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α-淀粉酶和糖化酶的表达及酿酒酵母工程菌的构建 被引量:9
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作者 吴晓萍 李文清 +2 位作者 罗进贤 后茂立 林资诚 《中山大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期80-84,共5页
将切除了5′端非编码区50碱基对片段的黑曲霉糖化酶GAIcDNA与大麦α淀粉酶基因重组进大肠杆菌酵母穿梭载体,构建重组表达质粒pMAG11,转化酿酒酵母GRF18,获得含α淀粉酶和糖化酶双基因的酵母工程菌GRF1... 将切除了5′端非编码区50碱基对片段的黑曲霉糖化酶GAIcDNA与大麦α淀粉酶基因重组进大肠杆菌酵母穿梭载体,构建重组表达质粒pMAG11,转化酿酒酵母GRF18,获得含α淀粉酶和糖化酶双基因的酵母工程菌GRF18(pMAG11).在酵母PGK基因启动子和终止信号的调控下,α淀粉酶和糖化酶基因获得高效表达,99%的表达产物分泌至胞外.在含w=15%的可溶性淀粉的YPS培养基中培养44h,淀粉水解率达到99%。 展开更多
关键词 Α-淀粉酶 糖化酶 基因表达 酿酒酵母工程菌 分解淀粉
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酿酒酵母工程菌产3-甲硫基丙醇的发酵条件优化 被引量:1
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作者 杨雪莲 张凯丽 +3 位作者 李金玉 张秋晨 罗霞 王成涛 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期94-101,共8页
为提高天然香料3-甲硫基丙醇的得率,本研究采用单因素和正交设计实验对表达脱羧酶酿酒酵母工程菌的发酵条件进行优化。确定了工程菌的最佳发酵培养基为:蛋氨酸5g/L,微量元素2%(v/v),酵母提取物4g/L,蛋白胨12g/L,KH2PO410g/L,K2HPO42g/L... 为提高天然香料3-甲硫基丙醇的得率,本研究采用单因素和正交设计实验对表达脱羧酶酿酒酵母工程菌的发酵条件进行优化。确定了工程菌的最佳发酵培养基为:蛋氨酸5g/L,微量元素2%(v/v),酵母提取物4g/L,蛋白胨12g/L,KH2PO410g/L,K2HPO42g/L,葡萄糖20g/L,G418 400μg/L。最适发酵条件为:接种量10%,pH为5,发酵温度30℃,转速200r/min。优化后3-甲硫基丙醇的浓度可达4.38g/L,较初始条件提高了3.5倍。 展开更多
关键词 3-甲硫基丙醇 酿酒酵母工程菌 正交实验 发酵优化
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酿酒酵母工程菌发酵产青蒿酸的工艺优化 被引量:3
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作者 于文文 陈伟 +3 位作者 滕云 陈亚军 徐美冬 杨胜利 《精细化工》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第5期856-864,共9页
通过酿酒酵母工程菌(Saccharomyces cerevisiae 1211)发酵制备青蒿酸,并通过单因素实验和响应面优化,考察了发酵温度、pH、半乳糖质量浓度、发酵碳源及发酵氮源等对青蒿酸发酵产量的影响。结果表明:在发酵温度30℃,发酵培养基初始pH=5.5... 通过酿酒酵母工程菌(Saccharomyces cerevisiae 1211)发酵制备青蒿酸,并通过单因素实验和响应面优化,考察了发酵温度、pH、半乳糖质量浓度、发酵碳源及发酵氮源等对青蒿酸发酵产量的影响。结果表明:在发酵温度30℃,发酵培养基初始pH=5.5,发酵培养基中蔗糖质量浓度91.8 g/L,半乳糖质量浓度10.1 g/L,硫酸铵质量浓度10.3 g/L,磷酸二氢钾质量浓度8.7 g/L的条件下,青蒿酸发酵产量可达(1529.7±12.6)mg/L,与未优化时的发酵产量相比,提升了67.1%。 展开更多
关键词 酿酒酵母工程菌 青蒿酸 发酵 培养基优化 响应面分析法 生物工程
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酿酒酵母工程菌产青蒿酸的发酵动力学研究 被引量:2
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作者 陈伟 于文文 +2 位作者 陈亚军 徐彬 滕云 《中国酿造》 CAS 北大核心 2020年第4期126-130,共5页
以青蒿酸产量为考察指标,在50 L发酵罐中对酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)工程菌1211发酵产青蒿酸的溶氧参数进行优化。在此基础上,根据Logistic方程及Luedeking-Piret方程构建酿酒酵母工程菌1211分批发酵产青蒿酸的动力学模型。... 以青蒿酸产量为考察指标,在50 L发酵罐中对酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)工程菌1211发酵产青蒿酸的溶氧参数进行优化。在此基础上,根据Logistic方程及Luedeking-Piret方程构建酿酒酵母工程菌1211分批发酵产青蒿酸的动力学模型。结果表明,当溶氧参数为25%~30%时,青蒿酸产量最高,为(6 269.6±100.3)mg/L。青蒿酸合成与菌体生长呈现部分生长偶联型。通过Origin 9.0软件对动力学模型进行非线性拟合,发现S. cerevisiae工程菌1211的菌体繁殖生长、青蒿酸合成以及基质消耗动力学模型的拟合度R2分别达到了0.995 85、0.979 04和0.995 48,该动力学模型能够很好的描述S. cerevisiae工程菌1211分批发酵过程。该研究为青蒿酸的低成本发酵及工业化大规模发酵生产提供了理论基础。 展开更多
关键词 青蒿酸 酿酒酵母工程菌1211 溶氧 分批发酵 动力学模型
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ChIFN-γ酿酒酵母工程菌粉的毒性与营养分析
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作者 刘宗 宋莉 赵德刚 《山地农业生物学报》 2015年第3期14-18,30,共6页
从感官特性、微生物和重金属含量及营养成分等方面,对具有抗禽病毒活性的Ch IFN-γ酿酒酵母工程菌粉进行毒性和营养品质分析。结果表明,Ch IFN-γ酿酒酵母工程菌粉具有酵母的正常特性,含水量低,复水后活细胞率高;其细菌、霉菌、铅和总... 从感官特性、微生物和重金属含量及营养成分等方面,对具有抗禽病毒活性的Ch IFN-γ酿酒酵母工程菌粉进行毒性和营养品质分析。结果表明,Ch IFN-γ酿酒酵母工程菌粉具有酵母的正常特性,含水量低,复水后活细胞率高;其细菌、霉菌、铅和总砷含量均符合国标卫生学要求。工程菌粉的灰分、总糖、总磷和总钙含量高于野生型菌粉,粗脂肪含量与野生型菌粉接近,但粗蛋白质和粗纤维含量显著低于野生型菌粉;工程菌粉的总必需氨基酸和总非必需氨基酸含量较高,赖氨酸、甲硫氨酸和亮氨酸3种必需氨基酸的含量高于野生型菌粉;第一限制性氨基酸为苯丙氨酸+酪氨酸,第二限制性氨基酸为缬氨酸。工程菌粉的蛋白模式不符合蛋白质饲料要求。 展开更多
关键词 酿酒酵母工程菌 鸡γ干扰素 毒性 营养分析
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酿酒酵母代谢木糖工程菌的构建 被引量:1
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作者 汤斌 张风琴 +1 位作者 汤文晶 丁丽霞 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期16-20,共5页
通过PCR方法从休哈塔假丝酵母基因组DNA中克隆得到木糖还原酶(XR)基因XYL1和木糖醇脱氢酶(XDH)基因XYL2,将其分别连接到酵母表达载体pYES2上,得到重组表达载体pYES2-XYL1和pYES2-XYL2,从pYES2-XYL1上克隆得到含半乳糖启动子的XYL1,将其... 通过PCR方法从休哈塔假丝酵母基因组DNA中克隆得到木糖还原酶(XR)基因XYL1和木糖醇脱氢酶(XDH)基因XYL2,将其分别连接到酵母表达载体pYES2上,得到重组表达载体pYES2-XYL1和pYES2-XYL2,从pYES2-XYL1上克隆得到含半乳糖启动子的XYL1,将其连接到pYES2-XYL2序列的下游,得到重组表达载体pYES2-XYL1-XYL2,通过电转化方法将pYES2-XYL1-XYL2转入酿酒酵母宿主菌INVSc1。在初始pH为5.5,温度为33℃,前5h转速为150r/min,后变为50r/min的条件下,乙醇产量为33.45g/L。 展开更多
关键词 休哈塔假丝酵母 木糖还原酶 木糖醇脱氢酶 pYES2-XYL1-XYL2 酿酒酵母工程菌
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可降解淀粉酿酒酵母基因工程菌的构建及其生产应用 被引量:1
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作者 程少菊 张添元 +1 位作者 罗进贤 吴群悦 《中山大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期128-130,共3页
将酿酒酵母的rDNA片段,黑曲霉葡萄糖淀粉酶基因表达盒及G418抗性基因表达盒重组进经过改造的质粒pSP72,构建酿酒酵母整合型质粒YIp4RGAn及YIp19RGAn,转化酿酒酵母实验室菌株GRF18、生产菌株JL108、SD和JM,获得能高效表达葡萄糖淀粉酶和... 将酿酒酵母的rDNA片段,黑曲霉葡萄糖淀粉酶基因表达盒及G418抗性基因表达盒重组进经过改造的质粒pSP72,构建酿酒酵母整合型质粒YIp4RGAn及YIp19RGAn,转化酿酒酵母实验室菌株GRF18、生产菌株JL108、SD和JM,获得能高效表达葡萄糖淀粉酶和分解淀粉的酿酒酵母基因工菌。Southern印迹分析证明,葡萄糖淀粉酶基因已整合进工程菌染色体。这些工程菌在含有20%淀粉的培养基中培养,产酒率都在11%以上。 展开更多
关键词 降解淀粉 酿酒酵母工程菌 酒精生产 重组DNA技术
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