由此带来了预防、治疗及预后的不同。文章就儿童Omicron感染的临床表现及相关生物学基础进行阐述。
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关键词
严重
急性
呼吸
系统
综合征
冠状
病
毒2
新型冠状
病
毒
病
奥密克戎株
刺
突
蛋白
突
变
儿童
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职称材料
题名
表达重症急性呼吸综合征病毒刺突蛋白重组新城疫病毒的构建及其免疫原性研究
被引量：
1
1
作者
汤筱艳
刘任强
山丹
潘丹
王喜军
葛金英
温志远
步志高
机构
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第11期1145-1151,共7页
基金
国家重点研发计划课题“边境地区外来动物疫病阻断及防控体系研究”(2017YFD0501804)。
文摘
重症急性呼吸综合征(SARS)是一种急性、发热并伴有呼吸系统甚至多脏器感染的人兽共患病。虽然自2004年以来未见SARS感染病例相关报道,但是2019年12月我国湖北省武汉市暴发的新型冠状病毒肺炎(COVID-19)疫情表明SARS冠状病毒(SARS-CoV)或者类SARS冠状病毒(SARSL-CoV)在人群中再次大面积流行的可能性极高。本研究首先构建了表达SARS-CoV刺突蛋白(S蛋白)的全长cDNA克隆pBRN-FL-SARS-CoV-S,并利用新城疫病毒(NDV)LaSota疫苗株反向遗传操作系统,拯救出表达SARS-CoV S蛋白的重组病毒rLa-SARS-CoV-S并鉴定。将rLa-SARS-CoV-S以MOI 0.01的剂量感染BHK-21细胞36 h后分别通过western blot和激光共聚焦试验对SARS-CoV S蛋白进行检测,结果显示S蛋白在感染的细胞中能正确表达并准确定位于细胞膜上。将rLa-SARS-CoV-S以1×104 EID50的剂量接种10日龄的SPF鸡胚后在不同时间点收集尿囊液并测定EID50,病毒的生长动力学曲线显示rLa-SARSCoV-S能够在鸡胚中高滴度生长,与亲本病毒一致。将rLa-SARS-CoV-S和亲本病毒10倍倍比稀释后接种10日龄的SPF鸡胚并记录每个鸡胚的死亡时间,按病毒最高稀释度引起鸡胚的死亡时间计算鸡胚平均致死时间(MDT),结果显示rLa-SARS-CoV-S的MDT为112.8 h,NDV LaSota的MDT为96 h,说明该重组病毒仍然保持NDV LaSota疫苗株的低致病力特性。将rLa-SARS-CoV-S和NDV LaSota分别以5×106 EID50的剂量通过肌肉注射接种6周龄的BALB/c小鼠并在第21 d加强免疫,同时设置PBS对照组。小鼠安全性试验结果显示接种rLa-SARS-CoV-S的小鼠全部存活并且无任何临床症状,体质量增长情况与NDV LaSota组及对照组保持一致;免疫后21 d和42 d对小鼠采血制备血清,通过ELISA检测小鼠体内针对SARS-CoV S蛋白的IgG抗体水平,结果显示在初免和加强免疫后该重组蛋白均可以诱导小鼠产生较高水平的特异性IgG抗体,并且抗体水平可以维持较长一段时间。本研究结果表明rLa-SARS-CoV-S具有作为SARS-CoV候选疫苗的潜在价值,同时为研发SARS-CoV-2疫苗提供思路。
关键词
重症急性呼吸综合征病毒刺突蛋白
重组新城疫
病
毒
免疫原性
Keywords
SARS-CoV spike protein
recombinant Newcastle disease virus
immunogenicity
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
基于刺突蛋白靶点的抗新型冠状病毒药物研究进展
2
作者
耿嘉懿
孙浩
倪强
李秋钰
机构
北京大学第三医院呼吸与危重医学科
出处
《中国医学科学院学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第6期1056-1062,共7页
基金
国家自然科学基金(81900641)
北京大学医学部交叉种子基金(BMU2021MX020、BMU2022MX008)。
文摘
重症急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)引起的新型冠状病毒肺炎(COVID-19)目前仍在不断蔓延,但针对该病毒的特效治疗药物尚在研发当中。本文基于冠状病毒生物学特点和病毒复制过程中的关键蛋白——刺突蛋白,介绍了相关药物作用位点及研究进展,为抗SARS-CoV-2药物的临床应用提供信息依据,为治疗COVID-19药物研发提供思路。
关键词
重症
急性
呼吸
综合征
冠状
病
毒2
刺
突
蛋白
抑制剂
糖基化
中药
Keywords
severe acute respiratory syndrome coronavirus 2
spike protein
inhibitor
glycosylation
Chinese medicine
分类号
R978.7 [医药卫生—药品]
在线阅读
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职称材料
题名
儿童新冠病毒Omicron株感染的临床表现与生物学基础
被引量：
3
3
作者
徐言文
王群
项琳娟
黄丽素
机构
上海交通大学医学院附属新华医院新华儿童医院感染科
浙江大学医学院附属儿童医院国家儿童健康与疾病临床医学研究中心
出处
《临床儿科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第10期795-800,共6页
文摘
严重急性呼吸系统综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)不断变异,新突变株奥密克戎(Omicron)成为当前主要流行株。与此同时,儿童感染者显著增加,儿童患者的临床表型也发生变化,如上呼吸道感染尤其急性喉炎比例增多、肺炎表现减少等。这些临床特点有其生物学基础,如病毒刺突蛋白高度变异、与宿主受体亲和力增加、入侵宿主细胞途径转变、合胞体形成能力减弱等,导致Omicron在传染性、传播特征、临床表型、致病性和免疫逃逸能力方面均发生显著变化,并由此带来了预防、治疗及预后的不同。文章就儿童Omicron感染的临床表现及相关生物学基础进行阐述。
关键词
严重
急性
呼吸
系统
综合征
冠状
病
毒2
新型冠状
病
毒
病
奥密克戎株
刺
突
蛋白
突
变
儿童
Keywords
severe acute respiratory syndrome coronavirus 2
corona virus disease 2019
Omicron
spike protein
variation
child
分类号
R725.6 [医药卫生—儿科]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
表达重症急性呼吸综合征病毒刺突蛋白重组新城疫病毒的构建及其免疫原性研究
汤筱艳
刘任强
山丹
潘丹
王喜军
葛金英
温志远
步志高
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
基于刺突蛋白靶点的抗新型冠状病毒药物研究进展
耿嘉懿
孙浩
倪强
李秋钰
《中国医学科学院学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
儿童新冠病毒Omicron株感染的临床表现与生物学基础
徐言文
王群
项琳娟
黄丽素
《临床儿科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2022
3
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