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禽分枝杆菌副结核亚种重组蛋白r22-ag85B的表达及纯化
被引量：
2
1
作者
杨金国
王聃
+10 位作者
刘慧芳
杜艳芬
司微
赵海玲
林靖凯
王春来
倪红波
赫明雷
彭玮
赵福广
刘思国
《中国动物传染病学报》
CAS
2009年第2期59-62,共4页
为表达并纯化禽分枝杆菌副结核亚种主要抗原基因的串联重组蛋白r22-ag85B,期望研制出一种新型副结核病疫苗,以禽分枝杆菌副结核亚种参考株P18的基因组DNA为模板,扩增了22KD基因和ag85B基因。采用重叠延伸剪接PCR技术(SOE-PCR)获得了融...
为表达并纯化禽分枝杆菌副结核亚种主要抗原基因的串联重组蛋白r22-ag85B,期望研制出一种新型副结核病疫苗,以禽分枝杆菌副结核亚种参考株P18的基因组DNA为模板,扩增了22KD基因和ag85B基因。采用重叠延伸剪接PCR技术(SOE-PCR)获得了融合基因22-ag85B,将基因连接于表达载体pET32a(+),构建了重组质粒pET22-ag85B。将其转化到大肠杆菌感受态细胞BL21(DE3)中,以IPTG(终浓度1mmol/L)诱导后对表达产物进行Western blot检测。检测结果显示,成功表达并纯化了重组蛋白r22-ag85B,其分子质量约为65ku。Western blot检测表明此蛋白具有良好的免疫学活性。禽分枝杆菌副结核亚种22-ag85B重组蛋白的成功表达及纯化为副结核病疫苗的研究工作奠定了基础。
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关键词
禽分枝杆菌副结核亚种
22KD基因
ag85B基因
重叠延伸剪接技术
重组表达
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职称材料
题名
禽分枝杆菌副结核亚种重组蛋白r22-ag85B的表达及纯化
被引量：
2
1
作者
杨金国
王聃
刘慧芳
杜艳芬
司微
赵海玲
林靖凯
王春来
倪红波
赫明雷
彭玮
赵福广
刘思国
机构
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室
吉林农业大学生命科学学院
延边大学
出处
《中国动物传染病学报》
CAS
2009年第2期59-62,共4页
文摘
为表达并纯化禽分枝杆菌副结核亚种主要抗原基因的串联重组蛋白r22-ag85B,期望研制出一种新型副结核病疫苗,以禽分枝杆菌副结核亚种参考株P18的基因组DNA为模板,扩增了22KD基因和ag85B基因。采用重叠延伸剪接PCR技术(SOE-PCR)获得了融合基因22-ag85B,将基因连接于表达载体pET32a(+),构建了重组质粒pET22-ag85B。将其转化到大肠杆菌感受态细胞BL21(DE3)中,以IPTG(终浓度1mmol/L)诱导后对表达产物进行Western blot检测。检测结果显示,成功表达并纯化了重组蛋白r22-ag85B,其分子质量约为65ku。Western blot检测表明此蛋白具有良好的免疫学活性。禽分枝杆菌副结核亚种22-ag85B重组蛋白的成功表达及纯化为副结核病疫苗的研究工作奠定了基础。
关键词
禽分枝杆菌副结核亚种
22KD基因
ag85B基因
重叠延伸剪接技术
重组表达
Keywords
Mycobacterium avium subsp, paratuberculosis
22KD gene
ag85B gene
splicing by overlapping extension （SOE）
recombinant expression
分类号
S852.618 [农业科学—基础兽医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
禽分枝杆菌副结核亚种重组蛋白r22-ag85B的表达及纯化
杨金国
王聃
刘慧芳
杜艳芬
司微
赵海玲
林靖凯
王春来
倪红波
赫明雷
彭玮
赵福广
刘思国
《中国动物传染病学报》
CAS
2009
2
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